中國東南沿海五種擬菱形藻形態(tài)、遺傳多樣性與系統(tǒng)進化研究.pdf

1、擬菱形藻(Pseudo—nitzschia)是廣泛分布于世界各地的潛在產(chǎn)毒赤潮藻。本研究首先從我國東南沿海分離并建立擬菱形藻各個種的純種株系；然后利用光學(xué)顯微鏡、透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡對其進行形態(tài)學(xué)觀察、特征描述，并進行分類研究；再選擇核糖體SSUnrDNA、LSUnrDNA、和5.8SrDNA及轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1、ITS2)基因?qū)ζ溥M行分子生物學(xué)分析，包括基因序列差異性分析、遺傳多樣性分析和系統(tǒng)進化分析。旨在對分布于我國東南

2、沿海的擬菱形藻進行形態(tài)學(xué)分類和分子鑒定，并分析其種間、種內(nèi)、不同地理株系的地理遺傳差異性和系統(tǒng)進化關(guān)系，探明我國東南沿海主要擬菱形藻的種類和遺傳多樣性水平。主要結(jié)果如下： 1．分析了采白海南、香港、廣州、廈門、臺灣海峽和長江口等地的12株擬菱形藻。根據(jù)其形態(tài)學(xué)特征，鑒定為5個種：尖刺擬菱形藻(P．pungens)、尖細(xì)擬菱形藻(P．cuspidata)、多紋擬菱形藻(P．multistriata)和巴西擬菱形藻(P．brazil

3、iana)、柔弱擬菱形藻(P．delicatissima)。其中除巴西擬菱形藻外，其它四種均為潛在產(chǎn)毒藻。除分析了從我國東南沿海分離的擬菱形藻外，還綜合比較了來自加拿大的6株有毒多列擬菱形藻(P．mutiseries)。 2．分析了上述12株擬菱形藻基于SSUnrDNA、LSUnrDNA和5.8SrDNA及轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1、ITS2)序列的遺傳多樣性。結(jié)果表明：SSUnrDNA序列平均長度為1745bp，含有103個變異位點

4、和44個簡約信息位點；LSUnrDNA平均長度為822bp含有50個變異位點和32個簡約信息位點；5.8SrDNA及轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1、ITS2)的平均長度為729.3bp，有439(1209)個變異位點和401(1209)個簡約信息位點。總體來說，擬菱形藻的SSUnrDNA和LSUnrDNA較為保守，ITSnrDNA變異性較大。柔弱擬菱形藻(P．delicatissima)的LSUnrDNA存在較明顯的種內(nèi)差異。其他4種擬菱形藻的S

5、SUnrDNA和LSUnrDNA的種內(nèi)差異性不大。 3．通過軟件預(yù)測ITS序列的二級結(jié)構(gòu)并計算補償性堿基改變(CBCs：compensatorybasechanges)。通過對擬菱形藻的ITS—1和ITS-2二級結(jié)構(gòu)的CBCs分析表明，來自長江口和來自廈門胡里山的尖刺擬菱形藻可能存在生殖隔離。 4．在系統(tǒng)發(fā)育的研究中，從用鄰位相接法(NJ)、最大簡約法(MP)和最小進化法(ME)所構(gòu)建的系統(tǒng)進化樹來看，多列擬菱形藻和尖刺