不同發(fā)育時(shí)間蓖麻種子中脂肪酸含量測(cè)定和MSAP與cDNA-AFLP分析.pdf

1、蓖麻(Ricinus conununis L.)為雙子葉植物，世界十大油料作物之一。蓖麻油主要由蓖麻油酸等成分組成。2129是通遼地區(qū)蓖麻育種重要父本材料。甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性(MSAP)技術(shù)、cDNA-AFLP技術(shù)成功用于研究基因表達(dá)遺傳機(jī)理、功能標(biāo)記分析等。
　　本研究以2129品系為研究對(duì)象，測(cè)定不同發(fā)育時(shí)間百粒蓖麻鮮種子中各種脂肪酸絕對(duì)含量;采用MSAP和cDNA-AFLP技術(shù)，研究不同發(fā)育時(shí)間蓖麻種子中脂肪酸含量差異基因

2、的表達(dá)，篩選差異條帶，對(duì)其進(jìn)行測(cè)序、功能注釋，以期為蓖麻高油品質(zhì)育種研究奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)主要研究結(jié)果如下:
　　1.完成2129的6個(gè)不同發(fā)育時(shí)間蓖麻種子中粗脂肪和粗脂肪中各種脂肪酸（即蓖麻油酸、亞油酸、棕櫚酸、硬脂酸、花生酸、亞麻酸、花生一烯酸）絕對(duì)含量的測(cè)定;
　　2.MSAP技術(shù)體系分析2129不同發(fā)育時(shí)間種子中差異基因的甲基化水平。選用32對(duì)引物組合，對(duì)6個(gè)不同發(fā)育時(shí)間蓖麻種子進(jìn)行差異基因擴(kuò)增，共獲得647條明顯差異

3、表達(dá)的條帶，經(jīng)NCBI同源性檢索，37條差異基因與已知序列同源性較高。同源基因所表達(dá)的蛋白包括8大類，其中FAD氧化還原酶(B02)、ATP結(jié)合與轉(zhuǎn)運(yùn)酶(195)、α-半乳糖苷酶/α-正乙酰氨基轉(zhuǎn)移酶(D16)、過(guò)氧化物酶(F13)與脂肪酸的合成、運(yùn)輸有直接或間接的關(guān)系。
　　3.cDNA-AFLP技術(shù)體系對(duì)2129不同發(fā)育時(shí)間種子差異基因進(jìn)行分離分析。62對(duì)特異引物組合用于差異基因擴(kuò)增，得到534條差異基因，26條序列經(jīng)NCBI