福建余甘子phyllanthusemblical.遺傳資源的rapd分析

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文福建余甘子（Phyllanthus emblica L.）遺傳資源的RAPD分析姓名：蔡英卿申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：果樹學(xué)指導(dǎo)教師：賴鐘雄;潘東明20040501中文摘要本研究以福建省3 4 份余甘子遺傳資源為材料，摸索出適合余甘子葉片基鞠組D N A 豹提取方法；建立幫優(yōu)化了余甘子R A P D 反痘體系；篩選出具商品種( 或單株) 特異性的R A P D 標記；采用R A P D 標記，結(jié)合聚類分析，進行7

2、福建雀余營子速鑄蜜源秘裝緣關(guān)系與遺磚多樣蛙磅究。主要磺究結(jié)果如下：一、余甘予葉片D N A 提取方法的建立。針對余甘子葉片富含多酚類、多糖、色素等耘疆，荔與D N A 績食成復(fù)合躲，難溶解，又翕麴制孫g 瓣話牲，觚囂影響P C R 擴增。本研究采用改良的S D S 法，以新鮮幼嫩的余甘予葉片為材料，同時又在提取液中加入3 ％P V P ，有效她克服消除了酚類物質(zhì)的干擾，麩余甘子時片中提取了較燕純度和產(chǎn)量的D N A ，適斑作為余甘子的R

3、 A P D 分析．二二、余甘子R A P D 反應(yīng)體系的優(yōu)化。在參考一般R A P D 分析的反應(yīng)程序的基羲塞上，經(jīng)j 霆爰復(fù)試驗，確定逡宣豹P C R 擴漤穰癢雋：9 4 ℃，硬變性4 r a i n ；9 4℃，l m l n —◆3 8 “ C ，I ．5 m i 曠—◆7 2 “ ( 2 ，2 r a i n ，4 5 個循環(huán)；7 2 “ ( 2 。1 0 r a i n ．優(yōu)純靜余曹子R A P D 反座俸蓉秀：譙擴增反疵慧

4、體積2 §pL 牽，憊含0 。6m m o l ·¨‘M 9 2 ‘、5 0 0 u t o o l ·L ～d N T P 、3 0 0n m o l ·L ’’引物、2 5 n g 模板D N A 、1 ，2 5 U T a q D N A 聚合酶。三、余剪子R A P D 標記的霧態(tài)性稷發(fā)分析。采用2 0 個具特異擴增的多悉性引物對福建省3 4 份余甘子熬因型進行擴增，2 0 個引

5、物，在3 4 份供試材料中憨筵擴增出2 5 9 個袋贏，雖蚜是多態(tài)的，多杰性程度達1 0 0 ％，警均每個S l 麴擴增1 2 ．9 5 個位點。各供試材料之間的遺傳距離范圍為0 - 1 ，其中栽培品種與瓣生蜜添之閏遺黌距離在0 ．《3 一l 之淹；營瓣余曹資滾與墓安余學(xué)費滾之潤遺傳距離為0 ．2 7 珈．9 9 。齲、品種( 或單撩) 特異餓R A P D 標記的篩選與品種髓鄹。采用2 0 個蒜特異擴增的多態(tài)性引物對所有供試材料進行擴