daintain在巨噬細(xì)胞raw264.7中的功能研究

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文Daintain在巨噬細(xì)胞RAW264.7中的功能研究姓名：顏冬菁申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳正望2011-04-23II華 中 科 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文 pGL3-Basic-DT(-595_+59)。Daintain 基因啟動(dòng)子的熒光素酶報(bào)告載體為進(jìn)一步研究Daintain 轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用提供了載體資源。 5) 通過檢測(cè)熒光素酶活性

2、，發(fā)現(xiàn) E2 對(duì)載體 pGL3-Basic-DT(-1572_+59)具有激發(fā)活性。 5’端剪切 Daintain 基因啟動(dòng)子后， 發(fā)現(xiàn) E2 對(duì)載體 pGL3-Basic-DT(-1286_+59)活性最大，而對(duì)載體 pGL3-Basic-DT(-794_+59)和 pGL3-Basic-DT(-595_+59)沒有活性。說明 Daintain 基因啟動(dòng)子區(qū)-1286 bp 至+59 bp 內(nèi)含有 E2 調(diào)節(jié)的活性區(qū)域。 Dainta

3、in 組成性地表達(dá)于單核巨噬細(xì)胞中， 但其對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響未研究清楚。本文第二部分研究過表達(dá) Daintain 對(duì) RAW264.7 細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響，及其對(duì) LPS 誘導(dǎo) RAW264.7 細(xì)胞的吞飲能力和抗原遞呈表型變化的影響。已取得的主要研究結(jié)果如下： 1) 成功建立真核穩(wěn)定轉(zhuǎn)染過表達(dá) Daintain 的 RAW264.7 細(xì)胞株。 2) 發(fā)現(xiàn)過表達(dá) Daintain 促進(jìn) RAW264.7 細(xì)胞更多的進(jìn)入 S 期，

4、G1 期細(xì)胞減少，進(jìn)而加快細(xì)胞周期，促進(jìn)細(xì)胞增殖。 3) 發(fā)現(xiàn)過表達(dá) Daintain 可能通過促進(jìn) LPS 誘導(dǎo) RAW264.7 細(xì)胞中 NF-кB 活性的增強(qiáng)， 進(jìn)而促進(jìn)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞的吞飲能力， 以及促進(jìn)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞向樹突狀細(xì)胞形態(tài)的分化，促進(jìn)表面抗原分子 MHCⅡ和 CD86 的上膜量。 以上研究表明 E2 對(duì)通過調(diào)節(jié)基因啟動(dòng)子活性來調(diào)節(jié) Daintain 的表達(dá)；Daintain促進(jìn) RAW