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文檔簡介
1、1維生素C發(fā)酵研究進(jìn)展摘要:生物發(fā)酵法是產(chǎn)生維生素C的主要途徑。用常壓輸送流動(dòng)相的方法為經(jīng)典液相色譜法,這種色譜法的柱效能低、分離周期長。高效液相色譜法(highperfmanceliquidchromatography),簡稱(HPLC)。是在經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種色譜方法。與經(jīng)典的液相色譜法相比,高效液相色譜法具有下列主要優(yōu)點(diǎn):①應(yīng)用了顆粒極細(xì)(一般為10m以下)、規(guī)則均勻的固定相,傳質(zhì)阻抗小,柱效高,分離效率高;②采用
2、高壓輸液泵輸送流動(dòng)相,流速快,一般試樣的分析需數(shù)分鐘,復(fù)雜試樣分析在數(shù)十分鐘內(nèi)即可完成;③廣泛使用了高靈敏檢測器,大大提高了靈敏度。目前,已經(jīng)發(fā)展了多種不同的固定相,有多種不同的分離模式,使高效液相色譜法的應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。下面介紹高效液相色譜法的有關(guān)知識(shí),新的方法和技術(shù)以及在藥物分析中的應(yīng)用。高效液相色譜法是以液體作為流動(dòng)相并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜對(duì)樣品的適用性廣不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制因而彌
3、補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中可用氣相色譜分析的約占20%而80%則需用高效液相色譜來分析。液相色譜根據(jù)分離機(jī)理的不同可分為液液分配色譜、液固吸附色譜、離子交換色譜和排斥色譜(或凝膠滲透色譜)。目前高效色譜法在天然藥物,復(fù)方藥物,手性藥物及臨床治療藥物監(jiān)測等方面應(yīng)用廣泛并有一定的發(fā)展前景。關(guān)鍵字:高效液相色譜,藥物分析,應(yīng)用高效液相色譜法也稱高壓液相色譜法。是一種高靈敏度,高效能,高選擇性,快速的分離分析方法??梢杂糜诙?/p>
4、種不同性質(zhì)的溶劑作為流動(dòng)相,且流動(dòng)相隊(duì)分離的選擇性影響很大,因此分離選擇性高。HPLC是將一定急性的單一或混合溶劑作為3料反應(yīng),所以可被分離。樣品中不同的組分因離子交換平衡常數(shù)的不同而分離。離子交換色譜的流動(dòng)相一般為一定PH值的緩沖溶液,有時(shí)也加入少量的有機(jī)溶劑,如乙醇、四氫呋喃、乙腈等,以增大組分在流動(dòng)相中的溶解度。流動(dòng)相)的PH值影響離子交換劑的交換容量。對(duì)弱酸或弱堿性的被分離組分,流動(dòng)相的PH值還會(huì)影響其電離狀況,流動(dòng)相的PH值必
5、須使待分離組分處于離解狀態(tài),才能被分離。離子交換色譜法用于分離在測定條件下呈離解狀態(tài)的組分,如具有酸性或堿性的化合物,反相離子對(duì)色譜法在藥物分析中的應(yīng)用非常廣泛,例如生物堿、磺胺類藥物、某些抗生素及維生素等的分析均可采用此方法。除此之外還有空間排阻色譜法,手性色譜法,親和色譜法等。HPLC在藥物分析中的應(yīng)用由于具有高選擇性、高靈敏度,并可同時(shí)用于有關(guān)物質(zhì)檢查與含量測定的特點(diǎn),已成為醫(yī)藥研究的有力工具。如在中草藥有效成分的分離和純度測定、
6、人工合成藥物成分的定性和定量測定、新型高效手性藥物中手性對(duì)映體含量的測定以及藥物代謝物的測定等方面都需要用到。天然藥物分析天然藥物的來源有動(dòng)物、植物和礦物之分,其中以植物類為主。由于天然藥物的化學(xué)成分復(fù)雜,其有效成分,可能有一個(gè),也可以有多個(gè),這對(duì)于控制藥品質(zhì)量,建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)來說比較困難,BCDE可通過對(duì)天然藥物的有效成分進(jìn)行分離鑒定,再測定有效成分的含量吳茱萸是蕓香科植物吳茱萸的干燥近成熟果實(shí),具有溫胃止吐、溫脾止瀉、鎮(zhèn)痛、升高體溫等
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