糖類(lèi)藥物

1、3、粘多糖 由于粘多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，需用酶解法或堿解法使糖-蛋白間的結(jié)合鍵斷裂，促使多糖釋放。一般組織中有多種粘多糖，還需要進(jìn)一步分離不同粘多糖，方法有乙醇分級(jí)沉淀法或?qū)游龇?。?）堿解法 用0.5M NaOH在40℃溶解組織并提取，提取液以鹽酸中和，透析后用高嶺土等吸附劑除去蛋白，再用乙醇沉淀多糖。此法一般不破壞多糖分子中的硫酸基。（2）酶解法 比較常用。而且常與堿解法聯(lián)用。,（二

2、）多糖的純化,（1）乙醇沉淀法 此法是制備粘多糖最常用的方法。供乙醇沉淀的多糖溶液濃度以1%-2%為佳。同時(shí)向溶液中加入一定濃度（如5%）可有助于多糖的析出。（2）分級(jí)沉淀法 不同多糖在不同濃度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不同，因此可用不同濃度的有機(jī)溶劑分級(jí)沉淀分子大小不同的粘多糖。（3）季銨鹽絡(luò)合法（p388） 利用粘多糖與一些表面活性劑絡(luò)合成難溶季銨鹽。（4）離子交換層析法

3、 主要利用陰離子交換劑。,第二節(jié) 糖類(lèi)藥物,糖類(lèi)藥物主要有：?jiǎn)翁?如葡萄糖、果糖、氨基葡萄糖和維生素C等；低聚糖 如蔗糖、麥芽糖乳糖、乳果糖，多糖如右旋糖苷、香菇多糖、茯苓多糖等；糖的衍生物 如6-磷酸葡萄糖磷酸肌醇等。 糖類(lèi)藥物研究的最多的是多糖類(lèi)藥物，一般都是天然動(dòng)植物組織內(nèi)直接提取，如黃芪多糖、人參多糖、麥麩多糖、銀耳多糖、靈芝多糖、云芝多糖、酵母多糖、硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸、幾丁質(zhì)、胎盤(pán)脂多糖等。,多糖類(lèi)具有

4、多種生理活性：,（1）調(diào)節(jié)免疫功能 影響補(bǔ)體活性，促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖等（2）抗感染作用 提高身體免疫力（3）促進(jìn)細(xì)胞DNA、蛋白質(zhì)的合成，促進(jìn)細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)（4）抗輻射損傷作用 抗氧化、防輻射作用（5）抗凝血作用 如肝素是天然的抗凝劑（6）降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用 如類(lèi)肝素硫酸軟骨素等粘多糖：是指含有氨基己糖與糖醛酸的多糖，也叫酸性粘多糖。 粘多糖基本上是由特殊的重復(fù)雙糖單

5、位構(gòu)成，在此雙糖中，包含一個(gè)N-乙酰氨基己糖。 兩種糖醛酸：D-葡萄糖醛酸和L-艾杜糖醛酸；兩種氨基己糖：氨基-D-葡萄糖和氨基-D-半乳糖。,第三節(jié) 重要糖類(lèi)藥物生產(chǎn)工藝,一、D-甘露醇,（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 又名己六醇，為白色針狀晶體，略有甜味，不潮解；易溶于水。（二）生產(chǎn)工藝1、提取法（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程①浸泡提取、堿化、中和 自來(lái)水室溫浸泡2-3h，浸泡液用30%NaOH調(diào)pH10

6、-11，靜置8h，凝集沉淀多糖類(lèi)粘性物；虹吸上清液，用1∶1 H2SO4中和至pH6-7，進(jìn)一步除去膠狀物，得中性提取液。②濃縮、沉淀 濃縮中性提取液，除去NaCl和膠狀物，直到濃縮液含甘露糖30%以上，冷至60-70℃加入2倍體積95%乙醇，攪拌均勻，冷至室溫離心收集灰白色松散沉淀物。③精制 沉淀物懸于8倍體積95%乙醇中，攪拌回流半小時(shí)，冷卻過(guò)夜，離心得粗品甘露醇，含量70%-80%。重復(fù)一次，經(jīng)乙

7、醇重結(jié)晶后，含量＞90%，氯化物含量＜0.5%。重溶于蒸餾水中，加入1/8-1/10活性炭，80℃保溫0.5h，濾清。清液冷卻至室溫得結(jié)晶，抽濾，洗滌得精品甘露醇。④干燥、包裝 結(jié)晶甘露醇于105-110℃烘干，冷卻、包裝。,2、發(fā)酵法（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程①菌種選育②種子培養(yǎng)③發(fā)酵④除雜質(zhì)、分離結(jié)晶⑤濃縮、結(jié)晶、烘干、包裝,3、制劑（三）檢驗(yàn)方法1、pH值：注射用pH值應(yīng)為4.5-6.5；2、含量

8、測(cè)定：碘量法測(cè)定甘露醇含量。（四）作用與用途 治療腦水腫引起的休克、防止腎臟衰竭、治療青光眼、中毒性肺炎等。,二、1，6 -- 二磷酸果糖,（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 鈉鹽為白色晶型粉末，易溶于水，4℃較穩(wěn)定。（二）生產(chǎn)工藝1、酶轉(zhuǎn)化工藝（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程①取經(jīng)多代發(fā)酵應(yīng)用過(guò)的酵母渣，懸于適量蒸餾水，反復(fù)凍融3次，加入底物（8%蔗糖，4%NaH2PO4，30mM MgCl2，pH6.5）于30℃反應(yīng)6h。②除雜蛋白：

9、煮沸5min，離心去除雜蛋白，收集清液。③陰離子交換柱層析：轉(zhuǎn)化液通過(guò)DEAE-C交換柱，先用蒸餾水洗滌至pH7.0，然后進(jìn)行分步洗脫。④轉(zhuǎn)酸：FDPCa懸于水中，用732-[H+]樹(shù)脂將其轉(zhuǎn)成FDPH4，用2M NaOH調(diào)pH5.3-5.8，除菌過(guò)濾后，凍干。,2、固定化細(xì)胞制備工藝（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程①FDP產(chǎn)生菌的培養(yǎng)：菌株為啤酒酵母②固定化細(xì)胞制備：菌液與加熱熔化的卡拉膠混勻，冷卻成型，切塊即可。③活化固定

10、化細(xì)胞：用含底物的表面活性劑于35℃浸泡活化。④酶促轉(zhuǎn)化：活化的固定化細(xì)胞裝柱，30℃底物溶液流過(guò)活化。,⑤離子交換：反應(yīng)液經(jīng)除蛋白后過(guò)濾，濾液通過(guò)DEAE-C陰離子交換柱，經(jīng)洗滌、洗脫，收集洗脫液，加入適量CaCl2使生成FDPCa沉淀。⑥轉(zhuǎn)酸：FDPCa懸于無(wú)菌水中，用732-[H+]樹(shù)脂將其轉(zhuǎn)成FDPH4，用2M NaOH調(diào)pH5.3-5.8，經(jīng)活性炭脫色，超濾凍干，得FDPNa3H精品。（三）檢驗(yàn)方法：酶分析法（四）作用

