crpoxldlβ2gpi復(fù)合物對(duì)raw264.7巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)的影響

1、分類(lèi)號(hào)：R 5 8 7 ．1密 級(jí)：學(xué)位類(lèi)別： 科學(xué)學(xué)位口 專(zhuān)業(yè)學(xué)位團(tuán)0學(xué)校代碼：100 62學(xué) 號(hào)：2 0 1 0 6 0 2 5 9 8學(xué)科門(mén)類(lèi)：醫(yī)學(xué)又坪鼉科袁號(hào)碩士學(xué)位論文M L A S T E R ’S D I S S E R T A T I o N論文題目：C R P ／o x L D L ／I B 2 ．G P I 復(fù)合物對(duì)R A W 2 6 4 ．7巨噬細(xì)胞吞噬脂質(zhì)的影響T IT L ．E E f f e c t so f

2、 C R P ／o x L D L ／[ 1 2 一G P I c o m p l e x e s o n l i p i dp h a g o c y t o s i s f u n c t i o ni nR A W 2 6 4 ．7 m a c r o p h a g e s一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：內(nèi)科學(xué)內(nèi)分泌與代謝病論文作者：馮美俊指導(dǎo)教師：于德民教授導(dǎo)師組成員：于琨 主任醫(yī)師天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩

3、士學(xué)位論文中文摘要目的：糖尿病，特別是2 型糖尿病，是心血管疾病進(jìn)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。8 0 ％的糖尿病病人死于心血管并發(fā)癥，平均壽命降低約1 0 年。糖尿病病人體內(nèi)的o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復(fù)合物，C R P ／o x L D L 復(fù)合物，C R P ／o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復(fù)合物水平明顯高于正常人，且C R P ／o x L D L 復(fù)合物，C R P ／o x L D L ／1 3

4、2 ．G P I 復(fù)合物在糖尿病合并動(dòng)脈粥樣硬化病人的血清中明顯升高。為了明確復(fù)合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的影響，擬以C R P ／o x L D L 復(fù)合物，o x L D L ／[ 3 2 ．G P I 復(fù)合物，C R P ／o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復(fù)合物干預(yù)小鼠巨噬細(xì)胞，觀察巨噬細(xì)胞內(nèi)總膽固醇的堆積情況并探索其相關(guān)作用機(jī)制。方法：以R A W 2 6 4 ．7 小鼠巨噬細(xì)胞為研究對(duì)象，分別給予對(duì)照，8 0

5、u g ／m l o x L D L ，8 0 u g ／m l C R P ，8 0 u g ／m l B 2 一G P I ，8 0 u g ／m l C R P ／o x L D L 復(fù)合物 ，8 0 u g ／m lo x L D L ／1 3 2 ．G P I 復(fù)合物，8 0 u g ／m lC R P ／o x L D L ／p 2 ．G P I 的復(fù)合物干預(yù)2 4 小時(shí)，形態(tài)學(xué)上通過(guò)油紅O 染色觀察巨噬細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)的吞噬；并

6、通過(guò)細(xì)胞內(nèi)總膽固醇試劑盒測(cè)定各組細(xì)胞內(nèi)總膽固醇的含量；通過(guò)實(shí)時(shí)定量P C R 法檢測(cè)A 類(lèi)清道夫受體( S R A ) ，B 類(lèi)清道夫受體( C D 3 6 ) ，B 類(lèi)清道夫受體I 型( S R ．B I ) 和A T P結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A I ( A B C A l ) 這些脂質(zhì)吞噬相關(guān)基因m R N A 的表達(dá)；W e s t e r nb l o t法檢測(cè)M A P K 通路中p 3 8 M A P K 和E R K 的表達(dá)。結(jié)果：

7、1 ．油紅O 染色結(jié)果：給予o x L D L 干預(yù)2 4 小時(shí)后，o x L D L 組中巨噬細(xì)胞內(nèi)紅色明顯，細(xì)胞成泡沫狀，表明脂質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)堆積，泡沫細(xì)胞模型成功；C R P ／o x L D L復(fù)合物組，o x L D L ／1 3 2 ．G P I 復(fù)合物組，C R P ／o x L D L ／1 3 2 一G P I 復(fù)合物組均有泡沫細(xì)胞形成。與o x L D L 組比較，C I 沖／o x L D L 組中油紅染色紅色更加明顯

8、，細(xì)胞內(nèi)堆積的脂滴更多；o x L D L ／p 2 ．G P I 組與o x L D L 組相比細(xì)胞內(nèi)的紅色明顯減少，可見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積量減少； C R P ／o x L D L ／1 3 2 ．G P I 組細(xì)胞內(nèi)的紅色與o x L D L 組比較變化不明顯，脂質(zhì)堆積量無(wú)明顯差異，但細(xì)胞數(shù)有所減少。2 ．細(xì)胞內(nèi)總膽固醇試劑盒測(cè)量結(jié)果：與對(duì)照組相比，o x L D L 組細(xì)胞內(nèi)總膽固醇明顯增加，其含量是對(duì)照組的1 ．9 9 倍( 尸&