轉基因考試部分

1、名詞解釋：名詞解釋：轉基因動物：轉基因動物：英文名稱：transgenicanimal定義1：通過基因轉移技術獲得的整合有外源基因的動物個體。定義2：基因組中整合的外源基因能夠表達的一類動物。概念：遺傳的基本物質是DNA，基因則是位于染色體上有遺傳效應的DNA片段，對于儲存在生物全套染色體中的全部遺傳信息，可稱其為基因組。由于不同種類、不同個體的生物基因組成是不同的，因此對動物個體來說，非自身的基因成分屬于外源基因，如果把外源基因整合或

2、導入動物染色體基因中，那么這個外源基因就被稱為轉基因(transgene)(即轉移來的基因)，這種動物就是轉基因動物(transgenicanimals)。轉基因動物是指將特定的外源基因導全動物受精卵或胚胎，使之穩(wěn)定整合于動物的染色體基因組并能遺傳給后代的一類動物。轉基因動物所有的細胞均整合有外源基因，并具有將外源基因遺傳給子代的能力，若動物只有部分組織細胞整合有外源基因，則稱為嵌合體動物，這類動物只有在整合了外源基因的“部分組織細胞”

3、恰為生殖細胞時，才能將其攜帶的外源基因遺傳給子代。顯微注射法：顯微注射法：1、簡介顯微注射法（microinjection）是利用管尖極細（0.1至0.5μm）的玻璃微量注射針，將外源基因片段直接注射到原核期胚或培養(yǎng)的細胞中，然后藉由宿主基因組序列可能發(fā)生的重組（rearrangement）、缺失（deletion）、復制（duplication）或易位（translocation）等現(xiàn)象而使外源基因嵌入宿主的染色體內。2、技術要求這種

4、顯微注射術的程序，需有相當精密的顯微操作設備，制造長管尖時，需用微量吸管拉長器（micropipettepuller），注射時需有固定管尖位置的微量操作器。這種技術的長處為任何DNA在原則上均可傳入任何種類的細胞內。此法已成功運用于包括小鼠、魚、大鼠、兔子及許多大型家畜，如牛、羊、豬等基因轉殖動物。顯微注射：顯微注射：英文名稱：microinjection定義1：在顯微鏡下操作的微量注射技術?？蓪⒓毎哪骋徊糠?如細胞核、細胞質或細胞器

5、)或外源物質(如外源基因、DNA片段、信使核糖核酸、蛋白質等)通過玻璃毛細管拉成的細針，注射到細胞質或細胞核內。是研究各種生物分子的作用、制作轉基因動物、克隆動物等的重要技術。定義2：用顯微注射儀將外源基因注入細胞或配子的技術。所屬學科：水產(chǎn)學（一級學科）；水產(chǎn)生物育種學（二級學科）定義3：因子后，可增強基因表達。定義3：增強真核基因轉錄的一類調節(jié)序列。增強子概念：指增加同它連鎖的基因轉錄頻率的DNA序列。增強子是通過啟動子來增加轉錄的

6、。有效的增強子可以位于基因的5’端，也可位于基因的3’端，有的還可位于基因的內含子中。增強子的效應很明顯，一般能使基因轉錄頻率增加10～200倍，有的甚至可以高達上千倍。例如，人珠蛋白基因的表達水平在巨細胞病毒(cytomegalovirus，CMV)增強子作用下可提高600～1000倍。增強子的作用同增強子的取向(5’一3’或3’一5’)無關，甚至遠離靶基因達幾千kb也仍有增強作用。增強子的分類：增強子可分為細胞專一性增強子和誘導性增

7、強子兩類：①組織和細胞專一性增強子。許多增強子的增強效應有很高的組織細胞專一性，只有在特定的轉錄因子(蛋白質)參與下，才能發(fā)揮其功能。②誘導性增強子。這種增強子的活性通常要有特定的啟動子參與。例如，金屬硫蛋白基因可以在多種組織細胞中轉錄，又可受類固醇激素、鋅、鎘和生長因子等的誘導而提高轉錄水平。增強子的特點作用：增強子能大大增強啟動子的活性。增強子有別于啟動子處有兩點:[1]增強子對于啟動子的位置不固定，而能有很大的變動[2]它能在兩個

8、方向產(chǎn)生相作用。一個增強子并不限于促進某一特殊啟動子的轉錄，它能刺激在它附近的任一啟動子。首先被發(fā)現(xiàn)的增強子是SV40增強子。兩個增強子位于基因組的兩個串連的72nbp重復中，約在轉錄起始點上游200bp處，每個72bp重復中有一個。缺失實驗顯示兩個重復缺失一個并不產(chǎn)生什么影響，而如兩個均缺失即將大大降低活體內的轉錄。有人發(fā)現(xiàn)，如果將β珠蛋白基因放在含有72bp重復的DNA分子中，它的轉錄作用在活體內將增高約200倍以上，甚至當此72b

9、p順序位于離轉錄起點上游1400bp或下游3000bp時仍有作用。各個基因中的增強子順序差別較大，但有一個基本的核心順序(cesequence)：AAAGGTGTGGGTTTGG增強子具有組織特異性：例如免疫球蛋白基因的增強子只有在B淋巴胞內，活性才最高。除此以外，在胰島素基因和胰凝乳蛋白酶基因的增強子中都發(fā)現(xiàn)了有很強的組織特異性。此外，所有的增強子中均有一段由交替的嘧啶嘌呤殘基組成的DNA，這種DNA極易形成ZDNA型；故有人認為在形

10、成一小段ZDNA后，增強子才有功能。在酵母中有類似增強子的順序，稱為上游激活順序(UAS)。UAS能向兩個方向起作用。并位于啟動子上游的任何距離處，但在啟動子下游則無作用(有別于一般的增強子)。小鼠乳腺腫瘤病毒(MMTV)DNA的轉錄可受糖類固醇激素的刺激。這個能受激素影響的順序位于轉錄起點上游約100bp處。此順序能和激素及其蛋白受體組成的復合物相結合。當將此順序放在某基因的啟動子的任一方面(即上游或下游)和各種不同的距離時，它仍能刺

11、激該基因的轉錄。所以增強子激活作用可能是糖類固醇能調控一組靶基因的機制:糖類固醇激素進入細胞后即與其受體結合。結合作用激活受體，使其能識別存在于增強子中的共同順序，進而激活了在增強子附近能對糖類固醇起反應的基因。即當糖類固醇受體復合物和增強子結合時，其附近的啟動子即起始轉錄。動物克?。簞游锟寺。憾x：動物克隆是一種通過核移植過程進行無性繁殖的技術。發(fā)育早期的動物胚胎細胞，或成年動物的體細胞，經(jīng)顯微手術移植到去掉細胞核的卵母細胞中之后，在