11、與用途 用于治療急性心肌梗塞、心功能不全、冠心病、心肌缺血發(fā)作休克等癥的急救藥物；對(duì)各類(lèi)肝炎引起的深度黃疸、轉(zhuǎn)氨酶升高及低白蛋白血癥也有較好的治療作用。,三、肝素,（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 是三硫酸雙糖與二硫酸雙糖以2∶1的比例在分子中交替聯(lián)結(jié)而成的。其分子結(jié)構(gòu)有一個(gè)六糖重復(fù)單位（p515）；整個(gè)分子呈螺旋形纖維狀。分子量不均一，平均分子量12000±6000。肝素及其鈉鹽為白色或灰白色粉末。分子中含有硫酸基和羧基，

12、呈強(qiáng)酸性；肝素具有聚陰離子性質(zhì)，能與多種陽(yáng)離子反應(yīng)成鹽。肝素與堿性染料如天青A、甲苯胺藍(lán)等反應(yīng)可使染料的光吸收向短波方向移動(dòng)。 肝素可被肝素酶降解為三硫酸雙糖單位和二硫酸雙糖單位。 硫酸化程度高的肝素具有較高的降脂和抗凝血活性；高度乙?；母嗡兀鼓钚越档蜕踔镣耆?，而降脂活性不變。小分子量肝素（4K—5K）具有較低的抗凝活性和較高的抗血栓形成活性。,（二）生產(chǎn)工藝 肝素在組織內(nèi)和其他粘多糖一起與蛋

13、白質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物，因此，肝素制備過(guò)程包括肝素蛋白質(zhì)復(fù)合物的提取、解離和肝素的分離純化兩大步。解離可以用鹽解離法和酶解離法。1、鹽解-離子交換生產(chǎn)工藝（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程,2、酶解-離子交換生產(chǎn)工藝（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程,（三）檢驗(yàn)方法,（四）作用與用途（p518）,(五)小分子肝素(p518),四、硫酸軟骨素,（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì),（二）生產(chǎn)工藝1、稀堿-濃鹽法（1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程①提?。很浌欠鬯?，用

14、3MNaCl浸泡，50%NaOH調(diào)pH12-13，室溫?cái)嚢?0-15h，過(guò)濾。②鹽解：上述提取液用2M HCl調(diào)pH7-8，升溫至90℃、20min，冷卻過(guò)濾。③除酸性蛋白：將鹽解液調(diào)pH2-3攪拌10min，精置后過(guò)濾，濾液調(diào)pH6.5，加去離子水調(diào)節(jié)NaCl為1M左右。④沉淀：在上述溶液中加入95%乙醇，使乙醇濃度為60%，沉淀過(guò)夜。⑤干燥：收集沉淀，用乙醇脫水，60-65℃真空干燥，得成品硫酸軟骨素。,2、稀堿-酶解法（

15、1）工藝路線(xiàn),（2）工藝過(guò)程①提?。很浌欠鬯椋?%NaOH浸泡提取。②酶解：提取液用1∶1HCl調(diào)pH8.8-8.9，升溫至50℃；加入1/25量的胰酶，于53-54℃保溫6-7h。③吸附：用1∶1HCl調(diào)pH6.8-7.0，加入活性白陶土和活性炭，攪拌吸附1h，再用HCl調(diào)pH6.4，過(guò)濾。④沉淀、干燥：調(diào)pH6.0，95%乙醇沉淀（終濃度75%）8h以上，收集沉淀，60-65℃真空干燥。,（三）檢驗(yàn)方法 硫酸軟骨素的

16、檢驗(yàn)方法一般有：（1）比色法 （2）重量法 （3）定氮法（四）作用與用途,五、透明質(zhì)酸（522）,第四節(jié) 重要多糖的研究進(jìn)展,,,目前已對(duì)數(shù)十種多糖進(jìn)行了含量測(cè)定 ,如對(duì)烏頭多糖、東當(dāng)歸多糖、石斛多糖、桔梗多糖、人參多糖、細(xì)葉薊多糖、柴胡多糖、豬苓多糖、紅松果多糖 、菟絲子多糖 、胎盤(pán)脂多糖 、黔產(chǎn)黨參多糖、文蛤多糖 、石仙桃多糖 、肉蓯蓉多糖 、胖大海多糖 、黃精多糖 、耳葉牛皮消多糖 、石菖蒲多糖 、海藻多

17、糖、黃花倒水蓮多糖、商陸多糖、金線(xiàn)蓮多糖,靈芝多糖、白花蛇舌草多糖 、米糖多糖 、蘆薈多糖 、山藥多糖、大棗多糖等進(jìn)行了較系統(tǒng)的含量研究。,,對(duì)近百種多糖的組成、組成比及結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究 ,如赤芝子實(shí)體多糖 ( BN3C1、N3C3)、黑木耳多糖 ( AA)、安絡(luò)小皮傘組多糖 ( FP1)、雷丸多糖 ( S-40001)、針裂蹄多糖、竹黃多糖 ( SB1、SB2)、亮菌多糖( ATM3)、銀耳子實(shí)體多糖、銀耳孢子多糖( TFA、TFB、T

18、FC)、太子參多糖 ( PHPA、PHPB)、山豆根多糖 ( SSA)、長(zhǎng)松蘿多糖、太百花多糖、仙草多糖 ( MCPS)、花刺參酸性粘多糖( SV1、SV11)、刺參粘多糖、掌葉大黃酸性雜多糖 ( DHP-1、DHP-2)、槐耳菌絲體多糖、半邊蓮多糖、香柱菌多糖、蛹蟲(chóng)草胞外多糖、靈芝子實(shí)體多糖 ( GLA4、GLA7 、GLSP1、GLSP2、GLSP3)、女貞子多糖、耳葉牛皮消多糖 ( AC-A、AC-B、AC-C)、,,茶葉多糖、知

19、母多糖、烏頭多糖、白花蛇舌草多糖、蒼術(shù)多糖、薏苡仁多糖( Coxian A、B、C)、山藥多糖 ( Dioscoran A、B、C、D、E、F)、麻黃多糖 ( Ephedran A、B、C)、刺五加多糖 ( Eleutheran A、B、C、D、E、F、G)、桑白皮多糖 ( Moran A)、硬紫草多糖 ( Lithos Perman A、B、C、D)、甘蔗多糖 ( Sacdharan A、B、C、D、E、F)、當(dāng)歸多糖、皂角菌多糖、紅

20、芪多糖 、老龍皮多糖 、泰山赤靈芝肽多糖、草葉獼猴桃多糖 、明黨參多糖 、柴胡果膠多糖、車(chē)前草多糖、茜草多糖 、胖大海多糖等進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析、分子量測(cè)定等。,,多糖的高級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)功能的影響比一級(jí)結(jié)構(gòu)更重要 ,決定高級(jí)結(jié)構(gòu)的重要因素是多糖分子鏈內(nèi)和鏈外的氫鍵。如X射線(xiàn)分析表明 ,香菇多糖及裂褶多糖均具 β-三股繩狀螺旋型立體結(jié)構(gòu) ,如在香菇多糖中加入尿素或二甲亞楓 ,使分子的立體構(gòu)型發(fā)生改變 ,則其活性也就喪失。另一方面 ,主鏈結(jié)構(gòu)同時(shí)有β-

