雷公藤多甙對(duì)大鼠原位肝移植急性排斥的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)采用大鼠原位肝移植為模型，來(lái)探討雷公藤多甙抗大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)的作用機(jī)制，及聯(lián)合CsA的治療方案的效果，為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第一部分大鼠原位肝移植模型的建立及雷公藤多甙和環(huán)保霉素對(duì)大鼠肝移植存活率的影響。 為建立大鼠原位肝移植模型，參照改良Kamada法建立原位肝移植模型，并加以改進(jìn)。將120只wistar大鼠作為供肝，移植到120只SD大鼠體內(nèi)。將120只肝移植SD大鼠分為四組：即對(duì)照組(A組)，T

2、II組(B組)，CsA組(C組)，TII+CsA組(D組)，術(shù)后進(jìn)行口服藥物灌胃(TIl30mg／kg．d,CsAl5mg／kg．d,TIl30mg／kg．d+CsAl5mg／kg．d)，且分別觀察四組大鼠生存期。結(jié)果提示：A、B、C、D組一周生存率分別為70％、83．3％、80％、86．7％；二周生存率分別為26．7％、72．7％、80％、86．7％。研究結(jié)果表明雷公藤多甙具有免疫抑制作用，能夠延長(zhǎng)肝移植大鼠生存期限，如果聯(lián)合用CsA

3、效果更好。 第二部分雷公藤多甙對(duì)大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)的影晌。 為了探討雷公藤多甙能夠抗大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)把120只肝移植SD大鼠分為四組：對(duì)照組(A組)，TII組(B組)，CsA組(C組)，TII+CsA組(D組)，分別檢測(cè)移植術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氨酶(LDH)含量，并觀察移植術(shù)后一周、二周存活率及肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化。與對(duì)照組相比

4、，三組治療組術(shù)后肝功能及一周、二周存活率明顯改善，排斥反應(yīng)明顯要輕于對(duì)照組。而三組治療組間有顯著差異，即D組輕于C組，C組輕于B組。因此，雷公藤多甙具有免疫抑制作用，如果聯(lián)合CsA效果更好。 第三部分雷公藤多甙對(duì)大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)中的肝細(xì)胞作用。 為了探討雷公藤多甙對(duì)大鼠肝移植具有免疫抑制作用，將120只肝移植SD分四組：對(duì)照組(A組)、TII組(B組)、CsA組(C組)、TII+CsA組(D組)分別檢測(cè)移植術(shù)后

5、ld、3d、5d、7d、14d肝細(xì)胞及凋亡相關(guān)基因BCL-2、FasL的蛋白表達(dá)，并觀察四組移植大鼠肝臟內(nèi)浸潤(rùn)細(xì)胞變化及四組移植大鼠肝臟內(nèi)實(shí)質(zhì)細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞凋亡指數(shù)(AL)之比。研究結(jié)果提示：與對(duì)照組比較，從第五天開(kāi)始三組治療組的凋亡細(xì)胞明顯上升并快于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。四組第5、7、14天均與其第1、3天比較，凋亡細(xì)胞上升有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組治療組移植肝臟內(nèi)實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡指數(shù)少于間質(zhì)細(xì)胞凋亡指數(shù)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組治療組的BCL-2的蛋

6、白表達(dá)低于對(duì)照組，F(xiàn)asL的表達(dá)高于對(duì)照組，而三組間的比較：D組低于C組，C組低于B，上述均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過(guò)本研究，得出結(jié)論：雷公藤多甙通過(guò)對(duì)凋亡相關(guān)基因BCL-2、FasL的影響來(lái)達(dá)到免疫抑制作用，如果聯(lián)合CSA效果會(huì)更好。 第四部分雷公藤多甙對(duì)大鼠原位肝移植的IL一2、lL一2R活性的影響。 為了探討雷公藤多甙對(duì)大鼠原位肝移植免疫抑制作用機(jī)理，本實(shí)驗(yàn)把120只肝移植SD分四組：對(duì)照組(A組)，TII組(B組)，Cs

7、A組(C組)，TII+CsA組(D組)，分別檢測(cè)移植術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d外周血IL-2R的含量和脾臟淋巴細(xì)胞的IL-2活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：三組治療組的IL-2活性和IL-2R含量均明顯低于對(duì)照組，三組治療組間的比較是D組低于B、C組，上述均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論：雷公藤多甙通過(guò)對(duì)IL-2、IL-2R的影響來(lái)達(dá)到免疫抑制作用，如果聯(lián)合CsA效果會(huì)更好。 第五部分雷公藤多甙誘導(dǎo)大鼠原t-*-肝移植免疫耐受的作用。

8、 為了探討雷公藤多甙不但具有免疫抑制作用，而且還有一定的誘導(dǎo)免疫耐受作用。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用肝移植120只SD大鼠，分為四組：對(duì)照組(A組)，TII組(B組)，CsA組(C組)，TII+CsA組(D組)。分別于術(shù)后1d、3d、5d、7d、14d檢測(cè)下腔靜脈血的CD4+、CD25+、CD8+、CD28+的蛋白表達(dá)及脾臟淋巴細(xì)胞IL．10的活性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：三組治療組的IL-10活性明顯高于對(duì)照組，三組治療組也有顯著差異，即D組高于C