大蒜總皂苷提取和含量測定方法的研究

1、比色法測定大蒜總皂苷含量比色法測定大蒜總皂苷含量羅紅12劉福玉2李慧2高鈺琪2（第三軍醫(yī)大學高原醫(yī)學系：1高原軍隊衛(wèi)生學教研室，2病理生理學教研室，高原醫(yī)學教育部重點實驗室，全軍高原生理與高原病研究重點實驗室，重慶，400038）摘要：目的要：目的建立一種大蒜總皂苷含量的測定方法。方法方法以薯蕷皂苷元為對照品，香草醛冰醋酸高氯酸比色法測定大蒜總皂苷含量。結(jié)果結(jié)果對照品在1.67～13.34gml范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系回歸方程為:A

2、=0.014C0.012，(R=0.999)，平均回收率97.8%RSD=1.98%。方法學考察各項指標均符合要求。結(jié)論結(jié)論總皂苷測定方法簡單，準確性、穩(wěn)定性和重復(fù)性良好，可作為大蒜總皂苷質(zhì)量控制手段。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞:大蒜總皂苷；薯蕷皂苷元；比色法分類號：分類號：文獻標識碼：文獻標識碼：ADeterminationoftotalsaponinsinGarlicbyColimetryLuohong12Liufuyu2Lihui2Gaoyuq

3、i2（1.DepartmentofHighAltitudeMilitaryHygiene，2.DepartmentofPathophysiologyHighAltitudePhysiologyKeyLabatyOfHighAltitudeMedicineMinistryOfEducationThekeylabatyofHighAltitudePhysiologyHighAltitudediseasePLACollegeofHighAlt

4、itudeMedicineThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038China）AbstractObjectiveTodevelopamethodfcontentdeterminationoftotalsaponinsingarlic.MethodsDiosgeninwasusedasareferencesubstancevanillinperchlicacidwasappliedtod

5、eterminethecontentofsaponinsat532nm.ResultsThecalibrationcurveofdiosgeninshowedgoodlinearityintherangeof1.67～13.34gmltheregressionequationwasA=0.014C0.012，R=0.999theaveragerecoveryofcontrolcompoundis97.8%RSD=1.98%.Allthe

6、indexesofthemethodologicalinvestigationmettherequirements.ConclusionThedeterminationmethodissimplerapidsensitiveaccuratewhichcanbeusedfevaluatingtheextractionqualityoftotalsaponins.keywds：garlictotalsaponins；diosgeninCol

7、imetry大蒜在全世界普遍種植，是藥食同源植物，在人們?nèi)粘Ｉ攀持芯哂兄匾匚?。大量實驗證明，它不但有抗菌、消炎、殺蟲等作用，也有降血脂、降血壓、抗風濕、抗腫瘤、調(diào)節(jié)機體免疫力和抗氧化等多種重要生理功效[14]。大蒜成分復(fù)雜，主要有含硫有機化合物、糖類、氨基酸類、脂類、維生素、微量元素和皂苷類等多種成分。目前認為其活性成分主要是含硫有機化合物和皂苷類。大蒜中已發(fā)現(xiàn)多種皂苷，主要是呋甾皂苷和螺甾皂苷。大蒜皂苷具有降膽固醇、抗真菌、保護心血

8、管系統(tǒng)等生物活性作用[58]。然而，關(guān)于大蒜皂苷含量測定的研究很少，大蒜總皂苷含量分析方法亦未見文獻報道。本實驗以薯蕷皂苷元為對照532nm測定吸光度。以薯蕷皂苷元對照品的濃度為橫坐標吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。1.2.5穩(wěn)定性試驗精密吸取供試樣品和薯蕷皂苷元溶液各50μL，每隔10分鐘測定其吸光度。1.2.6精密度試驗精密吸取薯蕷皂苷元對照品溶液(1mgml)50μL共7份，分別測定其吸光度。1.2.7重復(fù)性試驗精密吸取供試樣品液5

9、0μL，按“1.2.3”項下方法顯色，測定吸光度，共測定同一批次樣品6份，供試品溶液制備按“1.2.1”項下方法。1.2.8回收率實驗精密吸取供試品液，精密加入一定量對照品溶液，按照樣品含量測定方法進行測定，計算加樣回收率。1.2.9樣品測定精密稱取各批號供試品適量，制備供試品溶液，依上述方法顯色，測定其吸光度，并按標準曲線法計算總皂苷含量。2結(jié)果結(jié)果2.1大蒜總皂苷含量測定方法的建立2.1.1檢識試驗表明，樣品具有發(fā)泡性、硫酸反應(yīng)和S

10、alkowski反應(yīng)均為陽性，說明樣品中含有皂苷類物質(zhì)。2.1.2測定波長的選擇對照品和供試品溶液顯色后均在532nm附近有最大吸收波長故選擇532nm為測定波長。2.1.3線性關(guān)系考察薯蕷皂苷元對照品濃度在1.67～13.34gml范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系回歸方程為:A=0.014C0.012，R=0.999。2.1.4穩(wěn)定性試驗：0.5h內(nèi)薯蕷皂苷元測定值RSD=1.17％（n=4），大蒜總皂苷提取物測定值RSD=1.26％（n

11、=4）。說明供試樣品液和對照品在0.5小時內(nèi)測定基本穩(wěn)定。2.1.5精密度試驗：RSD=0.85%(n=7)2.1.6重復(fù)性試驗RSD=1.17%（n=6）。2.1.7回收率實驗平均回收率為97.8%，RSD=1.98%。見表2。2.1.8樣品測定結(jié)果見表3。表2加樣回收實驗結(jié)果加樣回收實驗結(jié)果樣品樣品總皂苷含量(mg)加入對照品(mg)測得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)10.020080.014290.033919