21、1.3又有β-1.6側(cè)鏈的葡聚糖 ,有些具有強(qiáng)的活性 ,而有些卻無(wú)活性。,4.1.抗腫瘤多糖,（一）主要多糖1、細(xì)菌多糖卡介菌多糖抑制Ｓ180,抑制肝癌Ｈｅｐｓ雙歧桿菌多糖誘導(dǎo)ＬＡＫ活性 ,抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移裂褶菌多糖激活ＭΦ ,抑制實(shí)體瘤冬蟲(chóng)夏草多糖誘生ＴＮＦ ,促使腫瘤細(xì)胞凋亡 ,抗白血病,2、真菌多糖,香菇多糖 (ＰＳＫ)　 ( 50萬(wàn)Ｄａ)治療胃癌、肝癌、肺癌細(xì)胞毒作用 ,提高ＮＫＣ活性靈芝多糖ＧＬ 1增強(qiáng)免疫功能

22、,抑制實(shí)體瘤豬苓多糖誘生ＴＮＦ ,治療白血病樹(shù)舌多糖抑制ＨｅｐＡ癌細(xì)胞增殖 ,增強(qiáng)抑癌基因ｐ16表達(dá)水平云芝糖肽增強(qiáng)巨噬細(xì)胞抗實(shí)體瘤 ,抑制腫瘤轉(zhuǎn)移 ,增強(qiáng)Ｔ細(xì)胞和ＭΦ細(xì)胞功能炭團(tuán)菌多糖 (ＹＣＰ)誘生ＴＮＦ ,抑制肝癌,,蒙古口蘑多肽激活ＭΦ ,促進(jìn)Ｔ ｃｅｌｌｓ,抑制Ｓ180茯苓多糖激活補(bǔ)體 ,加強(qiáng)ＭΦ活性抑制實(shí)體瘤啤酒酵母多糖 (Ｐ葡聚糖 )增強(qiáng)ＭΦ和ＮＫＣ抑制實(shí)體瘤,3、植物多糖,枸杞多糖 抗突變 ,防護(hù)遺傳損傷

23、,抑制實(shí)體瘤牛膝多糖提高ＮＫＣ活性 ,誘生ＴＮＦ抑制實(shí)體瘤人參多糖激活ＮＫＣ和Ｔ細(xì)胞抑制實(shí)體瘤銀杏外種皮多糖抑制肝癌、胃癌、肺癌波葉大黃多糖提高ＳＯＤ ,抗自由基損傷 ,抑制實(shí)體瘤鐵筷子多糖 (ＨＦＰｓ)提高抗氧化酶活性 ,抑制實(shí)體瘤,,商陸多糖增強(qiáng)ＭΦ活性 ,增強(qiáng)免疫 ,抑制小鼠Ｓ180肉瘤紫菜多糖抗突變 ,增強(qiáng)免疫 ,抗實(shí)體瘤黃芪多糖激活ＭΦ活性 ,抗肝癌當(dāng)歸多糖阻滯ＨＬ 60,Ｋ562細(xì)胞生長(zhǎng)巴戟天多糖誘導(dǎo)ＮＯ

24、 ,ＩＬ 1及ＴＮＦ抑制實(shí)體瘤米糠Ａ 葡聚糖抑制纖維肉瘤 ,Ｌｅｗｉｓ肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)紅毛五加多糖誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡 ,抑制消化道腫瘤,,地黃多糖抑制ｐ53基因 ,抑制Ｌｅｗｉｓ肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)鬼臼多糖抑制腹水腫瘤生長(zhǎng)佛手多糖抑制小鼠移植性肝腫瘤蘆薈多糖增強(qiáng)ＴＡＫ細(xì)胞的增殖能力 ,增加ＴＡＫ細(xì)胞和ＩＬ 2Ｒ的表達(dá),4、動(dòng)物多糖,刺參酸性粘多糖抑制腫瘤生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移 ,抑制Ｓ180,乳腺癌海星多糖 (ＮＲＰ 1)抑制腫瘤生長(zhǎng)鮑魚(yú)多糖

25、抑制人鼻咽癌的生長(zhǎng) ,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和壞死姥鯊糖蛋白　 (Ｍｒ=1 61萬(wàn) )抑制血管生成 ,抑制ＤＮＨＳＣＦ2肽多糖抑制血管生成海膽糖脂抑制肺癌生長(zhǎng)珠蚌多糖促進(jìn)Ｂ細(xì)胞轉(zhuǎn)化增殖 ,增強(qiáng)免疫功能,5、藻類(lèi)多糖,海藻多糖抑制實(shí)體瘤 ,增強(qiáng)Ｔ細(xì)胞殺傷Ｔ細(xì)胞和ＮＫ細(xì)胞海帶硫酸多糖抑制Ｓ180,抑制腫瘤Ｈｅｐｓ螺旋藻多糖抑制Ｓ180褐藻硫酸多糖抑制實(shí)體瘤干苔多糖抑制人胰腺癌ＳＷ19 9 0細(xì)胞活性 ,抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)功能,多糖

26、的抗腫瘤作用機(jī)理,1、對(duì)腫瘤細(xì)胞的直接抑制作用　 牛膝多糖和人參多糖能提高荷瘤小鼠的自然殺傷細(xì)胞 (NKC)的活性 ,誘生腫瘤壞死因子與Ｔ 淋巴細(xì)胞活性對(duì)腫瘤細(xì)胞起不同程度的殺傷和抑制作用;蒙古口蘑糖肽復(fù)合物能激活巨噬細(xì)胞 ,促進(jìn)Ｔ細(xì)胞增生 ,抑制Ｓ180生長(zhǎng) ;香菇多糖能激活巨噬細(xì)胞 ,增強(qiáng)細(xì)胞毒作用 ,提高ＮＫＣ活性 ,誘導(dǎo)白細(xì)胞聚集發(fā)揮抗腫瘤作用;巴戟天多糖通過(guò)誘導(dǎo)NO、IL1及TNF的生成發(fā)揮其抑瘤作用 ;海帶硫酸多糖能激

27、活小鼠腹腔巨噬細(xì)胞 ,提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的過(guò)氧化物酶活性及其吞噬功能 ,從而抑制小鼠Ｓ180肉瘤。,2、改變腫瘤細(xì)胞膜的生長(zhǎng)特性,茯苓多糖 (ＰＰＳ)、刺五加多糖 (ASPS)對(duì)Ｓ180、Ｋ562具有直接抑瘤作用 ,其機(jī)理是升高腫瘤細(xì)胞膜的唾液酸 (ＳＡ) ,減少磷脂花生四烯酸和豆蔻酸 ,改變細(xì)胞膜磷脂脂肪酸的組成 ,干擾膜肌醇磷脂代謝 ,抑制磷脂酸肌醇 (ＰＩ)轉(zhuǎn)換 ,從而影響細(xì)胞表面電荷特性和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)及表面受體功能 ,抑制腫瘤細(xì)胞

