《微生物實驗室培養(yǎng)》課件(新人教版選修1)高二

1、,是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。,一、微生物,微生物,病毒細菌放線菌真菌原生動物,,,是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱。,一、微生物,?1.分類,特點：小 簡 低,病毒的結(jié)構(gòu),?2.病毒,病 毒,,SARS冠狀病毒、 禽流感病毒,,朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）,病毒的增殖,,細菌的外形與大小,?3.細菌,A. 球菌 B. 桿菌 C. 弧菌 常見的細菌三種典型形態(tài),

2、,,A,B,C,細菌的結(jié)構(gòu),,芽孢：細菌形成的橢圓形的休眠體,芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力。　　芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。　　當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細菌。,,異養(yǎng)菌：腐生菌寄生菌 　大部分病原菌,,細菌的營養(yǎng)類型,根據(jù)細菌所利用的能源和碳源的不同，將細菌分為兩大營養(yǎng)類型?！　∽责B(yǎng)菌：,光能自養(yǎng)型：光合細菌化能自養(yǎng)型：硝化細菌，鐵細菌，硫細

3、菌,菌　落,單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時，就會形成一個肉眼可見的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體，叫做菌落?！　【涫氰b定菌種的重要依據(jù)。,?4.放線菌,⑴結(jié)構(gòu)：　單細胞原核生物　分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）,（2）繁殖,孢子絲|孢子,鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素,微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線菌產(chǎn)生的,⑶應(yīng)用:,?5.真菌,,酵母菌,酵母菌和霉菌,青霉,生 殖,腐生生活,

4、孢子生殖,微生物的實驗室培養(yǎng)條件：,,（1）合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件,（2）確保其他微生物無法混入,一. 培養(yǎng)基,1. 概念：,按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。,固體培養(yǎng)基：菌落,液體培養(yǎng)基：,表面生長,均勻混濁生長,沉淀生長,半固體培養(yǎng)基：,2. 種類：（按物理形態(tài)分）,液體培養(yǎng)基 增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基,,應(yīng)用微生物純化（分離）、鑒定、計數(shù)和菌種保存等方面,按照培養(yǎng)基用途分,選

5、擇性培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基,按照培養(yǎng)基的成分來分,合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基,,3. 成分：,思考：各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都包括哪些成分？,水、無機鹽、碳源、氮源、（生長因子）,+滿足微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的要求,C,碳源：如CO2和糖類、脂肪酸等有機物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，自養(yǎng)微生物需無機碳，異氧微生物需有機碳還能提供能量。氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽和牛肉膏、蛋白胨等，主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及

6、含氮代謝物等，無機氮源可為硝化細菌提供能量。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。,C,二. 無菌技術(shù),思考：1. 什么是無菌技術(shù)？包括哪些方面？2. 無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？（P15旁欄思考）3. 消毒和滅菌有何不同？4. 常用的消毒和滅菌方法有哪些？,無菌技術(shù)：泛指培養(yǎng)微生物操作中，所有防 止雜菌污染的方法。,無菌技術(shù)還能有效避免操作

7、者自身被微生物感染。,芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力?！　⊙挎哂中∮州p，可以隨風(fēng)飄散。　　當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細菌。,3. 常用的消毒方法：,煮沸消毒法，巴氏消毒法，紫外線或化學(xué)藥劑消毒法,常用的滅菌方法：,灼燒滅菌干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 ：100kPa 121℃ 15-30min,判斷下列各項是否需要消毒或滅菌。如需要，選擇合適方法。（1）豆?jié){

8、 （2）游泳池 （3）超凈工作臺 （4）玻棒、試管、吸管、錐形瓶 （5）培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)皿 （6）無菌水 （7）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（8）接種環(huán)、接種針（9）實驗操作者的雙手,牛奶,接種室、接種箱或超凈工作臺,接種工具，接種環(huán)、接種針或其他金屬用具,玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）,三. 實驗操作---大腸桿菌的純化培養(yǎng),（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 計算－稱量－溶化－滅菌－倒平板（二）純化大腸桿菌 最

9、常用的接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法,（冷卻至50℃）,問題討論,涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進行無菌操作？,應(yīng)從操作的各個細節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。,菌種的保存,1、臨時保藏法： 對象： 溫度： 缺點： 2、甘油管藏法： 對象：

10、 溫度：,結(jié)果分析與評價課題延伸,（P20）,頻繁使用的菌種,4℃（冰箱）,容易被污染或產(chǎn)生變異,長期保存的菌種,-20℃（冷凍箱）,接種環(huán),接種針,倒平板,討論1，2,討論3，4,,平板劃線法,討論2，3,1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？,操作的第一步灼燒接種環(huán)： 每次劃線前灼燒接種環(huán)：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)：,避免接種環(huán)上可

11、能存在的微生物污染培養(yǎng)物；,殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。,及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。,2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？,以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。,劃線后，線條末

12、端細菌的數(shù)目比線條起始處要少， 每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落,涂布器,1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 ℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？,提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。,通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)

13、基,3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？,平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高， 將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。,不要空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,選擇培養(yǎng)基,不加氮源的無氮培養(yǎng)基: