凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)

1、HSXZQMXCXDSOP004（QMXYYSXKSOP004）第1頁(yè)共7頁(yè)凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)操作規(guī)程凝聚胺法交叉配血試驗(yàn)操作規(guī)程[目的目的]保證交叉配血試驗(yàn)準(zhǔn)確，確保臨床輸血安全。[適用范圍適用范圍]XXX醫(yī)院輸血科[職責(zé)職責(zé)]具有專業(yè)技術(shù)的工作人員主要負(fù)責(zé)XXX醫(yī)院輸血標(biāo)本的交叉配血試驗(yàn)，但只對(duì)該單份標(biāo)本負(fù)責(zé)。[相關(guān)文件相關(guān)文件]試劑采購(gòu)、保存和使用管理程序設(shè)備采購(gòu)、使用管理程序消毒與清潔管理程序標(biāo)本采集、運(yùn)輸、保存和報(bào)廢管理程序

2、緊急用血管理程序[相關(guān)記錄相關(guān)記錄](méi)儀器設(shè)備的采購(gòu)、使用和維護(hù)記錄儀器的溫度記錄恒溫水溫箱的換水和消毒記錄消毒液的配置記錄清潔消毒記錄試劑采購(gòu)、使用記錄標(biāo)本交接和報(bào)廢記錄交叉配血記錄緊急用血記錄[實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理]紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，以避免產(chǎn)生自發(fā)性聚集，當(dāng)紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)中時(shí)，陽(yáng)離子會(huì)被紅細(xì)胞的負(fù)電荷所吸引，此時(shí)紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞而形成Zeta電位，Zeta電位決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。凝聚胺技術(shù)首先利用低離子

3、溶液（LIM）降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的陽(yáng)離子云，以促進(jìn)紅細(xì)胞與血清（血漿）中的抗體結(jié)合。其次加入的凝聚胺（Polybrene）溶液是一種高價(jià)陽(yáng)離子多聚物、肝素中和劑，溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞的Zeta電位降低，縮短紅細(xì)胞之間的距離，使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝集。最后加入的懸浮液（Resuspending）具有中和凝聚胺（Polybrene）陽(yáng)離子的作用，使正常的紅細(xì)胞非特異性凝集散開(kāi)，試

4、驗(yàn)結(jié)果為陰性；但如果紅細(xì)胞被相應(yīng)的抗體致敏，則會(huì)被凝聚胺凝集而不會(huì)散開(kāi)，試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。[儀器器械儀器器械]玻璃試管、玻片、記號(hào)筆、一次性塑料滴管、顯微鏡、交叉配血專用離心機(jī)、試管架、恒溫水溫箱、試劑保存冰箱、標(biāo)本保存冰箱。[試劑試劑]生理鹽水、凝聚胺試劑、AntihumanIgG血清，均為有合格證件的正品。[試劑保存和穩(wěn)定性試劑保存和穩(wěn)定性]HSXZQMXCXDSOP004（QMXYYSXKSOP004）第3頁(yè)共7頁(yè)8、再滴入1滴Re

5、suspending溶液。9、用生理鹽水洗紅細(xì)胞3—5次，并把最后一次上清液完全倒干。10、滴入2滴AntihumanIgG血清，并混勻。11、用交叉配血專用離心機(jī)3400rpm離心15s.12、觀察有無(wú)凝集反應(yīng)，如果有凝集反應(yīng)，表示有AntiK抗體，則必須進(jìn)一步做抗體沖出試驗(yàn)，供血者的血液不適合病人使用。如果沒(méi)有凝集反應(yīng)，為了確保輸血的安全性，須再各添加1滴已知致敏性紅細(xì)胞至所有沒(méi)有凝集的試管中，混勻，3400rpm離心1分鐘。正常應(yīng)

6、有2反應(yīng)。如果沒(méi)有凝集反應(yīng)，可能是假陰性，輔助性抗球蛋白試驗(yàn)必須重做。[結(jié)果判斷結(jié)果判斷]1、ABO同型配血，主側(cè)和次側(cè)均無(wú)溶血及凝集表示無(wú)輸血禁忌，可以輸血。2、如急需輸血但一時(shí)無(wú)同型血液，作異型配血時(shí)（指O型血輸給A，B或AB型，或A，B型血輸給AB型時(shí)），主側(cè)無(wú)溶血及凝集，但次側(cè)必然有凝集或溶血。[質(zhì)量控制與注意事項(xiàng)質(zhì)量控制與注意事項(xiàng)]1、在進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)時(shí)，一定要嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行，每進(jìn)行一步操作，必須進(jìn)行一次核對(duì)，防止操作錯(cuò)

7、誤，尤其防止主側(cè)和次側(cè)加樣加錯(cuò)。操作方法應(yīng)按規(guī)定先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。同時(shí)，注意區(qū)別凝聚胺所引起的凝集反應(yīng)。2、受血者標(biāo)本有效期為三天；若受血者抽取標(biāo)本后，輸用過(guò)血液或血液制品，且輸用時(shí)間超過(guò)12小時(shí)的，必須重新采集標(biāo)本。2~5%紅細(xì)胞懸液要求準(zhǔn)確，必要時(shí)用生理鹽水洗滌紅細(xì)胞后重新配制。3、如果主側(cè)發(fā)生凝集反應(yīng)，說(shuō)明配血不合，不論次側(cè)配血如何都不能輸血。如果僅次側(cè)配血發(fā)生凝集反應(yīng)，只有在緊急情況下才有可能考

8、慮是否輸血。4、可以用EDTA抗凝血漿代替血清使用，不能使用溶血標(biāo)本及含有枸櫞酸鈉、肝素的抗凝血漿標(biāo)本。5、加Polybrene溶液離心去上清后不凝集，可能是標(biāo)本中含有肝素或其它干擾因子。若病人血清(血漿)含有肝素或其它干擾因子，如洗腎患者，需多加4~6滴Polybrene溶液以中和肝素或其它干擾因子。6、紅細(xì)胞懸液以3~5％為宜，過(guò)濃或過(guò)淡可使抗原抗體比例不適當(dāng)，反應(yīng)不明顯而易誤判。7、未開(kāi)封的試劑應(yīng)儲(chǔ)存于溫度在2~25℃、相對(duì)濕度不

9、大于80%、無(wú)腐蝕性氣體的環(huán)境中；已開(kāi)封的試劑應(yīng)儲(chǔ)存于相對(duì)濕度不大于80%、無(wú)腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的室溫環(huán)境中；試劑用后應(yīng)及時(shí)擰緊瓶蓋保存；未開(kāi)封試劑的有效期為兩年，在有效期內(nèi)已開(kāi)封的試劑應(yīng)在開(kāi)封后的6個(gè)月內(nèi)使用完。8、試管，滴管吸頭和玻片必須清潔干燥，防止溶血。9、離心時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，速度不宜過(guò)快或過(guò)慢，以防假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。10、各種原因引起的紅細(xì)胞溶解，易誤判為不凝集，部分溶血時(shí)，可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體。11、中國(guó)人