28、增殖;牛膝多糖能提高Ｓ180細(xì)胞膜中ＳＡ的含量 ,降低膜磷脂含量 ,對(duì)白血病Ｋ562細(xì)胞有明顯抑制作用。,3、影響腫瘤細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),豬苓多糖能降低磷酸二酯酶的活性 ,提高細(xì)胞內(nèi)ｃAMP水平 ；香菇多糖、茯苓多糖與豬苓多糖對(duì)HL 60細(xì)胞漿和細(xì)胞膜的酪氨酸蛋白激酶(TPK)有抑制作用 ,而對(duì)酪氨酸蛋白激酶 (PTPP)活力有明顯激活作用 ；上述結(jié)果提示這 3種多糖的抗腫瘤作用與酪氨酸蛋白的磷酸化水平下降有關(guān)。,4、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡

29、和抑制腫瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)分化,地黃低聚多糖 (LRPｓ)促使Lewis肺癌細(xì)胞內(nèi)的ｐ5 3基因表達(dá)升高 ,通過(guò)調(diào)控ｐ5 3基因的表達(dá)影響腫瘤細(xì)胞的增殖、分化和凋亡;紅毛五加多糖能誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞的凋亡;云芝多糖可使結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)阻滯于Ｇ1期 ;人參多糖、當(dāng)歸多糖能使HL60、Ｋ5 6 2癌細(xì)胞生長(zhǎng)阻滯于Ｇ1期和Ｇ0期。,5、抑制腫瘤細(xì)胞的核酸和蛋白質(zhì)合成,樹(shù)舌多糖使ＨｅｐＡ癌細(xì)胞的ＤＮＡ合成速度減慢 ,從而使癌細(xì)胞分裂減慢 ,抑制腫瘤細(xì)胞

30、生長(zhǎng);豬苓多糖和茯苓多糖能干擾癌細(xì)胞ＲＮＡ轉(zhuǎn)錄過(guò)程 ,抑制多肽鏈合成的延長(zhǎng)作用 ,影響ＤＮＡ拓樸異構(gòu)酶Ⅱ活性 ,促進(jìn)泛酶介導(dǎo)的ＤＮＡ斷裂 ,引起腫瘤細(xì)胞死亡 ;刺參酸性粘多糖可明顯抑制Ｓ18 0和乳腺癌細(xì)胞的ＤＮＡ合成 ;銀耳多糖在整體腹腔給藥時(shí)可顯著抑制腫瘤細(xì)胞ＤＮＡ合成速率。,6、對(duì)腫瘤細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響,紅毛五加多糖能破壞Ｋ5 6 2癌細(xì)胞的細(xì)胞器和細(xì)胞枝 ,干擾癌細(xì)胞的代謝與增殖 ,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。,7、對(duì)癌基因的影響,利用

31、Northern雜交和狹線(xiàn)雜交的定量檢測(cè)方法 ,發(fā)現(xiàn)低分子量地黃多糖 (ＬＲＰＳ)在體內(nèi)抗腫瘤有效劑量下可使小鼠Lewis肺癌細(xì)胞內(nèi)的正調(diào)控基因cfos基因表達(dá)明顯增加 ,負(fù)調(diào)控基因cmyc基因表達(dá)明顯減少 ,表明地黃多糖對(duì)癌基因表達(dá)有明顯影響。又采用RTPCR的方法檢測(cè)了體外給藥對(duì)Lewis肺癌細(xì)胞的抗癌基因ｐ5 3基因表達(dá)水平的影響 ,結(jié)果ｐ5 3基因表達(dá)明顯增加。,8、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能 ,提高機(jī)體的抗腫瘤作用,有些多糖對(duì)腫瘤細(xì)胞無(wú)

32、直接抑制作用 ,是通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能而發(fā)揮其抗腫瘤作用的。多糖的免疫抑癌作用是多靶點(diǎn)的 ,幾乎遍及非特異免疫和特異性免疫應(yīng)答的多個(gè)環(huán)節(jié)。,9、激活巨噬細(xì)胞,白術(shù)多糖和裂褶菌素 (水溶性多糖 )可激活巨噬細(xì)胞 ,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能和機(jī)體的特異性免疫;釀酒酵母Ｐ 葡聚糖可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞活性和ＮＫ細(xì)胞活性 ,加強(qiáng)腹腔ＭΦ對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷活性;當(dāng)歸多糖ＳＴ升高血液、胸腺的ｃＧＭＰ水平 ,促進(jìn)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和巨噬細(xì)胞的活性;海帶硫酸多

33、糖能激活巨噬細(xì)胞 ,提高其吞噬功能 ,有效抑制Ｓ180的生長(zhǎng)。海帶中的巖藻多糖能抑制ＶＥＧＦ165與細(xì)胞表面受體的結(jié)合 ,從而抑制腫瘤血管的生長(zhǎng) ,具有明顯抗腫瘤作用 ,其抗腫瘤作用與巖藻多糖的硫酸化程度有關(guān)。,,香菇多糖在臨床上用于治療胃癌、肝癌、肺癌及血管腫瘤 ,它能活化殺傷性Ｔ淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞、提高ＮＫ細(xì)胞活性 ,增強(qiáng)機(jī)體依賴(lài)性巨噬細(xì)胞毒作用;蘆薈多糖能促進(jìn)小鼠脾、胸腺的增長(zhǎng) ,提高ＭΦ吞噬功能和ＭΦ表面的分子表達(dá);靈芝多糖

34、能引起巨噬細(xì)胞膜超極化 ,導(dǎo)致跨膜離子的流動(dòng) ,這可能是其跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)的重要途徑。研究表明ＩＰ3/Ｃａ2+ 和ＤＡＧ/ＰＫＣ兩條信號(hào)途徑均參與了靈芝多糖對(duì)ＭΦ的活化過(guò)程;雙歧桿菌肽聚糖能激活巨噬細(xì)胞 ,提高ＭΦ細(xì)胞內(nèi) [Ca2+],增強(qiáng)機(jī)體抗癌活性;豬苓多糖通過(guò)激活巨噬細(xì)胞合成與釋放單核因子活化淋巴細(xì)胞 ,從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答作用。,10、活化淋巴細(xì)胞,仙茅多糖對(duì)成熟的Ｔ細(xì)胞有明顯促進(jìn)增殖作用;香菇多糖可增加IL 2對(duì)ＣＴ

