內體成熟障礙對lps在raw264.7細胞的內化以及對細胞活化的影響

1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文內體成熟障礙對LPS在RAW264.7細胞的內化以及對細胞活化的影響姓名：李宇寧申請學位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗診斷學指導教師：鄭江20090501第二軍醫(yī)人學碩十學位論文結果( 1 ) 使用F I T C 標記L P S ，經超濾方法純化后，標記效率為3 3 ．1 3 m o l F I T C ／m o l L P S ，激光掃描共聚焦顯微鏡下觀察示蹤效果好于商業(yè)化試劑，可以用于本課題L P S 示蹤。( 2

2、 ) 使用激光共聚焦顯微鏡檢測F I T c ．D x t r a I l 熒光值，根據C Q 濃度與p H 的對應關系，觀察到隨著C Q 濃度增加內體p H 升高，并呈現明顯的線性關系，其中，C Q 在濃度為2 0 u g ／n l l 時將內體p H 作用到p H 5 ．0 7 。( 3 ) C Q 的細胞毒性濃度為3 0 u g ／皿，此范圍內，梯度濃度的C Q 預處理R A w 2 6 4 ．7 細胞細胞之后，L P s 在胞內

3、的聚集隨著C Q 的濃度增加而增加，該結果與利用尼日利亞菌素一梯度p H 緩沖液調節(jié)內體p H 后，L P S 在胞內的聚集情況結果一致。( 4 ) 經C Q 預處理的R A w 2 6 4 ．7 細胞，在L P S 刺激作用下，T N F —Q 和I L ．6 的釋放與C Q 濃度成負相關，表明內體成熟障礙對L P S 刺激的細胞活化具有抑制作用。結論( 1 ) 用F I T C 成功標記L P S ，解決了L P S 示蹤無商品試劑