1.假性維生素d缺乏性佝僂病患者25羥維生素d1α羥化酶基因突變研究;2.sip1對成骨細胞特異轉(zhuǎn)錄因子cbfa1基因表達的影響及其在bmp2信號傳導通路中的作用

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學;中國醫(yī)學科學院碩士學位論文1.假性維生素D缺乏性佝僂病患者25-羥維生素D-1α-羥化酶基因突變研究;2.SIP1對成骨細胞特異轉(zhuǎn)錄因子Cbfa1基因表達的影響及其在BMP2信號傳導通路中的作用姓名：龐莉申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學內(nèi)分泌指導教師：夏維波;龔鳳英20070701中國協(xié)和醫(yī)科大學碩士研究生論文鋪板培養(yǎng)后挑取陽性克隆菌落，進一步培養(yǎng)，提取質(zhì)粒后進行單克隆測序。結(jié)果：1 ．1 | 缶床資料：3 例患者均具有

2、明顯的佝僂病癥狀、體征和x 線表現(xiàn)，如低鈣血癥、高磷血癥，高P T H 血癥和血堿性磷酸酶( A L P ) 水平顯著升高。除了3例患者外的家系成員的血鈣、磷和A L P 均屬正常。2 ．測序突變檢測結(jié)果：對C Y P 2 7 8 1 基因P C R 產(chǎn)物測序研究表明：在這3 個家系中共發(fā)現(xiàn)4 種遺傳變異，其中包括1 個錯義突變和3 個移碼突變。患幾1的C Y P 2 7 8 1 基因1 號外顯子存在上5 7 位密碼子( c 1 7 0

3、 G > T ) 發(fā)生了G G G —G T G 的變異，由甘氨酸變?yōu)槔i氨酸( G —V ) ，8 號外顯子存在4 4 2 密碼子( c 1 3 2 5 —1 3 3 2 i n s C C C A C C C ) 第二位C 后有C C C A C C C 7 b p 插入，造成了移碼變異，使其后編碼的氨基酸發(fā)生了變異，并于4 6 6 位出現(xiàn)了終止密碼子U A G ，比正常序列缺失了4 3 個密碼子，以上兩個突變分別在患兒的父母等

4、家系成員中得到證實?；純? 的C Y P 2 7 B I 基因變異與患兒1 相同?；純?C Y P 2 7 8 1基因的8 號外顯子4 3 7 位氨基酸密碼子G G G 中缺失了一個G ( c 1 3 1 0 d d G ) ，之后序列出現(xiàn)移碼突變，并于4 6 0 位出現(xiàn)終止密碼子U A A ，提前終止，缺失了3 6 個氨基酸( A G ) 。在第9 外顯子上4 8 1 位氨基酸G A G 第二位A 缺失( c 1 4 4 2 d e

5、l A ) 造成移碼突變，同時使編碼的氨基酸不能正常終止于5 0 9 密碼子，增加了3 0 個氨基酸，最終終止于5 3 9 位( △A ) 。3 ．P A G E 膠電泳檢測結(jié)果：出現(xiàn)移碼突變的外顯子P C R 產(chǎn)物經(jīng)p a g e 膠電泳后，分別在患者和其父系或母系其中一方親屬P C R 標本中發(fā)現(xiàn)了異常片段，支持測序結(jié)果。4 ．克隆測序結(jié)果：上述3 個移碼突變P C R 擴增片段經(jīng)克隆測序后進一步證實了患者1 和2C Y P 2 7

6、 8 18 號外顯子7 b p 插入( c 1 3 2 5 —1 3 3 2 i n sC C C A c c c ) ，患者3 ∞筍磐冶，8 號和9 號外顯子上分別存在一個堿基缺失，與測序結(jié)果相符( c 1 3 1 0 d d G 和C 1 4 4 2 d e l A ) 。結(jié)論：1 ．本研究在國內(nèi)首次對P D D R 患者C Y P 2 7 8 1 基因進行了突變研究分析，在3 例患者P D D R 患者中存在C Y P 2 7 8