食品中脂肪含量測(cè)定-酸水解法

1、實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一食品中脂肪含量測(cè)定食品中脂肪含量測(cè)定酸水解法酸水解法通過實(shí)驗(yàn)掌握食品中脂肪含量測(cè)定原理及操作步驟，充分認(rèn)識(shí)脂肪含量測(cè)定的重要性，增強(qiáng)學(xué)生對(duì)酸水解法提取脂肪的理解。1.原理原理將試樣與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解，使鍵合或包藏在組織里的脂類游離出來，提取脂肪，回收溶劑，干燥后稱重，即得游離態(tài)及結(jié)合態(tài)脂肪總量。2.試劑試劑（1）鹽酸（2）乙醚（3）乙醇：95%（4）石油醚：沸程30℃～60℃3.主要儀器主要儀器100mL具塞量筒、烘

2、箱4.操作步驟操作步驟（1）樣品處理固體樣品：精密稱取約2.0g，置于50mL具塞量筒中，加8mL水，混勻后加10mL濃鹽酸。液體樣品：準(zhǔn)確稱取10.0g置于50mL具塞量筒中，加10mL，濃鹽酸。（2）將量筒放入70℃～80℃水浴中，每隔5～10min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪游離消化完全為止，時(shí)間約需40~50min。（3）取出試管，加入10mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移人100mL具塞量筒中，用25mL乙醚分次洗試管，洗液一并

3、倒人量筒中。加塞振搖1min，小心開塞放出氣體，再塞好，靜置12min，小心開塞，用石油醚一乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10～20min，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的錐形瓶內(nèi)，再加5mL乙醚等量混合液于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放人原燒瓶內(nèi)。放入將錐形瓶置于水浴鍋中蒸發(fā)至干，取出擦去外壁水珠，置于100℃5℃烘箱中干燥2h，取出，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱重，重復(fù)以上操作至恒重。實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二原花

4、青素提取及含量測(cè)定原花青素提取及含量測(cè)定通過實(shí)驗(yàn)掌握原花青素提取及含量測(cè)定的原理和操作方法，加強(qiáng)對(duì)香草醛鹽酸比色的認(rèn)識(shí)和理解。1.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理：原花青素和兒茶素類單體A環(huán)的化學(xué)活性較高，在酸性條件下，其上的間苯二酚或間苯三酚與香草醛發(fā)生縮和，產(chǎn)物在濃酸作用下形成紅色的正碳離子，樣品的濃度與產(chǎn)生的顏色呈正相關(guān)，用兒茶素為對(duì)照品，在500nm下測(cè)定吸光度。2.實(shí)驗(yàn)試劑及儀器實(shí)驗(yàn)試劑及儀器香草醛、鹽酸、甲醇；可見分光光度計(jì)。3.操作步驟操

5、作步驟取2g樣品于50mL離心管中，加入10mL1%（ww）的HCI甲醇溶液，室溫下避光搖床密封提取20min，4000g離心10min，取上清1mL進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定前先配制香草醛鹽酸溶液：在試管中通過混合等體積的1%（ww）vanillin甲醇溶液和8%（ww）HCI甲醇溶液至5mL（1min間隔混合1mL等量溶液）。香草醛試劑每天新鮮制備，加入1mL上清，充分振搖后于30℃水浴保溫反應(yīng)20min，500nm測(cè)定吸光度。3.結(jié)果計(jì)算結(jié)果