藥物分析湖南大學(xué)胺類藥物的分析

1、第一節(jié) 芳胺類藥物的分析,芳胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)類型：芳伯氨基未被取代，在芳環(huán)對位有取代的對氨基苯甲酸酯類；芳伯氨基被酰化，在芳環(huán)對位有取代的酰胺類。,主要性質(zhì)芳伯氨基特性：本類藥物得結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基（除鹽酸丁卡因外），顯重氮化-偶合反應(yīng)；與芳醛縮合成Schiff堿反應(yīng)；易氧化變色。水解特性：分子結(jié)構(gòu)中的含有酯鍵（或酰胺鍵），易水解。弱堿性：分子結(jié)構(gòu)中具有叔胺氮原子（除苯佐卡因外），具弱堿性；能與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)，只能

2、在非水溶劑體系中滴定。其他特性：多為堿性油狀液體或低熔點固體，難溶于水，可溶于有機溶劑；其鹽酸鹽易溶于水和乙醇，難溶于有機溶劑。,主要性質(zhì)水解后顯芳伯氨基特性：本類藥物的結(jié)構(gòu)中具有芳酰胺基，在酸性溶液中易水解為芳伯氨基化合物。水解產(chǎn)物易酯化：對乙酰氨基酚和醋氨苯砜，水解后產(chǎn)生醋酸，在硫酸介質(zhì)中與乙醇反應(yīng)，發(fā)出醋酸乙酯的香味。酚羥基特性：對乙酰氨基酚具有酚羥基，與FeCl3發(fā)生呈色反應(yīng)。,主要性質(zhì)（續(xù)）弱堿性：利多卡因、布比卡因

3、、羅哌卡因含有叔胺氮原子，妥卡尼結(jié)構(gòu)中有伯胺氮原子，顯堿性，可以成鹽。與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：鹽酸利多卡因、鹽酸布比卡因、鹽酸羅哌卡因、鹽酸妥卡尼分子結(jié)構(gòu)中的酰胺基上的氮可在水溶液中與銅離子或鈷離子配位，生成有色的配位化合物沉淀，沉淀可溶于三氯甲烷等有機溶劑后呈色。,,硫氰酸鹽衍生物,鹽酸丁卡因 ChP（2005）【鑒別】取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過，結(jié)晶用水洗

4、滌，在80℃干燥，依法測定，熔點約為131℃。,紫外分光光度法本類藥物結(jié)構(gòu)中含有苯環(huán)，具有紫外吸收光譜特征，可用于鑒別。,鹽酸布比卡因 ChP（2005）【鑒別】取本品，精密稱定，按干燥品計算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法測定，在263nm與271nm的波長處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48。,乙醇溶液的澄清度與顏色檢查殘留還原劑鐵粉致使乙醇溶液產(chǎn)生

5、渾濁，中間體對氨基酚的有色氧化產(chǎn)物在乙醇中顯橙紅色或棕色。有關(guān)物質(zhì)包括中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物，如：對氨基酚、對氯苯乙酰胺、偶氮苯等?！吨袊幍洹罚?005）采用薄層色譜法，以對氯苯乙酰胺為對照品，進行限量檢查。,對氨基酚使本品產(chǎn)生色澤并對人體有毒性，應(yīng)嚴格控制其限量。,鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查 雜質(zhì)來源,使注射液變黃，療效下降，毒性增加,鹽酸氯普魯卡因注射液中有關(guān)物質(zhì)和光解產(chǎn)物的檢查 雜質(zhì)來源,鹽酸羅哌

6、卡因的對映體純度檢查 具有一手性碳原子，存在二個對映異構(gòu)體；R-鹽酸羅哌卡因的心臟毒性較大，需嚴格控制其含量；用毛細管電泳法進行鹽酸羅哌卡因?qū)τ丑w的純度檢查，R-鹽酸羅哌卡因的限量不得超過0.5%。,電泳手性添加劑：環(huán)糊精,,測定條件：加入適量KBr加快反應(yīng)速度重氮化速度：氫溴酸>鹽酸>硝酸、硫酸氫溴酸昂貴，以溴化鉀+鹽酸代替,NaNO2 + HCl,HNO2 + NaCl,,HNO2 + HCl,NOC

