crpoxldlβ2gpi復合物對raw264.7巨噬細胞吞噬脂質的影響

1、分類號：R 5 8 7 ．1密 級：學位類別： 科學學位口 專業(yè)學位團0學校代碼：100 62學 號：2 0 1 0 6 0 2 5 9 8學科門類：醫(yī)學又坪鼉科袁號碩士學位論文M L A S T E R ’S D I S S E R T A T I o N論文題目：C R P ／o x L D L ／I B 2 ．G P I 復合物對R A W 2 6 4 ．7巨噬細胞吞噬脂質的影響T IT L ．E E f f e c t so f

2、 C R P ／o x L D L ／[ 1 2 一G P I c o m p l e x e s o n l i p i dp h a g o c y t o s i s f u n c t i o ni nR A W 2 6 4 ．7 m a c r o p h a g e s一級學科：臨床醫(yī)學二級學科：內科學內分泌與代謝病論文作者：馮美俊指導教師：于德民教授導師組成員：于琨 主任醫(yī)師天津醫(yī)科大學研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學碩

3、士學位論文中文摘要目的：糖尿病，特別是2 型糖尿病，是心血管疾病進展的獨立危險因素。8 0 ％的糖尿病病人死于心血管并發(fā)癥，平均壽命降低約1 0 年。糖尿病病人體內的o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復合物，C R P ／o x L D L 復合物，C R P ／o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復合物水平明顯高于正常人，且C R P ／o x L D L 復合物，C R P ／o x L D L ／1 3

4、2 ．G P I 復合物在糖尿病合并動脈粥樣硬化病人的血清中明顯升高。為了明確復合物對動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的影響，擬以C R P ／o x L D L 復合物，o x L D L ／[ 3 2 ．G P I 復合物，C R P ／o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復合物干預小鼠巨噬細胞，觀察巨噬細胞內總膽固醇的堆積情況并探索其相關作用機制。方法：以R A W 2 6 4 ．7 小鼠巨噬細胞為研究對象，分別給予對照，8 0

5、u g ／m l o x L D L ，8 0 u g ／m l C R P ，8 0 u g ／m l B 2 一G P I ，8 0 u g ／m l C R P ／o x L D L 復合物 ，8 0 u g ／m lo x L D L ／1 3 2 ．G P I 復合物，8 0 u g ／m lC R P ／o x L D L ／p 2 ．G P I 的復合物干預2 4 小時，形態(tài)學上通過油紅O 染色觀察巨噬細胞對脂質的吞噬；并

6、通過細胞內總膽固醇試劑盒測定各組細胞內總膽固醇的含量；通過實時定量P C R 法檢測A 類清道夫受體( S R A ) ，B 類清道夫受體( C D 3 6 ) ，B 類清道夫受體I 型( S R ．B I ) 和A T P結合盒轉運子A I ( A B C A l ) 這些脂質吞噬相關基因m R N A 的表達；W e s t e r nb l o t法檢測M A P K 通路中p 3 8 M A P K 和E R K 的表達。結果：

7、1 ．油紅O 染色結果：給予o x L D L 干預2 4 小時后，o x L D L 組中巨噬細胞內紅色明顯，細胞成泡沫狀，表明脂質在細胞內堆積，泡沫細胞模型成功；C R P ／o x L D L復合物組，o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復合物組，C R P ／o x L D L ／1 3 2 一G P I 復合物組均有泡沫細胞形成。與o x L D L 組比較，C I 沖／o x L D L 組中油紅染色紅色更加明顯

8、，細胞內堆積的脂滴更多；o x L D L ／p 2 ．G P I 組與o x L D L 組相比細胞內的紅色明顯減少，可見細胞內脂質堆積量減少； C R P ／o x L D L ／1 3 2 ．G P I 組細胞內的紅色與o x L D L 組比較變化不明顯，脂質堆積量無明顯差異，但細胞數有所減少。2 ．細胞內總膽固醇試劑盒測量結果：與對照組相比，o x L D L 組細胞內總膽固醇明顯增加，其含量是對照組的1 ．9 9 倍( 尸&