實驗十四--血清膽固醇測定(膽固醇氧化酶法)

1、實驗十四實驗十四血清膽固醇測定血清膽固醇測定（膽固醇氧化酶法）（膽固醇氧化酶法）膽固醇的測定方法很多；通?？煞譃榛瘜W試劑比色法、酶法、氣相色譜法、高效液相色譜法、核素稀釋質譜法五大類?；瘜W試劑比色法中有直接法和間接法；前者可用血清直接測定，后者是用溶劑或其它方法提取膽固醇后再作定量。酶法由于操作簡便、結果準確，試劑無腐蝕性，而且因使用特異性酶，大大減少了血液中其它成分的干擾，目前已成為測定膽固醇的主要方法?！灸康哪康摹?了解膽固醇氧化酶

2、法測定血清膽固醇的原理，能進行血清膽固醇測定的操作。2.掌握血清膽固醇測定的臨床意義?！驹碓怼垦逯锌偰懝檀迹═C）包括膽固醇酯(CE)和游離型膽固醇(FC)酯型占70%，游離型占30%。膽固醇酯酶（CEH）先將膽固醇酯水解為膽固醇和游離脂肪酸（FFA），膽固醇在膽固醇氧化酶（COD）的作用下氧化生成Δ4膽甾烯酮和過氧化氫。后者經過氧化物酶（POD）催化氫與4氨基安替比林（4AAP）和酚反應，生成紅色的醌亞胺，其顏色深淺與膽固醇的含

3、量呈正比，在500nm波長處測定吸光度，與標準管比較可計算出血清膽固醇的含量。反應式如下：￡CEH￡O2?4?￡H2O2COD2H2O2￡4￡POD【器材器材】試管、吸管、試管架、微量加樣器、恒溫水浴箱、分光光度計?！驹噭┰噭棵阜y定膽固醇多采用市售試劑盒。1.酶應用液膽固醇酶試劑的組成為：pH6.7磷酸鹽緩沖液50mmolL膽固醇酯酶≥200UL膽固醇氧化酶≥100UL過氧化物酶≥3000UL4氨基安替比林0.3mmolL征、膽管阻