基于GFP標(biāo)記的鎘生物傳感器構(gòu)建及其對鎘毒性的檢測.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文利用本實驗室保存的兩株高抗重金屬的細(xì)菌為出發(fā)菌株,導(dǎo)入gfp標(biāo)記的質(zhì)粒構(gòu)建出兩株生物傳感器。研究了GFP標(biāo)記菌株的發(fā)光定量方法及其在Cd毒性檢測中的應(yīng)用,主要包括gfp標(biāo)記工程菌的構(gòu)建、熒光量與鎘離子濃度的關(guān)系和發(fā)光細(xì)菌法在Cd毒性檢測中的應(yīng)用等三個方面。結(jié)果如下: 1.以E.coli為宿主菌,構(gòu)建含有CadR-EGFP標(biāo)記的質(zhì)粒,并將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中,在培養(yǎng)基中加入不同濃度鎘進(jìn)行誘導(dǎo),當(dāng)鎘離子濃度小于0.05 mM時,

2、熒光強度隨啟動子效率增加而升高;當(dāng)鎘離子濃度在0.05 mM~0.15 mM時,熒光強度受菌體濃度和啟動子效率的雙重影響,在曲線上呈現(xiàn)先增加后下降的鐘型分布;當(dāng)鎘離子濃度大于0.15 mM時,熒光強度主要取決于細(xì)菌的濃度,當(dāng)細(xì)菌濃度達(dá)到穩(wěn)定期時,熒光強度保持不變。 2.以E.coli(pHQ21)為對象,檢測了在不同土壤固體顆粒存在的情況下,傳感器熒光量的變化情況,表明在蒙脫石和高嶺石存在情況下,傳感器熒光強度下降80%,針鐵

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