氯化鈷和脂多糖對巨噬細胞raw264.7表達hif1α和tgfβ1的影響

1、蘇州大學碩士學位論文氯化鈷和脂多糖對巨噬細胞RAW264.7表達HIF-1α和TGF-β1的影響姓名：張建斌申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：謝可鳴;謝平20100501A b s t r a c t S t u d i e s o nE f f e c to f C o b a l t C h l o r i d ea n d L i p o p o l y s a c c h a r i d eO nH I F -

2、 Ia a n d T G F - B 1 E x p r e s s i o ni nM a c r o p h a g e sR A W 2 6 4 7S t u d i e s o nE f f e c to f C o b a l t C h l o r i d e a n dL i p o p o l y s a c c h a r i d e o nH I F ·- l a a n d T G F - - p lE

3、 x p r e s s i o ni nM a c r o p h a g e sR A W 2 6 4 ．7A b s t r a c tO b j e c t i v e ：T oi n v e s t i g a t et h ee f f e c to f c o b a l tc h l o r i d eo rL P S a n di t sm e c h a n i s mo n H I F - l a a n dT G

4、 F - 1 3 1 e x p r e s s i o n i nm a c r o p h a g e sR a w 2 6 4 ．7 ．M e t h o d s ：M a c r o p h a g e sR a w 2 6 4 ．7w e r ed i v i d e di n t of o u rg r o u p s ：g r o u p 1 w a si n c u b a t e d 淅t l l L P S ( 1

5、I - t g ／m 1 ) ，g r o u p2i n c u b a t e d 謝t l lC O C l 2 ( 1 0 0I _ t m o l ／L ) ，g r o u p3 w i t hC O C l 2 ( 1 0 0l a m o l ／L ) f o l l o w e db yc u l t m ' e 、Ⅳi t l lL P S ( 1 } t g ／m 1 ) ．a(chǎn) n dc o n t r o

6、 lg r o u p 、麗t I lP B S ．T h em R N A e x p r e s s i o no fH I F - l a ，V E G F a n dT G F - p l i nt h ec e l l sw a sm e a s u r e db yR T - P C R ．T h ep r o t e i ne x p r e s s i o no fb o t hH I F —l a ，V E G Fa

7、n dT G F ·8 1 w a sd e t e c t e db yi m m u n o c y t o c h e m i s t r y ．R e s u l t s ：( 1 ) C o m p a r e d 謝t l lt h e c o n t r o lg r o u p ，t h ee x p r e s s i o n l e v e l so fH I F - l am R N A o f g r

8、o u p 2a n dg r o u p 3w e r ee l e v a t e dw h i l et h ee x p r e s s i o nl e v e l so fV E G Fm R N Aa n dp r o t e i n ，H I F - l ap r o t e i no ft h e 1s t 、2 n da n d3 r d g r o u p s w e r e h i g h e r ．I nc o

9、 n t r a s tt o 1s t g r o u p ，2 n d g r o u p ’S e x p r e s s i o nl e v e l o fH I F - l am R N A W a so b v i o u sh i g h e r w h i l et h e l e v e l s o fH I F - l a o r V E G F m R N A a n dp r o t e i n o f3 r

10、d g r o u p W a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e r ．C o m p a r et o2 n dg r o u p ’S ，t h e3 r dg r o u p ’St h o s eo fV E G F m R N A a n dp r o t e i n ，H I F —l a p r o t e i nw e r eu p - r e g u l a t e d ．( 2

11、) C o m p a r e dw i t hc o n t r o lg r o u p ，t h e 1s tg r o u p ’S e x p r e s s i o nl e v e l so fT G F - 8 1 m R N A a n dp r o t e i n w e r eo b v i o u sl o w e rw h i l et h e2 n d g r o u p ’Se x p r e s s i

12、o nl e v e l sw e r es i g n i f i c a n t l yh i g h e r ，b u tt h e3 r dg r o u p ’S e x p r e s s i o nl e v e lW a s n o t a l t e r e d ．C o n c l u s i o n s ：I nn o r m o x i ce n v i r o n m e n t ，L P Sc o u l d

13、d o w n —r e g u l a t et h e e x p r e s s i o nl e v e l o fT G F - 1 3 1 o fm a c r o p h a g e s R a w2 6 4 ．7 b yt r a n s c r i p t i o n m e c h a n i s m ．H y p o x i ai n d u c e db yC o C l 2c o u l di n c r e

14、a s et h ee x p r e s s i o nl e v e l so f H I F - l a 、V E G F a n dT G F - 8 1m R N A o rp r o t e i n ．L P Si nt h es t a t eo f i n t r a c e l l u l a rh y p o x i aC a n s i g n i f i c a n t l yi n c r e a s et h