紫錐菊中菊苣酸的提取工藝和含量測(cè)定

1、紫錐菊提取菊苣酸的工藝與含量測(cè)定研究紫錐菊中菊苣酸的提取一般采用水、甲醇、乙醇和超臨界萃取，但是由于：水提取溫度高，容易造成菊苣酸的氧化；甲醇提取容易造成有機(jī)溶劑殘留，降低產(chǎn)品的質(zhì)量并帶來(lái)不安全因素，因此不適合工業(yè)化；超臨界萃取由于成本較高，收率低，尚未完成工業(yè)化研究。因此本試驗(yàn)采用乙醇作為工業(yè)化提取溶劑，并且對(duì)所提菊苣酸含量進(jìn)行測(cè)定實(shí)驗(yàn)研究，旨在為紫錐菊提取菊苣酸的深入研究和市場(chǎng)開發(fā)提供依據(jù)：一、紫錐菊提取菊苣酸工藝與含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)儀器

2、與材料準(zhǔn)備一、紫錐菊提取菊苣酸工藝與含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)儀器與材料準(zhǔn)備Agilent1100高效液相色譜儀；G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器；G1315BDAD二極管陣列檢測(cè)器；UV2450紫外可見分光光度計(jì)；AG285分析天平；MilliQ超純水儀；DZ2BC型真空干燥箱紫錐菊藥材地上部分→自然干燥→粉碎；菊苣酸對(duì)照品，供含量測(cè)定用；色譜測(cè)定用水為超純水；乙腈為色譜純；其他試劑均為分析純。二、紫錐菊提取菊苣酸的提取方法與結(jié)果二、紫錐菊提取菊苣酸的提取方

3、法與結(jié)果（一）紫錐菊中菊苣酸的提取（一）紫錐菊中菊苣酸的提取1.紫錐菊提取溶劑的選擇分別稱取10g紫錐菊藥材地上部分8份，以10倍質(zhì)量的0.20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%乙醇水溶液加熱回流提取2h→所得濾液濃縮后蒸干→采用HPLC測(cè)定菊苣酸的含量→計(jì)算其得率。結(jié)果見圖1:由上圖可見，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，菊苣酸的逐漸升高（得率=出膏率x干膏中菊苣酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)），當(dāng)乙醇溶液的體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí)，得率最高。隨后，菊

4、苣酸的得率隨乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加而降低。因此選擇60%乙醇作為提取溶劑。2.正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇溶劑體積(A)、提取時(shí)間(B)、提取次數(shù)(C)作為3因素，進(jìn)行L9（34）的正交試驗(yàn)。（二）紫錐菊提取菊苣酸結(jié)果與分析（二）紫錐菊提取菊苣酸結(jié)果與分析從表2和表3可以看出，3因素的影響大小依次為ACB，溶劑體積對(duì)出膏率和菊苣酸的得率影響最大。最佳組合條件為A3B2C3，從降低成本、節(jié)約能耗考慮，在保證充分提取的前提下，

5、綜合分析各個(gè)因素對(duì)出膏率和菊苣酸的轉(zhuǎn)移率的影響，確定提取工藝為12倍量60%乙醇回流加熱提取3次，每次1.5h，合并濾液，濃縮后水浴蒸干，于70℃干燥12h，置干燥器中冷卻30min，得干膏。（三）紫錐菊提取菊苣酸所選條件的驗(yàn)證試驗(yàn)（三）紫錐菊提取菊苣酸所選條件的驗(yàn)證試驗(yàn)為驗(yàn)證所選條件的合理性，取紫錐菊藥材地上部分共3批，各100g，按確定的提取工藝進(jìn)行放大試驗(yàn)，測(cè)得出膏率均值為21.20%（RSD0.94%），菊苣酸的得率均值為1.0

6、25%（RSD1.08%），說(shuō)明該工藝條件穩(wěn)定、可行。（四）紫錐菊提取菊苣酸含量的（四）紫錐菊提取菊苣酸含量的HPLC測(cè)定測(cè)定1.色譜條件色譜條件色譜柱Z0rbaxSBC18(4.6mmx150mm，5μm)；流動(dòng)相乙腈1.0%；冰醋酸溶液（25：75）；流速1.0mLmin1；柱溫35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)328nm；進(jìn)樣量10μL。2.對(duì)照品溶液的制備對(duì)照品溶液的制備精密稱取在60℃減壓干燥4h的菊苣酸對(duì)照品適量，加60%乙醇制成每mL含0.

7、050mg的溶液，即得。3.供試品溶液的制備供試品溶液的制備取紫錐菊藥材地上部分10g→按確定的提取工藝制備干燥浸膏→取0.050g，置具塞錐形瓶中→精密加入60%乙醇50mL→密塞→精密稱定質(zhì)量→超聲(功率250W，頻率35kHz)提取10min→冷卻至室溫→稱量并以60%乙醇補(bǔ)足重量→以0.45μm微孔濾膜過(guò)濾→取續(xù)濾液備用。4.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取菊苣酸對(duì)照品適量→加60%乙醇制成11μg.mL1菊苣酸對(duì)照品溶液→