7、l + H2O,,,NO+的濃度大，反應(yīng)速度快,,KBr + HCl,HBr + KCl,,HNO2 + HBr,NOBr + H2O,,K1,,K1≈300K2,加入KBr，可增大被測溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度,加入過量鹽酸加速反應(yīng)重氮化反應(yīng)速度加快；重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；防止生成偶氮氨基化合物影響測定結(jié)果.,鹽酸的量芳胺類藥物:鹽酸=1:2.5～6；酸度過大，妨礙芳伯氨基的游離，還可使亞硝酸鹽將分解。,

8、反應(yīng)溫度重氮化反應(yīng)速度與溫度成正比；重氮鹽隨溫度升高而加速分解；溫度升高10℃，重氮化反應(yīng)速度加快2.5倍，重氮鹽分解速度亦加速2倍,一般在室溫（10～30℃）下進行，15℃以下結(jié)果較準確。,滴定速度（先快后慢）重氮化反應(yīng)速度較慢，滴定速度不宜太快；為避免HNO2的揮發(fā)和分解，滴定管尖端插入液面下2/3處，將NaNO2滴定液一次大部分放下，使其盡快反應(yīng)；在近終點時，未反應(yīng)的藥物的濃度極稀，須在加入最后一滴后，攪拌1～5min

9、，再確定是否達到終點。,指示終點的方法永停滴定法調(diào)節(jié)R1使電極上電壓約為50mV；終點前，溶液中無亞硝酸，線路無電流，電流記指針指零；終點時，溶液中有微量亞硝酸存在，電極起氧化還原反應(yīng)，線路中有電流通過，電流記指針突然偏轉(zhuǎn)，不再回復(fù)，即為終點。,適用范圍：具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定;具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，可用本法測定;芳香族硝基化合物經(jīng)還原，也可用本法測定。,非水溶液滴定

10、法 原理：本類藥物的鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸妥卡尼和鹽酸布比卡因的分子結(jié)構(gòu)含有弱堿性氮原子，可用非水溶液滴定法測定含量。方法:溶劑：冰醋酸；滴定液：高氯酸（0.1mol/L）指示劑：結(jié)晶紫（鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸妥卡尼），萘酚苯甲醇（鹽酸布比卡因）,+ HClO4,,注意事項（續(xù)）:滴定鹽酸丁卡因時，需加入適量醋酸酐，解離生成的醋酸酐合乙酰氧離子可增強丁卡因的堿性，使滴定突躍敏銳。終點顏色：鹽酸丁卡因

11、（藍色）、鹽酸利多卡因（綠色）、鹽酸妥卡尼（藍綠色），鹽酸布比卡因（綠色）。,紫外分光光度法對乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測定。,高效液相色譜法具有較強的分離能力，又有較高的靈敏度，適用于本類藥物及其制劑的含量測定。,鹽酸普魯卡因胺常用的鑒別反應(yīng)有（）A. 重氮化-偶合反應(yīng)B. 羥肟酸鐵鹽反應(yīng)C. 氧化反應(yīng)D. 磺化反應(yīng)E. 碘化反應(yīng),

12、自測題,采用亞硝酸鈉法測定含量的藥物有（）A. 苯巴比妥B. 鹽酸丁卡因C．苯佐卡因D. 醋氨苯砜E. 鹽酸去氧腎上腺素,下列藥物中不能用亞硝酸鈉滴定法測定含量者（）A. 乙酰水楊酸B. 對氨基水楊酸鈉C. 對乙酰氨基酚D. 普魯卡因E. 苯佐卡因,,亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是（）A. 添加Br-B. 生成NO+·Br- C．生成HBrD. 生成Br2 E. 抑制反應(yīng)進行,,中國藥典（20

13、05年）所收載的芳胺類藥物亞硝酸鈉滴定法中指示終點的方法為（）A. 電位法 B. 永停法C. 外指示劑法 D. 內(nèi)指示劑法E. 自身指示劑法,,鹽酸普魯卡因采用亞硝酸鈉滴定法測定含量時的反應(yīng)條件是（ ）A. 強酸B. 加入適量溴化鉀C. 室溫（10～30℃）下滴定D. 滴定管尖端深入液面，加入大部分滴定液E. 永停法指示終點,典型藥物,鹽酸克侖特羅,硫酸沙丁胺醇,主要性質(zhì)

