天然β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的篩選研究.pdf

1、β-內(nèi)酰胺酶是病原菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥的主要機(jī)制，尤其是超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生導(dǎo)致該類抗菌藥物在臨床上治療感染的療效下降甚至失效，目前研發(fā)β-內(nèi)酰胺酶抑制劑是解決這一耐藥機(jī)制的一種有效途徑。
　　本研究首先采用微量肉湯稀釋法測(cè)定采自貴州不同地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)的482株大腸桿菌對(duì)9種β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物的敏感性，其次采用PCR法和凝膠電泳法檢測(cè)482株大腸桿菌所攜帶的表達(dá)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（Extended-Spectrumβ-

2、Lactamases，ESBL）的四種耐藥基因情況，再次采用紫外分光光度法測(cè)定15種中藥單體對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的抑制作用；最后采用微量肉湯稀釋法和平板計(jì)數(shù)法測(cè)有效中藥單體對(duì)產(chǎn)ESBL大腸桿菌的增敏作用，試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、482株豬源大腸桿菌對(duì)9種抗菌藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥，其中氨芐西林的耐藥率最高，為86.72％；氨曲南的耐藥率最低，為38.38%；五重、四重和六重耐藥菌株數(shù)相對(duì)較多，分別為124株、105株和95株；各個(gè)地區(qū)

3、大腸桿菌菌株耐藥情況存在一定的差異。
　　2、482株豬源大腸桿菌中，TEM，OXA-1，CTX-M-1和SHV基因的總檢出率分別為59.13%，46.89%，32.57%和41.70%；其中20株同時(shí)檢測(cè)出四種目的基因，90株同時(shí)檢測(cè)出三種基因，175株同時(shí)檢測(cè)出兩種基因，166株僅檢測(cè)出TEM基因，31株大腸桿菌未檢測(cè)出這四種目的基因。
　　3、15種中藥單體中，有七種能抑制β-內(nèi)酰胺酶，且其抑制作用隨其濃度的增大逐漸增

4、強(qiáng)。在濃度為10μg/mL時(shí)，蘆薈大黃素、苦參堿和香紫蘇醇與克拉維酸相比對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的抑制作用無(wú)顯著性差異（P>0.05）；在濃度為30μg/mL時(shí)，木犀草素和香紫蘇醇與克拉維酸相比無(wú)顯著性差異（P>0.05）；在濃度為70μg/mL時(shí)，蘆薈大黃素與克拉維酸相比無(wú)顯著性差異（P>0.05）；在濃度為90μg/mL時(shí)，蘆薈大黃素對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的抑制效果最好。
　　4、七個(gè)中藥單體分別聯(lián)合頭孢他啶、頭孢噻肟、氨芐西林、阿莫西林和頭孢