35、Ｌ的擴(kuò)增作用和對(duì)癌細(xì)胞的最大殺傷活性;豬苓多糖能明顯增強(qiáng)小鼠對(duì)異型脾細(xì)胞的DTH以及其激活的ＣＴＬ對(duì)癌細(xì)胞的殺傷作用;豬苓多糖、香菇多糖可明顯增強(qiáng)LAK活性 ,并與IL 2協(xié)同可激發(fā)LAK前體細(xì)胞 ,使增殖分化;云芝多糖能誘導(dǎo)Ｔ細(xì)胞增殖 ,減少免疫抑制因子ＴＧＦ β的產(chǎn)生;香菇多糖能使體內(nèi)毒性Ｔ細(xì)胞和輔助Ｔ細(xì)胞增加 ,抑制性Ｔ細(xì)胞減少 ,ＣＤ4+/ＣＤ8+升高 ,外周εΦＮＫ細(xì)胞、ＬＡＫ細(xì)胞活性增加。,11、促進(jìn)細(xì)胞因子分泌,

36、多糖一方面可激活ＣＴＬ ,ＮＫ ,ＬＡＫ ,ＭΦ等而增強(qiáng)細(xì)胞免疫作用 ,另一方面還可促進(jìn)ＩＬ 1,ＩＬ 2,ＩＬ6,ＴＮＦ等細(xì)胞因子的表達(dá)與分泌。黃芪多糖能誘生干擾素 ;茯苓多糖能刺激淋巴細(xì)胞產(chǎn)生ＩＬ 2,增強(qiáng)ＴＮＦ基因的轉(zhuǎn)系 ,從而增加ＭΦ釋放ＴＮＦ ;枸杞多糖能明顯增加ＩＬ 2的產(chǎn)生和增加ＩＬ 2Ｒ的表達(dá) ,顯著增加巨噬細(xì)胞Ｃ3ｂ和Ｆｃ受體的數(shù)量和親和力 ,促進(jìn)合成ＩＬ 1和ＴＮＦ ,從而發(fā)揮其免疫增強(qiáng)作用和免疫調(diào)

37、節(jié)作用;炭團(tuán)菌多糖能提高脾細(xì)胞ＩＬ 2,γ ＩＦＮ和ＴＮＦ α的基因表達(dá)水平;殼聚多糖能通過(guò)替代途徑和經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體 ,激發(fā)宿主非特異性免疫功用 ,對(duì)腹水癌小鼠有明顯增強(qiáng)非特異性免疫作用。,12、活化補(bǔ)體,補(bǔ)體是血液中一組具有酶源活性的蛋白質(zhì)系列 ,能協(xié)同抗體殺死病原微生物或協(xié)助配合吞噬細(xì)胞來(lái)殺滅病原微生物。許多實(shí)驗(yàn)證實(shí)多糖能通過(guò)替代和經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體 ,激發(fā)宿主非特異性免疫功能。補(bǔ)體蛋白上存在的識(shí)別點(diǎn)可識(shí)別多糖的結(jié)構(gòu) ,已從甘

38、草、艾葉、柴胡、甘草、紫根等植物中提取出具有活化補(bǔ)體功能的多糖 ,這些多糖都是酸性多糖。黃芪多糖、黨參多糖、人參多糖對(duì)正常豚鼠無(wú)影響 ,但對(duì)經(jīng)過(guò)處理補(bǔ)體下降、吞噬率下降的豚鼠有促進(jìn)補(bǔ)體恢復(fù)的功能 ,并能促進(jìn)中性白細(xì)胞吞噬率提高和恢復(fù)。靈芝多糖能激活補(bǔ)體系統(tǒng) ,增加特異性血漿蛋白ＬＡ、ＬＢ、ＬＣ的量。茯苓多糖增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬功能的機(jī)制與激活補(bǔ)體有關(guān) ,茯苓多糖通過(guò)激活補(bǔ)體Ｃ3、Ｃ5導(dǎo)致巨噬細(xì)胞內(nèi)溶菌酶的釋放而間接加強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功

39、能。,4.2.降血糖作用多糖,（一）主要降糖作用多糖人參多糖 :人參多糖 (ＧＰ)腹腔注射給藥 50、100和 200ｍｇ/ｋｇ明顯降低正常小鼠血糖和鏈脲霉素致小鼠高血糖 , 200ｍｇ/ｋｇ明顯降低腎上腺素致小鼠高血糖。 30、60ｍｇ/ｋｇ肌肉注射還可明顯降低四氧嘧啶致白兔高血糖 ,且有明顯量效關(guān)系。人參多糖 (ＧＨ1)腹腔注射和皮下注射 50～ 200ｍｇ/ｋｇ明顯降低正常小鼠血糖。,,麥冬多糖 :預(yù)防性口服給藥 200ｍｇ/ｋ

40、ｇ ,對(duì)四氧嘧啶致糖尿病小鼠無(wú)明顯影響 ;治療性口服給藥 100ｍｇ/ｋｇ顯著降低正常小鼠血糖 , 200ｍｇ/ｋｇ明顯降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖水平?？诜?4～ 11ｈ降血糖作用最明顯 , 24ｈ仍有作用。亦有研究發(fā)現(xiàn) ,灌胃給藥麥冬多糖 100和 300ｍｇ/ｋｇ對(duì)葡萄糖、四氧嘧啶及腎上腺素致小鼠高血糖均有明顯抑制作用 ,對(duì)正常小鼠血糖也有明顯降低作用。,,枸杞多糖 :50、100ｍｇ/ｋｇ灌胃給藥 ,明顯降低正常動(dòng)物的血糖和四

41、氧嘧啶致小鼠高血糖 ;還能預(yù)防四氧嘧啶引起的小鼠血糖升高 (Ｐ <0. 01) 。亦有報(bào)道 ,枸杞多糖對(duì)正常小鼠血糖無(wú)明顯影響 ,對(duì)實(shí)驗(yàn)性四氧嘧啶糖尿病兔有明顯降血糖作用。,,丹皮多糖 :灌胃給藥 100、200ｍｇ/ｋｇ ,明顯降低正常小鼠血糖 , 200、400ｍｇ/ｋｇ明顯降低葡萄糖致小鼠高血糖。,,高山紅景天多糖 :50、100和 200ｍｇ/ｋｇ ,一次或多次腹腔注射給藥 ,能降低正常小鼠血糖、肝糖原和血總脂 ,明顯抑制

42、四氧嘧啶、腎上腺素和葡萄糖引起的小鼠高血糖。,,桑葉多糖 :腹腔注射 , 50、100和 200ｍｇ/ｋｇ ,明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖水平 ,還可提高糖尿病小鼠耐糖能力。,,知母多糖 :灌胃給藥 50、100和 200ｍｇ/ｋｇ ,明顯降低正常小鼠血糖 , 100ｍｇ/ｋｇ明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖。腹腔注射給藥 100ｍｇ/ｋｇ ,可明顯降低正常小鼠血糖。,,彩云多糖 :又名云芝多糖 (ＣＶＰＳ) , 500ｍｇ/ｋｇ灌胃

43、給藥對(duì)正常小鼠血糖無(wú)明顯影響 ,可預(yù)防四氧嘧啶致小鼠高血糖 ,明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖。,,地黃多糖 :懷地黃多糖 (ＲＧ ＷＰ)腹腔注射對(duì)正常小鼠和鏈脲霉素糖尿病小鼠有降血作用。,,玉米穗多糖 :玉米穗多糖精品對(duì)四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠有預(yù)防作用 , 100、400ｍｇ/ｋｇ明顯降低正常及糖尿病小鼠血糖。,,蟲(chóng)草多糖 :從冬蟲(chóng)夏草中得到的一種多糖成分ＣＳ ＯＨＥＰ腹腔注射明顯降低正常小鼠血糖和鏈脲霉素致糖尿病小鼠高血糖 ,口服

44、給藥可輕度降低正常小鼠血糖水平。另一多糖成分ＣＳ Ｆ30作用優(yōu)于CSOHEP且口服可以降低血糖水平。CSF30腹腔給藥 ,對(duì)遺傳性糖尿病小鼠有很強(qiáng)的降血糖作用 ,靜脈注射使正常小鼠和鏈脲霉素致糖尿病小鼠血糖水平迅速下降。CSF30還可降低小鼠血漿甘油三脂和膽固醇水平。,（二）降糖作用機(jī)理,體內(nèi)血糖水平維持在一定范圍 ,主要得益于胰島素、胰開(kāi)糖素等激素的調(diào)節(jié)。藥物可以通過(guò)多種環(huán)節(jié)影響血糖水平。人參多糖 (ＧＨ1)可降低肝糖原含量 ,同時(shí)

45、增加腺苷酸環(huán)化酶活性 ,并增加ｃＡＭＰ含量。此作用可被普萘洛爾完全阻滯 ,提示其降低肝糖原作用與腎上腺素相似 ,但不是通過(guò)促進(jìn)腎上腺素釋放引起 ,因?yàn)椋牵?對(duì)去腎上腺素大鼠仍有降低肝糖原作用。懷地黃多糖、蟲(chóng)草多糖均可使肝糖原含量下降。,,人參多糖 (ＧＨ1)可以促進(jìn)胰島素釋放 ,但其對(duì)糖代謝的影響并非完全通過(guò)釋放胰島素 ,主要原因可能在于促進(jìn)機(jī)體肝臟及組織細(xì)胞的有氧氧化過(guò)程。懷地黃多糖也可促進(jìn)正常小鼠胰島素分泌。影響代謝酶活性　懷地

46、黃多糖 (ＲＧ ＷＰ)能顯著增加葡萄糖激酶和葡萄糖 6 磷酸脫氫酶活性 ,減低肝葡萄糖 6 磷酸酶活性和磷酸果糖激酶活性。蟲(chóng)草多糖CSF30同樣可以升高肝臟葡萄糖激酶、己糖激酶和葡萄糖- 6- 磷酸脫氫酶活性。,促進(jìn)胰島素分泌,4.3.抗病毒作用多糖,多糖的抗病毒作用已引起醫(yī)藥界的高度重視 ,尤其是硫酸多糖 (sulfated polysaccharides ,或稱(chēng)硫酸酯化多糖、硫酸化多糖 )的強(qiáng)抗病毒活性 ,顯示了廣闊的藥用

47、前景?？ɡz是一種紅藻硫酸多糖 ,其突出的抗病毒活性為多糖藥物研究所關(guān)注。,1、　多糖抗病毒活性及構(gòu)效關(guān)系研究,大量研究表明 ,許多天然多糖和化學(xué)合成的多糖對(duì)各種病毒有抑制作用 ,如艾滋病毒 (ＨＩＶ 1) ,單純皰疹病毒 (ＨＳＶ 2) ,巨細(xì)胞病毒 (ＣＭＶ) ,流感病毒,囊狀胃炎病毒（ＶＳＶ ) ,勞斯肉瘤病毒,鳥(niǎo)肉瘤病毒 等等。各種天然多糖還有抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性。目前 , 多糖及其衍生物的抗病毒活性的研究 ,主要有硫酸多糖、

48、中性多糖及糖復(fù)合物(脂多糖、糖蛋白及糖肽 ),而硫酸多糖的研究已成為當(dāng)今多糖研究中的一個(gè)熱點(diǎn)。各種天然及合成硫酸多糖抗病毒作用研究進(jìn)展較快 ,如硫酸葡聚糖 ,硫酸戊聚糖 ,硫酸香菇多糖 ,硫酸半乳聚糖 ,巖藻依聚糖 ,卡拉膠等。,,多糖 (及寡糖 )的構(gòu)效關(guān)系研究至今尚不多 ,且相當(dāng)不完善 ,這可能與多糖結(jié)構(gòu)復(fù)雜和臨床研究太少有關(guān)。目前所知 ,多糖的活性與其初級(jí)和高級(jí)結(jié)構(gòu)特別是三維空間構(gòu)象密切相關(guān) ,而高級(jí)結(jié)構(gòu)對(duì)其活性影響更大。有證

49、據(jù)表明 ,多糖的高級(jí)結(jié)構(gòu)比一級(jí)結(jié)構(gòu)在活性方面起更大作用。有些多糖一級(jí)結(jié)構(gòu)相同 ,但活性不同 ,其原因是二級(jí)結(jié)構(gòu)及三級(jí)結(jié)構(gòu)不同。多糖分子鏈內(nèi)外氫鍵是多糖高級(jí)結(jié)構(gòu)的決定因素。一般地 ,凡具 β 螺旋型立體結(jié)構(gòu)的多糖其活性較高。目前多糖立體結(jié)構(gòu)研究方法一般是依靠2Ｄ ＮＭＲ及Ｘ 衍射。,,九十年代初 ,國(guó)際上已有 4種以上多糖 ,如ＰＳＫ ,Ｌｅｎｔｉｎａｎ ,Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｒａｎ和Ｈｏｅ/Ｂａｙ946在臨床上應(yīng)用 ,有的單獨(dú)應(yīng)用于癌

50、癥或艾滋病的治療上 ,更多的則作為佐劑。,,Ｕｅｎｏ等報(bào)道了硫酸葡聚糖 (ｄｅｘｔｒａｎｓｕｌｆａｔｅ)和疊氮胸苷ＡＺＴ的協(xié)同作用。體外實(shí)驗(yàn)已證明 ,硫酸右旋糖酐與ＡＺＴ有協(xié)同抗ＨＩＶ 1作用。如果硫酸右旋糖酐與ＡＺＴ合用治療 ,可減少用藥量和降低副作用 ,提高患者的耐受性。 1991年 ,Ｓｃｈｏｌｓ報(bào)道了吡啶類(lèi)似物ＡＺＴ ,雙脫氧胞苷 (ＤＤＣ)和硫酸環(huán)糊精的協(xié)同作用。有趣的是 ,香菇多糖本身沒(méi)有抗ＨＩＶ活性 ,但與ＡＺＴ合用可

