熒光pcr熔解曲線原理

1、熔解曲線耐藥結(jié)核檢測技術(shù)的原理及應(yīng)用隨著抗結(jié)核藥物的廣泛使用，耐多藥結(jié)核病人不斷增加。耐多藥結(jié)核病（multidrugresistanttuberculosis，MDRTB）是指至少同時對利福平（rifampin，RIF）和異煙肼（isoniazid，INH）這兩種一線抗結(jié)核藥物耐藥。傳統(tǒng)的藥物敏感實驗（Drugsusceptibilitytest，DST）時間長，不利于耐多藥結(jié)核病患者的及時診治。因此，發(fā)展一種快速檢測耐多藥結(jié)核病的分

2、子生物學(xué)檢測技術(shù)對于耐多藥結(jié)核病的早期診斷和治療十分重要。一、熔解曲線耐藥結(jié)核檢測技術(shù)的發(fā)展結(jié)核分枝桿菌利福平耐藥突變檢測試劑盒和結(jié)核分枝桿菌異煙肼耐藥突變檢測試劑盒于2013年1月獲頒國家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）醫(yī)療器械注冊證書，同時，“中國—比爾蓋茨基金會”已將該試劑盒納入該基金會2013年產(chǎn)品驗證目錄。2016年9月，SFDA批準(zhǔn)了另外三種試劑盒：“結(jié)核分枝桿菌氟喹諾酮類藥物耐藥突變檢測試劑盒”、“結(jié)核分枝桿菌鏈霉素耐藥突變

3、檢測試劑盒”和“結(jié)核分枝桿菌乙胺丁醇耐藥突變檢測試劑盒”，分別用于檢測結(jié)核分枝桿菌對氟喹諾酮類藥物、鏈霉素藥物和乙胺丁醇藥物耐藥性，可用于臨床上結(jié)核病的輔助診斷。INHahpC啟動子區(qū)（44～30以及15～3位點）、inhA94密碼子、inhA啟動子區(qū)（17～8位點）以及katG315密碼子EMBembB306、embB378380、embB406及embB497四個常見突變位點SMrpsL43、rpsL88密碼子，rrs513～517

4、位點和rrs905～908位點五、熔解曲線耐藥結(jié)核檢測的優(yōu)點①熔解曲線檢測試劑盒是目前市場上檢測項目最齊全的試劑盒，可實現(xiàn)MDR和XDR一步檢測②實驗全程采用閉管法操作，無PCR后處理，降低了擴增產(chǎn)物交叉污染的發(fā)生率[3]③檢測時間較短（在3小時內(nèi)完成），可實現(xiàn)自動判讀④可在現(xiàn)有的實時熒光定量PCR分析儀上操作，不需要昂貴的專用設(shè)備熔解曲線法與現(xiàn)有其他檢測方法相比，檢測項目更為齊全，并且可在3h左右獲得藥敏結(jié)果，適用于耐多藥結(jié)核病的快速