14、具有脂烴胺基側(cè)鏈，其中氮為仲胺氮，顯弱堿性；游離堿難溶于水，易溶于有機溶劑，其鹽可溶于水；本類藥物某些分子具有酚羥基結(jié)構(gòu)，易氧化變色，可與重金屬離子配位呈色；多數(shù)藥物具手性碳原子，具旋光性,鑒別試驗與FeCl3反應(yīng)本類藥物分子結(jié)構(gòu)中具有酚羥基，可與Fe3+離子配位顯色，加入堿性溶液，顯紫色或紫紅色。與甲醛-硫酸反應(yīng)某些本類藥物與甲醛在硫酸中形成具有醌式結(jié)構(gòu)的有色化合物。如：腎上腺素、鹽酸異丙腎上腺素、重酒石酸去甲腎

15、上腺素、鹽酸去氧腎上腺素,特殊雜質(zhì)檢查酮體檢查雜質(zhì)來源：原料殘存（腎上腺素、鹽酸異丙 腎上腺素、重酒石酸去甲腎上腺 素、鹽酸去氧腎上腺素等均由其 酮體氫化還原制的）；檢查方法：分光光度法（比較法）檢查原理：酮體在310nm波長處有最大吸收藥 物本身在此波長幾乎沒有吸收 規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長的 吸收度限制酮體的量。,,紫外分光光度法檢查酮體的條件和要求,有關(guān)物質(zhì)檢查《中國藥典》（2

16、005）要求對鹽酸去腎上腺素、鹽酸苯乙雙胍、硫酸沙丁胺醇和鹽酸氨溴索進行有關(guān)物質(zhì)檢查。鹽酸氨溴索：HPLC法（高低濃度對比法，配 制兩種濃度對照溶液）鹽酸苯乙雙胍：紙色譜法（紙色譜法分離 后洗脫，控制232nm處吸 收度，控制有關(guān)雙胍的量）其他藥物：薄層色譜法（高低濃度對比法， 配制兩種濃度對照溶液）,,含量測定非水溶液滴定法原理：脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性適用范圍：本類藥物原料藥測

17、試條件：溶劑：冰醋酸滴定液：高氯酸指示終點：結(jié)晶紫、萘酚苯甲醇、電位法,(鹽酸去氧腎上腺素),提取酸堿滴定法 原理：游離堿不溶于水，易溶于有機溶劑；鹽 類可溶解于水，不溶于有機溶劑。 方法：以硫酸苯丙胺為例,紫外法分光光度法與比色法 原理：本類藥物分子中具有苯乙胺結(jié)構(gòu)，可采用紫外分光光度法測定含量；利用本類藥物分子結(jié)構(gòu)中的芳伯氨基的重氮化-偶合反應(yīng)，或酚羥基與亞鐵離子配位顯色，可采用比色法測定含量。,能和重酒石酸去甲

18、腎上腺素發(fā)生顏色反應(yīng)的試液為（）A. 濃硫酸B. 甲醛試液C. 氨試液D. 甲醛-硫酸試液E. 茚三酮試液,自測題,,鹽酸異丙腎上腺素的檢查項目是（）A. 有關(guān)物質(zhì)B. 二苯酮C. 鹽酸D. 醛E. 酮體,,,(雷米普利),,(西拉普利),,(賴諾普利),(鹽酸喹那普利),主要性質(zhì)酸堿性：分子結(jié)構(gòu)中含有羧基，顯中等酸性，可用水溶液體系或醇-水混合溶液體系酸堿滴定法測定含量；分子結(jié)構(gòu)中具有烴氨基（仲胺氮）側(cè)鏈，顯

19、弱堿性，可用非水滴定法測定。脯氨酸衍生物：本類藥物多數(shù)是脯氨酸衍生物，具有氨基酸的某些特性。,脯氨酸結(jié)構(gòu)式,旋光法本類藥物均為單一旋光物質(zhì)，可測其比旋度來進行鑒別。馬來酸依那普利甲醇溶液(10mg/ml):-41.0º～-43.5º依那普利拉甲醇溶液(10mg/ml):-53.0º～-56.0º光譜法與色譜法鑒別馬來酸依那普利：紅外吸收、HPLC依那普利拉：紅外吸收、HP