51、顯著提高ＡＺＴ體外抗ＨＩＶ活性。Ｂｅｕｔｌｅｒ等人 ( 1993)報(bào)道 ,巖藻依聚糖 (ｆｕｃｉｏｄａｎ)與ＡＺＴ也具有協(xié)同作用。,硫酸多糖抗病毒活性,硫酸多糖是指糖羥基上帶有硫酸根的多糖 ,是抗病毒多糖中研究最多的一類(lèi)多糖。包括從植物中提取的各種硫酸多糖、肝素、天然中性多糖的硫酸衍生物及人工合成的各種硫酸多糖 ,如 :硫酸葡聚糖 ,硫酸戊聚糖 ,硫酸木聚糖 ,硫酸香菇多糖 ,巖藻依聚糖 ,卡拉膠等。硫酸多糖具有廣泛的生物學(xué)性質(zhì) ,包

52、括抗病毒、抗腫瘤、對(duì)免疫系統(tǒng)作用和抗凝活性。早在 30年前就已知硫酸多糖的抗病毒性質(zhì)。,,19 64年Ｎａｈｍｉａｓ等報(bào)道過(guò)肝素對(duì)ＨＳＶ有抑制作用 ,但沒(méi)有引起人們的重視 ,當(dāng)時(shí)認(rèn)為這種作用是非特異性的。 80年代末研究發(fā)現(xiàn)幾種聚陰離子物質(zhì)是ＨＩＶ復(fù)制的有效抑制劑，又引起對(duì)硫酸多糖抗病毒作用研究的興趣。鑒于此 ,美國(guó)國(guó)家癌癥研究所對(duì)海洋無(wú)脊椎動(dòng)物篩選發(fā)現(xiàn) ,其水相提取物顯示了高百分率 ( 23% )的抗ＨＩＶ活性 ,而這些活性組分基

53、本是硫酸多糖 ,而且許多提取物顯示出類(lèi)于硫酸葡聚糖和其他硫酸多糖的生物學(xué)特性。,,海藻、真菌及細(xì)菌的胞外和某些植物中均存在有天然的硫酸多糖。有報(bào)道海藻Ｆｕｃｕｓｖｅｓｉｃｕｌｏｓｕｓ中的復(fù)合硫酸多糖巖藻依聚糖 (ｆｕｃｏｉｄａｎ)具有體外ＨＩＶ抑制活性。Ｇａｌａｘｅａ ,Ｒｅｎｉｏｃｈａｌｉｎａ和Ｐｙｒｏｓｏｍａ中的多糖為硫酸藻聚糖 (ｆｕｃａｎｓ) ,與巖藻依聚糖的結(jié)構(gòu)類(lèi)似 ,但支鏈較少。從帚狀鹿角菜 (Ｐｅｌｖｅｌｉａｆａｓｔｉｇｉ

54、ａｔａ)中分離的硫酸多糖巖藻依聚糖 ,主要由巖藻糖 –4- 硫酸構(gòu)成 ,能在體外抑制乙型肝炎病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)與抗ＨＢｓＡｇ抗體反應(yīng)。近年 ,對(duì)紅藻多糖卡拉膠的抗病毒作用研究引起了人們的注意。,,許多研究結(jié)果發(fā)現(xiàn) ,多糖與其他藥物具有協(xié)同作用。將多糖及其衍生物與現(xiàn)有藥物聯(lián)合作用可能有 3種益處 :( 1)防止或推遲抗性株的出現(xiàn) ;( 2)可能提高抗病毒活性 ,擴(kuò)大單個(gè)藥物的抗病毒范圍 ;( 3)減少用藥量以減少毒性的可能性。

55、而理想的結(jié)合治療至少應(yīng)滿(mǎn)足以下兩個(gè)條件 :( 1)用不同的機(jī)制抑制病毒復(fù)制 ,如阻止病毒附著 ,抑制反轉(zhuǎn)錄酶 ;( 2)在較多細(xì)胞類(lèi)型中影響病毒復(fù)制 ,而無(wú)毒性。這種結(jié)合治療對(duì)于治療ＡＩＤＳ這樣的疑難病癥提供了一個(gè)很好的方法。研究表明 ,相對(duì)無(wú)毒的硫酸聚陰離子與具毒性的細(xì)胞外抗病毒藥物結(jié)合使用 ,可降低后者的用量。,,硫酸多糖抗病毒機(jī)理 一般認(rèn)為 ,多糖抗病毒機(jī)制是對(duì)病毒復(fù)制早期階段進(jìn)行抑制 ,即抑制病毒向細(xì)胞表面的吸附。病毒結(jié)合多

56、糖通過(guò)對(duì)被侵染細(xì)胞外部作用而抑制蝕斑形成 ,這一觀(guān)點(diǎn)為絕大多數(shù)病毒學(xué)家所接受。對(duì)抑制作用模式的研究表明 ,病毒對(duì)細(xì)胞吸附被硫酸聚陰離子阻斷。當(dāng)存在多聚陽(yáng)離子ＤＥＡＥ 葡聚糖和魚(yú)精蛋白 (可與聚陰離子抑制劑結(jié)合 )時(shí) ,抑制作用可被阻止或反轉(zhuǎn)。類(lèi)似特性在紅藻抗皰疹病毒多糖中發(fā)現(xiàn)。,,然而 ,這些研究未揭示抑制作用是否由硫酸聚陰離子結(jié)合到病毒或細(xì)胞表面引起。病毒吸附到細(xì)胞原生質(zhì)膜是一種靜電現(xiàn)象 ,需要細(xì)胞表面和病毒間的分子親和力。細(xì)胞表面這

57、種親和區(qū)域稱(chēng)為病毒受體?？赡苁菑?qiáng)負(fù)電荷硫酸聚陰離子與病毒或細(xì)胞表面正電荷分子結(jié)合 ,從而立體地抑制吸附。與聚陰離子結(jié)合的正電荷分子可能在細(xì)胞受體附近或受體本身。相應(yīng)地 ,聚陰離子可能與向細(xì)胞受體吸附的病毒分子或其附近結(jié)合。被膜單純皰疹病毒含有聚氨基亞精胺即為可與硫酸聚陰離子結(jié)合的正電荷分子。,,硫酸多糖的抗病毒作用機(jī)制也歸功于對(duì)病毒向細(xì)胞吸附相關(guān)作用的抑制 ,即直接抑制病毒進(jìn)入細(xì)胞或進(jìn)入細(xì)胞后復(fù)制的某一步驟。普遍認(rèn)為 ,硫酸多糖對(duì)ＨＩＶ

58、作用機(jī)制與其對(duì)ＨＩＶ 1病毒顆粒向ＣＤ4+ Ｔ 細(xì)胞膜吸附阻斷能力有關(guān)。硫酸多糖與病毒ｇｐ120糖蛋白有專(zhuān)一性反應(yīng) ,并抑制病毒誘導(dǎo)的合體細(xì)胞形成,而合體細(xì)胞的形成是艾滋病人ＣＤ4+Ｔ 淋巴細(xì)胞衰竭的重要原因。ＨＩＶ 1外殼糖蛋白ｇｐｌ20是與Ｔ淋巴細(xì)胞表面ＨＩＶ受體分子ＣＤ4特異結(jié)合的部位 ,ｇｐｌ20Ｖ3區(qū)域帶正電荷 ,硫酸多糖能與該區(qū)域結(jié)合 ,從而使病毒不能與ＣＤ4+Ｔ細(xì)胞結(jié)合 ,消除了ＨＩＶ引起的細(xì)胞病變。,,近些年的研究顯

