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文檔簡介
1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文內(nèi)體成熟障礙對(duì)LPS在RAW264.7細(xì)胞的內(nèi)化以及對(duì)細(xì)胞活化的影響姓名:李宇寧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師:鄭江20090501第二軍醫(yī)人學(xué)碩十學(xué)位論文結(jié)果( 1 ) 使用F I T C 標(biāo)記L P S ,經(jīng)超濾方法純化后,標(biāo)記效率為3 3 .1 3 m o l F I T C /m o l L P S ,激光掃描共聚焦顯微鏡下觀察示蹤效果好于商業(yè)化試劑,可以用于本課題L P S 示蹤。( 2
2、 ) 使用激光共聚焦顯微鏡檢測F I T c .D x t r a I l 熒光值,根據(jù)C Q 濃度與p H 的對(duì)應(yīng)關(guān)系,觀察到隨著C Q 濃度增加內(nèi)體p H 升高,并呈現(xiàn)明顯的線性關(guān)系,其中,C Q 在濃度為2 0 u g /n l l 時(shí)將內(nèi)體p H 作用到p H 5 .0 7 。( 3 ) C Q 的細(xì)胞毒性濃度為3 0 u g /皿,此范圍內(nèi),梯度濃度的C Q 預(yù)處理R A w 2 6 4 .7 細(xì)胞細(xì)胞之后,L P s 在胞內(nèi)
3、的聚集隨著C Q 的濃度增加而增加,該結(jié)果與利用尼日利亞菌素一梯度p H 緩沖液調(diào)節(jié)內(nèi)體p H 后,L P S 在胞內(nèi)的聚集情況結(jié)果一致。( 4 ) 經(jīng)C Q 預(yù)處理的R A w 2 6 4 .7 細(xì)胞,在L P S 刺激作用下,T N F —Q 和I L .6 的釋放與C Q 濃度成負(fù)相關(guān),表明內(nèi)體成熟障礙對(duì)L P S 刺激的細(xì)胞活化具有抑制作用。結(jié)論( 1 ) 用F I T C 成功標(biāo)記L P S ,解決了L P S 示蹤無商品試劑
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