我國(guó)部分自然風(fēng)景區(qū)蜱媒傳染病病原體初步研究.pdf

1、目的:旨在掌握我國(guó)東北黑龍江牡丹江、華中河南三門峽、華東福建武夷山和華南廣西憑祥這四個(gè)地區(qū)的自然風(fēng)景區(qū)的蜱以及鼠形動(dòng)物、鳥等宿主動(dòng)物體內(nèi)伯氏疏螺旋體、斑點(diǎn)熱群立克次體、嗜吞噬細(xì)胞無形體及巴貝西原蟲這四種病原體的感染及復(fù)合感染情況，選取了牡丹江鏡泊湖、三門峽甘山國(guó)家森林公園、武夷山風(fēng)景區(qū)及憑祥友誼關(guān)這四個(gè)自然風(fēng)景區(qū)，分析上述自然風(fēng)景區(qū)蜱媒傳染病感染的風(fēng)險(xiǎn)，為該自然風(fēng)景區(qū)做好科學(xué)合理且經(jīng)濟(jì)有效的蜱媒傳染病的防控工作提供基礎(chǔ)的理論支持，以便能

2、夠做到對(duì)自然風(fēng)景區(qū)蜱媒傳染病的早期預(yù)警。
　　方法:采用人工布旗法在調(diào)查地區(qū)草叢或林中捕捉游離蜱;在哺乳動(dòng)物如牛、羊、犬等體表采集寄生蜱;采用夾夜法捕獲鼠形動(dòng)物，取其膀胱、脾等組織;用網(wǎng)捕法捕獲鳥類，取其血液、肝臟等組織。將標(biāo)本帶回實(shí)驗(yàn)室分類鑒定后提取DNA，采用PCR或Nested-PCR法擴(kuò)增基因片斷，然后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳及凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果，以判定標(biāo)本感染病原體情況，隨機(jī)選取陽性標(biāo)本進(jìn)行測(cè)序和序列分析。應(yīng)用x2檢驗(yàn)或Fi

3、sher確切概率法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，判定采集地區(qū)四種病原體的感染情況，并采用軟件MEGA5.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹分析序列，確定病原體的分類學(xué)位置。
　　結(jié)果:檢測(cè)牡丹江鏡泊湖地區(qū)2012年和2013年采集到嗜群血蜱781只，全溝硬蜱70只，日本血蜱52只，對(duì)全部蜱標(biāo)本進(jìn)行四種病原體檢測(cè)發(fā)現(xiàn):(1)伯氏疏螺旋體陽性標(biāo)本12只，感染率為1.33％。全溝硬蜱、嗜群血蜱、日本血蜱的感染率分別為15.71％、0.17％、0.00％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，三

4、個(gè)蜱種之間伯氏疏螺旋體的感染率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=50.03，P＜0.05)。經(jīng)測(cè)序比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)，牡丹江鏡泊湖檢測(cè)的陽性蜱標(biāo)本中，伯氏疏螺旋體屬于B.afzelii型和B.garinii型。(2)斑點(diǎn)熱群立克次體陽性標(biāo)本57只，感染率6.31％。全溝硬蜱、嗜群血蜱和日本血蜱的感染率分別為35.71％、3.97％、1.92％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，三個(gè)蜱種之間斑點(diǎn)熱群立克次體的感染率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=63.29，P＜0.05)。經(jīng)測(cè)序比對(duì)分析發(fā)

5、現(xiàn)，牡丹江鏡泊湖檢測(cè)的陽性蜱標(biāo)本中，斑點(diǎn)熱群立克次體屬于Rickettsia heilongjiangii、Rickettsia raoultii、Candidatus Rickettsiatarasevichiae和一種未知的斑點(diǎn)熱群立克次體。(3)嗜吞噬細(xì)胞無形體陽性標(biāo)本2只，感染率0.22％，感染嗜吞噬細(xì)胞無形體的的蜱標(biāo)本均為全溝硬蜱。各蜱種間感染率無明顯差異(x2=5.04，P＞0.05)。經(jīng)測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn)，牡丹江鏡泊湖檢測(cè)的的陽

6、性蜱標(biāo)本中，嗜吞噬細(xì)胞無形體與中俄邊境菌株及中國(guó)東北菌株距離最近。(4)巴貝西原蟲陽性標(biāo)本2只，陽性感染率為0.22％，感染巴貝西原蟲的的蜱標(biāo)本均為全溝硬蜱。各蜱種間感染率無明顯差異(x2=5.04，P＞0.05)。經(jīng)測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn)，牡丹江鏡泊湖檢測(cè)的陽性蜱標(biāo)本中，巴貝西原蟲屬于Babesia microti。此外，在牡丹江鏡泊湖檢測(cè)的全溝硬蜱標(biāo)本中，存在伯氏疏螺旋體和嗜吞噬細(xì)胞無形體、伯氏疏螺旋體和巴貝西原蟲及伯氏疏螺旋體和斑點(diǎn)熱群立克

7、次體的復(fù)合感染情況。牡丹江鏡泊湖附近捕獲的12只鼠形動(dòng)物中未檢測(cè)到四種病原體。
　　河南三門峽甘山附近采集的248只長(zhǎng)角血蜱中，檢測(cè)到斑點(diǎn)熱群立克次體陽性標(biāo)本1只，感染率為0.40％，經(jīng)測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn)，檢測(cè)的陽性蜱標(biāo)本中的斑點(diǎn)熱群立克次體與Rickettsia sp.（福建、河北、韓國(guó)等分離菌株）在同一分支，同源性最近。
　　廣西憑祥友誼關(guān)附近采集到的161只具角血蜱中未檢測(cè)到上述四種病原體的存在;在該地區(qū)捕獲的53只鼠形動(dòng)物

8、中，檢測(cè)到3只鼠形動(dòng)物感染了伯氏疏螺旋體，感染率5.66％，經(jīng)測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn)，檢測(cè)的陽性標(biāo)本中，伯氏疏螺旋體屬于B.valaisiana。
　　福建武夷山附近采集31只寄生蜱中均未檢測(cè)到上述四種病原體的存在。
　　結(jié)論:本課題對(duì)上述四個(gè)自然風(fēng)景區(qū)內(nèi)蜱及鼠形動(dòng)物、鳥標(biāo)本中四種重要的蜱媒傳染病的病原體進(jìn)行了初步的研究和探討。牡丹江鏡泊湖的蜱標(biāo)本中檢測(cè)到了伯氏疏螺旋體、斑點(diǎn)熱群立克次體、嗜吞噬細(xì)胞無形體及巴貝西原蟲四種病原體的感染，