59、示 ,細(xì)胞表面的硫酸類(lèi)肝素蛋白多糖 (ｈｅｐａｒａｎｓｕｌｆａｔｅ ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎｓ)是ＨＳＶ 1,ＨＳＶ 2,假性狂犬病病毒 (Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ) ,牛皰疹病毒 (ｂｏｖｉｎｅｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ)的起始受體。硫酸化聚合物與這些糖蛋白上的陽(yáng)電荷區(qū)域作用 導(dǎo)致這些區(qū)域的屏蔽作用 ,從而阻止病毒向陰荷的硫酸類(lèi)肝素的結(jié)合。,4.4.多糖類(lèi)生物醫(yī)用材料—甲殼素和殼聚糖的研究及應(yīng)用,生物材料 (Biomate

60、rials)是一種植入生體活系統(tǒng)內(nèi)或與活系統(tǒng)相結(jié)合 ,但又不與生體起藥理反應(yīng)的材料。由于生物材料主要以醫(yī)療為目的 ,它又被稱(chēng)為生物醫(yī)用材料 (Biomedical Material) 。作為生物醫(yī)用材料之一的生物醫(yī)用高分子材料是在活體這個(gè)特殊環(huán)境中使用的材料 ,因此要求它有優(yōu)良的生物相容性 (即血液相容性、組織相容性和免疫性 )、醫(yī)療功能等特性。,,多糖是所有生命有機(jī)體的重要組分 ,在控制細(xì)胞分裂和分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和衰老以及維持生命有

61、機(jī)體的正常代謝等方面有重要作用。同時(shí) ,多糖也具備上述作為生物醫(yī)用材料的基本要求 ,能夠在生物體中酶解成易被活體吸收、無(wú)毒副作用的小分子物質(zhì) ,不會(huì)殘留在活體內(nèi) ,是一類(lèi)生物降解吸收型高分子材料(Bioabsorbale Polymers)。自 80年代以來(lái) ,國(guó)外形成了甲殼素 (Chitin)、殼聚糖 (Chitosan,CS)等多糖類(lèi)生物醫(yī)用材料的開(kāi)發(fā)研究熱潮。進(jìn)入 9 0年代 ,我國(guó)對(duì)甲殼素和殼聚糖資源的開(kāi)發(fā)研究也越來(lái)越重視。甲殼

62、素、殼聚糖等天然高分子在固定化酶、藥物控釋載體、絮凝劑、人工透析膜、吸收縫合線(xiàn)、傷口涂敷料、人造皮膚等生物醫(yī)藥方面已有廣泛應(yīng)用 。,甲殼素是Ｎ 乙酰基 Ｄ 葡萄糖胺通過(guò)β 1, 4 甙鍵相連的直鏈狀氨基多糖 ,其化學(xué)名為 ( 1, 4) 2 乙酰氨基 2 脫氧 β Ｄ 葡萄糖 ,也稱(chēng)為聚 (Ｎ 乙?；?Ｄ 葡糖胺 )。結(jié)構(gòu)式為 :,,,固定化酶 甲殼素和殼聚糖及其衍生物作為固定化酶載體的技術(shù)已進(jìn)入實(shí)際應(yīng)用階段,國(guó)內(nèi)

63、在這方面也開(kāi)展了廣泛而深入的研究。Ｌ 天門(mén)冬酰胺酶 (EC3511)能專(zhuān)一地催化水解Ｌ 天門(mén)冬酰胺 ,形成天門(mén)氨酸和氨 ,而Ｌ 天門(mén)冬酰胺是某些敏感腫瘤細(xì)胞代謝鏈上的一個(gè)環(huán)節(jié) ,一旦破壞 ,將影響腫瘤細(xì)胞的氨基酸、蛋白質(zhì)合成 ,從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。但直接使用該酶會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用。為了克服天然酶針劑出現(xiàn)的抗原 抗體反應(yīng) ,它被制成用各種載體固定的固定化酶。殼聚糖是一種天然氨基多糖 ,可在室溫下凝膠化 ,在磷酸鹽緩沖液Ｎａ+ 、Ｋ+ 、Ｍ

64、ｇ2+ 離子存在下穩(wěn)定 ,對(duì)熱亦穩(wěn)定 ,可得高密度、高活性固定化酶 ,是較理想的載體材料之一。它作為固定化酶載體 ,具有原料易得、價(jià)格低廉、機(jī)械性能良好、化學(xué)性能穩(wěn)定、固定化酶效率高等優(yōu)點(diǎn)。,,藥物控釋載體 藥物控釋系統(tǒng)自 70年代以來(lái)引起了人們的廣泛興趣。一般來(lái)說(shuō)藥物載體是由高分子材料充當(dāng)?shù)?,其中包括天然高分子材料。用直接壓片法制備了阿斯匹林 殼聚糖緩釋片劑,尼莫地平 甲殼素片劑 ,研究表明甲殼素也具有一定的緩釋作用 ,是一

65、種很好的片劑輔料。,,絮凝劑 中藥藥液中的主要雜質(zhì)是蛋白質(zhì)、鞣酸、果膠等大分子物質(zhì) ,它們?cè)谥兴幩幰褐写蠖嘁阅z體形式存在。甲殼素尤其是殼聚糖能通過(guò)分子中的胺基和羥基與許多重金屬離子形成穩(wěn)定的螯合物 ,除去蛋白質(zhì)、核酸、鞣酸、果膠等大分子物質(zhì)對(duì)酚、鹵素等小分子的吸附。鞣酸為沒(méi)食子酸中羥基與糖分子中羥基縮合而成的酯類(lèi)化合物 ,它在中藥藥液中有免疫作用。殼聚糖作為絮凝劑 ,它可以與鞣酸發(fā)生靜電架橋作用 ,而使鞣酸沉淀除去。,,人工透析膜

66、 溶解在稀酸中的殼聚糖在堿溶液中擠出成型 ,同時(shí)在纖維中空部分通入氨氣或氨氣與空氣的混合氣使其內(nèi)側(cè)凝固 ,制成的中空纖維膜機(jī)械強(qiáng)度好 ,可用作人工腎的透析膜。Ｎ 己?；瘹ぞ厶悄ぞ哂辛己玫难合嗳菪浴．?dāng)膜中含分子量為 1500的聚乙烯醇致孔劑時(shí) ,Ｎ 己?；瘹ぞ厶悄さ臐B透性有較大提高 ,同時(shí)保持較好的血液相容性和強(qiáng)度 ,為人工透析膜或其他生物醫(yī)用膜提供了開(kāi)發(fā)性的材料。,,醫(yī)用敷料 甲殼素和殼聚糖都帶有一定的正電荷 ,能從血液中分離出血