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1、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文學(xué)校代碼:1 0 0 2 3學(xué) 號:$ 2 0 1 3 0 0 5 0 5 7碩士學(xué)位論文不同佐劑與惡性瘧疾疫苗M .R C A g 一1 相配伍后的免疫原性研究所 院 :姓 名 :指導(dǎo)教師:導(dǎo)師小組:學(xué)科專業(yè):研究方向:完成日期:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院張佳佳王恒教授劉力、許雪梅病原生物學(xué)蛋白質(zhì)疫苗2 0 1 6 年5 月北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文不同佐劑與惡性瘧疾疫苗M .R C A g .1 相
2、配伍后的免疫原性研究張佳佳( 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所,北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院,1 0 0 0 0 5 北京)中文摘要瘧疾作為世界三大傳染病之一仍然嚴(yán)重威脅著人類的健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì),2 0 1 5 年在全球大約有3 2 億人( 約占世界總?cè)? 3 的一半) 面臨著感染瘧疾的風(fēng)險(xiǎn),其中大約有2 .1 4 億人患病, 4 3 .8 萬人死亡。近幾年,由于瘧原蟲耐藥性蟲株的不斷出現(xiàn),以及介導(dǎo)瘧原蟲傳播的蚊媒對殺蟲劑逐漸產(chǎn)生抗性,使
3、得一些傳統(tǒng)的針對惡性瘧疾的防控措施和手段都面臨著嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。對于控制和消除瘧疾最有希望和最有效的工具就是引進(jìn)一種高度有效的瘧疾疫苗。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,惡性瘧原蟲紅內(nèi)期疫苗多種候選抗原單獨(dú)或簡單的聯(lián)合使用時(shí),其免疫效果并不理想,因此構(gòu)建多抗原多表位的重組蛋白疫苗成為紅內(nèi)期瘧疾疫苗研究的方向之一。本課題組前期通過“表位重組”技術(shù)構(gòu)建了瘧原蟲隨機(jī)重組抗原.1 ( m a l a r i a r a n d o mc o n s t r u c
4、 t e da n t i g e n .1 ,M .R C A g .1 ) ,將其作為惡性瘧疾紅內(nèi)期多表位人工隨機(jī)重組蛋白抗原M .R C A g .1 在B A L B /c 小鼠、新西蘭兔、非人靈長類動(dòng)物模型中證實(shí)其具有良好的免疫原性和體內(nèi)外免疫保護(hù)性,顯示其具有研發(fā)前景。通過與中國科學(xué)院過程工程研究所的合作,己研發(fā)出穩(wěn)定的純化工藝,建立了穩(wěn)定簡便可行的中試規(guī)模制備工藝。本研究在前期工作基礎(chǔ)上選用了在臨床上經(jīng)常用于治療骨質(zhì)疏松的
5、藥物.雙性膦酸鹽.A L D 、Z L D 和P M D 與M .R C A g .1 相配伍,并在B A L B /c 小鼠模型和新西蘭兔體內(nèi)評價(jià)其免疫效果,進(jìn)而篩選出最佳佐劑和免疫劑量,為今后進(jìn)行的M .R C A g .1的臨床前研究奠定基礎(chǔ)。目前主要取得以下進(jìn)展:1 .從與M .R C A g .1 以不同劑量和不同免疫方式相配伍的雙性膦酸鹽免疫B A L B /c 小鼠,確定佐劑Z L D ( 0 .0 5 m g s .C
6、.) 組為最佳配伍劑量組。并通過免疫新西蘭兔,獲得瘧原蟲體外生長抑制率最高達(dá)7 6 .7 %。2 .從與M .R C A g .1 以不同劑量相配伍的1 5 t 服佐劑A L D 免疫B A L B /c 小鼠,確定A L D ( 0 .1 m g ) 組為最佳配伍劑量組。并通過免疫新西蘭兔,獲得瘧原蟲體外生長抑制率最高達(dá)4 8 .6 %。3 .從與M .R C A g .1 以不同劑量相配伍的Z L D 和M F 5 9 聯(lián)合免疫B
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