大鼠輔助性原位肝移植的體會

1、【摘要】目的研究大鼠輔助性原位肝移植模型的手術(shù)技巧及術(shù)后并發(fā)癥的預(yù)防。方法30只SD大鼠作供體。30只SD大鼠為受體。通過“袖套法”施行大鼠輔助性原位肝移植。結(jié)果24h存活率76％(1925)；周存活率56％(1425)。結(jié)論熟練的顯徽外科技術(shù)是模型成功與否的關(guān)鍵?！娟P(guān)鍵詞】肝臟；移植；大鼠ParitalauxiliarythotopiclivertransplantationinratsLONGGuanghuiXIAOPingXIEY

2、ongetal.DepartmentofHepatobiliarySurgery，PekingUniversityShenzhenHospital，Guangdong，518036[Abstract］ObjectiveToinvestigatethemethodtechniqueofparitalauxiliarythotopiclivertransplantationinrats.Methods30casesofparitalauxi

3、liarythotopiclivertransplantationinSDratswereperfmedusingcuftecniquemicrosurgerymethod.Thesuccessfulrateoperationtimecomplicationswereobserved.ResultsThegeneralsuccessfulratewas90%thesurvivalrateofpostoperation24houronew

4、eekwas76％(1925)56％(1425)respectively.ConclusionMeticulousskilledmicrosurgicaltechniqueisthekeytosuccessfuloperation.[Keywds］livertransplantationrat近年來，輔助性原位肝移植因其手術(shù)創(chuàng)傷相對較小、供體來源比較容易獲取以及術(shù)后不必長期服用免疫抑制劑等優(yōu)點已經(jīng)越來越多地受到臨床醫(yī)生的重視[1]。但是

5、，該該移植方法目前也有其一定的局限。其中又以供肝與移植肝功能競爭導(dǎo)致移植肝萎縮最為明顯[2]。因此，建立動物輔助性原位肝移植模型了解供肝與移植肝功能競爭的機理是解決這一難題的重要研究手段。70年代大鼠原位肝移植模型獲得成功后[34]。原位肝移植的動物模型已經(jīng)逐漸成熟并被實驗研究廣泛采用。但是，輔助性原位肝移植的動物模型尚不多見。本實驗采用套管法，參考一些國內(nèi)、外相關(guān)報道的方法，建立大鼠輔助性原位肝移植模型。1材料與方法1.1實驗動物SD

6、雄性大鼠30只。體重180～400g，作供體；SD雄性大鼠30只，體重180～400g，作受體，購自南方醫(yī)科大學(xué)實驗室動物室。常溫下飼養(yǎng)，喂固體飼料。飲自來水。供體體重小于受體體重約10g左右。1.2手術(shù)過程受體術(shù)前禁食12h，不禁飲水。術(shù)前5～20min。肌注阿托品0.03～0.05mg。采用氯胺酮麻醉，受體術(shù)中輔以持續(xù)低流量吸氧。1.2.1供體手術(shù)供體大鼠仰臥位。固定四肢，備皮及碘伏消毒，取腹部“十”字型切口，進入腹腔，將腸管移出腹

7、腔外。自腸系膜靜脈注入含肝素150U的生理鹽水2mL使大鼠全身肝素化溫鹽水保護，組織鉗鉗夾、牽引腹壁及劍突。充分暴露肝臟。氣栓塞、血管扭曲、血栓形成。遠期死亡原因為腹腔感染、肝膿腫、腸梗阻3討論大鼠輔助性原位肝移植模型是一種難度較大的手術(shù)。需要手術(shù)顯微鏡及熟練的顯微外科操作技巧。術(shù)中供肝的游離與切取、灌注、冷保存，受體肝臟的游離、切除。供肝置人受體后，血管的吻合、術(shù)后的保溫等，各個環(huán)節(jié)都會影響大鼠肝移植術(shù)后的生存率。本實驗的結(jié)果表明，大

8、鼠輔助性原位肝移植的手術(shù)死亡率、術(shù)后生存率與經(jīng)典的大鼠原位肝移植模型相比還存在一定的差距[5，6]。我們認(rèn)為導(dǎo)致這一現(xiàn)象的原因是多方面的。它貫穿了整個手術(shù)過程。3.1供肝的游離、獲取在供肝的游離過程中。應(yīng)注意對供肝的保護。游離血管時，首先，須清楚血管的解剖，以防止剝離血管時出現(xiàn)不可逆的大出血，同時還須注意血管走行的變異。其次，剝離血管要干凈。血管周圍不能有殘留組織。左肝門靜脈須留出適當(dāng)?shù)拈L度，以防血管過度緊張，引起血流不通暢。肝斷面的管

9、道要全部結(jié)扎以防術(shù)后出血和膽漏。同時，在修整供肝時，左肝靜脈由于緊貼肝組織，因此要將部分肝上下腔靜脈保留以利于肝臟血管流出道的吻合。3.2供肝的灌注經(jīng)腹主動脈灌洗。灌洗液由肝動脈及門靜脈流入肝臟，與國外報道的經(jīng)門靜脈灌洗相比，灌洗更充分、完全[7]。灌注過程中，用4℃的生理鹽水淋洗肝臟，使肝臟內(nèi)外均勻降溫。減輕了供肝缺血再灌注損傷推注灌洗液要緩慢均勻灌洗液量以肝臟完全蒼白為準(zhǔn)。灌注時要阻斷胸主動脈。以防止灌注液經(jīng)腹主動脈流回心臟，影響灌

10、注效果。3.3供肝的冷保存、套管供肝在4℃的平衡液中保存，整個供肝應(yīng)完全浸泡在保存液中，液面高于肝臟上緣約lcm。肝上下腔靜脈的縫扎、肝下下腔靜脈及門靜脈的套管均在保存液中進行，完成上述操作后，在顯微鏡下經(jīng)肝下下腔靜脈及門靜脈推注保存液。觀察血管壁是否有破口。3.4受體肝臟的游離、切除受體肝臟上緣左膈下血管的縫扎應(yīng)緊貼膈肌。肝動脈與門靜脈的分離應(yīng)鈍性進行。盡可能長地保留左門靜脈并緊貼肝門予以切斷以便袖套管順利插入。膽總管、肝動脈的主干不

11、能受損以免手術(shù)失敗。肝斷面各種管道要一一結(jié)扎以防術(shù)后膽漏和出血。3.5提高手術(shù)技能縮短手術(shù)時間與原位肝移植相比，輔助性原位肝移植不需切斷下腔靜脈，而且只有部分肝臟切除，它不存在無肝期，受體腸道持續(xù)淤血的情況不嚴(yán)重。因此內(nèi)毒素可通過腸道靜脈系統(tǒng)流入肝臟，加重肝臟損傷影響較小[8]。但是縮短血管吻合時間，注意吻合質(zhì)量是其關(guān)鍵。肝靜脈管壁極其菲薄，吻合過程中極易撕裂。因此，顯微無張力吻合顯得尤為關(guān)鍵。還要有適當(dāng)?shù)尼樉?。且縫線不能收得過緊。以免