頭孢哌酮和哌拉西林與β內(nèi)酰胺酶抑制劑復方對產(chǎn)酶e.coli和k.pneumonia的抗菌活性及其后效應的研究

1、南京醫(yī)科大學碩士學位論文頭孢哌酮和哌拉西林與β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復方對產(chǎn)酶E.coli和K.pneumonia的抗菌活性及其后效應的研究姓名：倪芳申請學位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗診斷學指導教師：童明慶20050418南京醫(yī)科大學碩七學位論文目的測定頭孢哌酮和哌拉西林與克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦三種6 ．內(nèi)酰胺酶抑制劑的不同復方制劑的抗菌活性，探索每種組合抗生素與酶抑制劑的最佳比例；繪制每種組合的殺菌曲線，借此確定各自的最低飽和殺菌濃度和判

2、斷它們對于時間或濃度的依賴性；檢測每種組合的P A E 、P L I E 和P A S M E ，并與單方作比較，分析復方制劑的持續(xù)效應在臨床給藥方面的應用價值。材料與方法所用藥物包括：頭孢哌酮、哌拉西林、克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦。實驗菌株包括：產(chǎn)T E M ．1 酶的大腸埃希菌A T C C 3 5 2 1 8 、產(chǎn)E S B L的肺炎克雷伯菌A T C C 7 0 0 6 0 3 和不產(chǎn)酶的大腸埃希菌A T C C 2 5 9 2

3、 2 。菌懸液的制備：先將實驗菌株3 5 ℃肉湯培養(yǎng)2 , q S h 后，用V I T E X 比濁儀比濁，然后肉湯稀釋至濃度1 0 6 ～1 0 7 C F U ／m L 。以標準肉湯二倍稀釋法測定抗菌藥的M I C 。P A E 、P L I E 、P A S M E 測定時菌液與抗生素的接觸時問為2 h ，抗生素濃度為1 0 ×M I C ，采用洗滌法去除抗菌藥；其中，洗滌后在P A E 測定管中加入的是無藥肉湯，在P

4、 L I E 測定管中加入的是洗滌前頭孢哌酮或哌拉西林單方的濃度，而在P A S M E 測定管中加入的濃度是復方的0 ．1 x M I C ( T 1 ) 、O ．2 x M I C ( T 2 ) 、O ．3 x M I C ( T 3 ) ；對照管做相應處理：P A E 對照管一直未加藥，P L I E 的對照在離心前后的藥物一直是與復方相同濃度的單方，P A S M E 的對照于離心前不加藥，離心后加入復方制劑，使其終濃度分別為

5、O ．1 ×M I C ( C 1 ) 、0 - 2 ×M I C ( C 2 ) 、o ．3 x M I C ( C 3 ) 。所有培養(yǎng)物均置3 5 “ C 孵育，在孵育過程中，每小時取出1 0 0 皿培養(yǎng)物傾注瓊脂，3 5 。C 培養(yǎng)2 4 h ；以菌落計數(shù)法測定P A E 、P L I E 、P A S M E 的值；以菌落數(shù)C F U ／m L 的對數(shù)為縱坐標，以孵育時間為橫坐標繪制細菌生長曲線( 以離心去除

6、藥物后再培養(yǎng)開始時為零點) ；用回歸分析擬合生長曲線，取R 2 最接近1 的回歸方程，分別計算T 和C 管中細菌增加1 個l o g l o ( C F U ／m L ) 所需的時間。設定P A E = T _ C 、P L I E = T - C 、P A S M E l = T l - C 1 、P A S M E z = T 2 - C 2 、P A S M E 3 _ T 3 ．C 3 ；其中T 是試驗管中的菌落數(shù)自零點增長1