gas對巨噬細胞株raw264.7功能的影響

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文GAS對巨噬細胞株RAW264.7功能的影響姓名：胡光磊申請學位級別：碩士專業(yè)：免疫學指導教師：魏林20090301中文摘要2 以低菌量、中等菌量和高菌量G A S 刺激細胞9 0 m i n 時，通過透射電子顯微鏡觀察R A W 2 6 4 ．7 超微結構的變化，利用T U N E L 和A N N E X I NV - F I T C 細胞凋亡檢測試劑盒檢測細胞凋亡情況。3 分別用G A S 、大腸桿菌和金黃

2、色葡萄球菌以M O I 為5 ：1 時刺激巨噬細胞9 0 m i n ，作用完畢繼續(xù)培養(yǎng)三天，行流式細胞術檢測R A W 2 6 4 ．7 細胞表面C D 8 0 、C D 8 6 、M H C ．I I 的表達情況；應用R e a l ．t i m e ．P C R 檢測不同刺激組R A W 2 6 4 ．7 細胞的I L ．1 、I L ．6 、I L ．2 3 、T N F ．Q 、T G F ．B 等炎性細胞因子的轉錄水平變化，

3、并通過E L I S A 檢測刺激后細胞分泌I L ．6 的變化。4R e a l ．t i m e —P C R 法檢測低菌量G A S 束I J 激小鼠三天后，腹腔巨噬細胞及脾臟表達I L ．1 、I L ．6 、I L ．2 3 、T N F ．Q 、T G F ．1 3 的變化。結果：1M T T 結果顯示，低、中菌量G A S 對R A W 2 6 4 ．7 細胞增殖有促進作用，高菌量G A S 對細胞增殖有抑制作用。2 通過

4、透射電子顯微鏡觀察：低菌量細菌刺激細胞時，R A W 2 6 4 ．7 細胞的細胞器發(fā)達，功能旺盛，線粒體水腫，粗面內(nèi)質網(wǎng)變粗糙；中劑量刺激時，細胞器發(fā)達，有髓樣溶酶體結構，提示細胞吞噬消化細菌不完全；高菌量刺激細胞時，細胞出現(xiàn)空泡，核膜不完整等細胞壞死表象。3T U N E L 法和A N N E X I N V ．F I T C 法結果均顯示：高菌量刺激R A W 2 6 4 ．7 時，細胞數(shù)減少是由于細胞壞死而不是凋亡。4 半定量