國家自然基金標(biāo)書- 人類重要病原體致病機(jī)制研究

1、項(xiàng)目名稱： 人類重要病原體致病機(jī)制研究 人類重要病原體致病機(jī)制研究首席科學(xué)家：起止年限：依托部門： 衛(wèi)生部 衛(wèi)生部（4）分離、鑒定與 HBx 蛋白相互作用的新細(xì)胞蛋白（5）與 HBx 相互作用蛋白因子的表達(dá)差異研究（6）超表達(dá) HBx 蛋白及其相互作用細(xì)胞蛋白對細(xì)胞生理功能的和 HBV 病毒的影響（7）抑制與 HBx 蛋白相互作用蛋白表達(dá)后對細(xì)胞生理活性和 HBV 病毒的影響（8）在實(shí)驗(yàn)動物水平 HBx 蛋白及其相互作用蛋白的功能性研究

2、利用 Bac-to-Bac 桿狀病毒真核表達(dá)系統(tǒng)，構(gòu)建含有完整 HBV 基因組的重組桿狀病毒。利用該重組病毒感染不同肝細(xì)胞，選擇一個或幾個合適的細(xì)胞系作為研究 HBV 的分子生物學(xué)和藥物的篩選的平臺。利用桿狀病毒能轉(zhuǎn)導(dǎo)不同的肝細(xì)胞的特性，利用 Microarray 分析重組 HBV 感染前后細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄譜，結(jié)合差減文庫來篩選與 HBV 感染相關(guān)的基因。采用蛋白質(zhì)二維電泳、質(zhì)譜，結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)和噬菌體展示文庫，最新的組織表達(dá)蛋白或者 DNA

3、 芯片等現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)分離并鑒定 HBV 感染相關(guān)的受體和輔助受體。采用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選和差異表達(dá)文庫分析等方法，尋找與 HBx 蛋白相互作用的細(xì)胞蛋白，研究 HBx 蛋白與其相互作用細(xì)胞蛋白對細(xì)胞凋亡、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、增殖等生物學(xué)功能。在細(xì)胞和組織水平上分析 HBx 蛋白相互作用細(xì)胞因子的表達(dá)差異，研究新的相互作用細(xì)胞因子的生物學(xué)功能。HBx 蛋白與激活的ras、Myc 等腫瘤因子相互作用對細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及試驗(yàn)動物致瘤性的影響，并借助現(xiàn)代分子

4、生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子病毒學(xué)技術(shù)闡明 HBx 蛋白及其相互作用的細(xì)胞蛋白對細(xì)胞凋亡、生長特性等的影響作用途徑，深入探討 HBV 致病和致癌的分子機(jī)制。3．研究抗原特異性免疫調(diào)節(jié) T 細(xì)胞在病毒性肝炎發(fā)病與轉(zhuǎn)歸中的作用及其網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制（1）中國旱獺嗜肝病毒急、慢性感染模型的建立（2）中國旱獺嗜肝病毒模型在 HBV 感染相關(guān)疾病研究中的實(shí)際應(yīng)用（3）利用小鼠模型研究特異性 Tr 細(xì)胞包括 DN Tr 在調(diào)節(jié)機(jī)體產(chǎn)生適度的免疫反應(yīng)以清除肝炎