轉(zhuǎn)基因食品溯源管理與歐盟轉(zhuǎn)基因大米檢測方法評價.pdf

1、轉(zhuǎn)基因作物是一類通過基因工程將外源目的基因片段轉(zhuǎn)入到原有作物的基因組中，從而得到帶有特殊性狀的作物。1983年全球第一例轉(zhuǎn)基因煙草在美國問世，1996年美國最早開始商業(yè)化生產(chǎn)和銷售的轉(zhuǎn)基因作物。自美國進行轉(zhuǎn)基因作物的研究開始以來，美國食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）審批的轉(zhuǎn)基因作物品種已有40余種。目前，中國沒有批準轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化種植。
　　2005年以來，中國出口歐盟大米中

2、屢屢被檢測出轉(zhuǎn)基因成分。歐盟委員會于2008年發(fā)布2008/289/EC（3）號決議批準針對米制品中的非法轉(zhuǎn)基因成分轉(zhuǎn)cry1A(b/c)基因抗蟲雜交稻組合Bt汕優(yōu)63（Bt63）采取緊急措施。根據(jù)決定要求，產(chǎn)品進入市場前，經(jīng)營者應(yīng)向相關(guān)機構(gòu)提交一份官方檢測報告，證明米制品中無Bt63轉(zhuǎn)基因成分污染的檢測報告。此外，該決議還規(guī)定成員國對于進口及已投放歐盟市場的米制品需隨機抽樣并按照2008/289/EC（3）號決議指定的方法檢測分析，以

3、確保不含有轉(zhuǎn)基因成分。歐盟委員會于2011年又通過了2011/884/EU決議，此決議擴大了2008/289/EC決議所規(guī)定措施的范圍，從只針對Bt63轉(zhuǎn)基因水稻成分，擴大到任何轉(zhuǎn)基因成分，致使中國出口歐盟大米多次發(fā)生被拒收、退貨、撤銷合同等事件，造成了很大的經(jīng)濟損失。
　　為了更好的對轉(zhuǎn)基因進行管理，在建立優(yōu)化的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測方法的基礎(chǔ)上對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品溯源是實現(xiàn)轉(zhuǎn)基因嚴格管理的重要途徑之一。
　　EAN?UCC系統(tǒng)是對產(chǎn)品

4、進行溯源的一個重要手段。EAN?UCC全球統(tǒng)一標識系統(tǒng)是國際物品編碼協(xié)會（Globe Standard1，GS1）統(tǒng)一制定。目前，中國標準按照EAN·UCC系統(tǒng)的規(guī)則進行編碼。UCC/EAN-128條碼是由國際物品編碼協(xié)會共同制定的一種特定的條碼符號，具有應(yīng)用成熟和全球開放的優(yōu)越性。
　　本研究對轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品從產(chǎn)地、產(chǎn)品、采收、加工、包裝、倉儲、運輸、銷售8個環(huán)節(jié)進行信息收集，并根據(jù)國家標準中規(guī)定相應(yīng)編碼規(guī)則對這8個環(huán)節(jié)進行UC

5、C/EAN-128碼的設(shè)計與編碼，建立轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品UCC/EAN-128碼的框架及規(guī)則，在國內(nèi)首次對轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進行了UCC/EAN-128編碼研究。通過掃描條形碼，獲取相關(guān)數(shù)據(jù)，并將獲得數(shù)據(jù)與計算機建立的數(shù)據(jù)庫相結(jié)合，進行信息讀取，可以了解轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品的生產(chǎn)、加工、包裝等信息,從而對轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品進行有效的溯源。
　　本課題以轉(zhuǎn)基因棉花、棉籽粕、棉籽油為材料，根據(jù)UCC/EAN–128碼的編碼規(guī)則及框架，對轉(zhuǎn)基因籽棉種植、產(chǎn)

6、品、加工、運輸、倉儲、銷售6個主要環(huán)節(jié)進行信息收集與UCC/EAN–128碼的編碼。根據(jù)《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標識管理辦法》的規(guī)定,在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品標簽上進行標識，確定了設(shè)計編碼的可操作性。
　　本研究以出口年糕和白粿干為材料，根據(jù)UCC/EAN-128碼的編碼規(guī)則，對非轉(zhuǎn)基因大米種植、產(chǎn)品、加工、運輸、倉儲、銷售6個主要環(huán)節(jié)進行信息收集，并在產(chǎn)品編碼中加入非轉(zhuǎn)基因編碼進行標識，從而對非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品進行溯源，從其產(chǎn)品編碼可迅速識別

7、轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品或非轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品。一旦產(chǎn)品被檢測出轉(zhuǎn)基因成分，可以通過解讀UCC/EAN-128條碼得到的信息，追溯出水稻種子來源、播種日期、收割、大米碾磨、年糕和白粿干加工、包裝和倉儲等日期和批次，查出問題出現(xiàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，并且通過對各個環(huán)節(jié)的留存樣品進行轉(zhuǎn)基因檢測予以證實，為米制品的可追溯性提供技術(shù)保障。UCC/EAN－128條碼可以通過在米制品包裝上加貼條形碼標簽來施行，成本低廉，易于推廣。
　　本研究采集了6個國家和地區(qū)的76個

8、大米及大米制品樣品，使用實時熒光PCR儀對歐盟決議2011/884/EU提出的兩種轉(zhuǎn)基因大米檢測方法—熒光染料法（SYBR Green實時熒光PCR法）和雙重探針法（TaqMan實時熒光PCR法）及歐盟決議2008/289/EU的轉(zhuǎn)基因大米檢測方法—探針法（TaqMan實時熒光PCR法）進行了比較研究。取樣、DNA提取及PCR反應(yīng)等實驗步驟嚴格按照歐盟檢測方法進行，對每一大米樣品進行以上三種方法的檢測，并對檢測結(jié)果進行了比較分析，從而對

9、對三種檢測方法進行了評價。結(jié)果表明，76份大米及米制品中，采用2011/884/EU SYBR Green方法檢測出有23.68％（18/76）樣品為陽性。同時采用2011/884/EU TaqMan雙重實時熒光PCR方法和2008/289/EC TaqMan實時熒光PCR法檢測，只有5.26%（4/76）的樣品為陽性。采用2011/884/EU決議指定的SYBR Green實時熒光PCR法檢測的陽性率高于該決議指定的另一種方法雙重Ta

10、qMan實時熒光PCR和2008/289/EC指定的方法TaqMan實時熒光PCR。本研究還分別采用不同試劑（Fast SYBR Green試劑和Power SYBR Green試劑）、不同儀器（實時熒光PCR儀ABI Viia7和實時熒光PCR儀ABI7300）對同一樣品進行了檢測研究，并分別對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　本課題根據(jù)UCC/EAN-128碼的規(guī)則建立了對轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品與非轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進行溯源的方法，為我國實施轉(zhuǎn)基