產(chǎn)糖化酶黑曲霉的誘變選育及發(fā)酵參數(shù)優(yōu)化.pdf

1、糖化酶，全稱葡萄糖淀粉酶（Glucoamylase），是一種具有淀粉外切酶活性的單鏈酸性糖苷水解酶。糖化酶能夠水解生淀粉、可溶性淀粉或一些低聚糖等非還原末端的α-1，4-糖苷鍵，生成葡萄糖。糖化酶廣泛應(yīng)用于釀造業(yè)、制糖業(yè)、食品加工業(yè)及抗菌素、生長(zhǎng)激素、氨基酸等發(fā)酵工業(yè)和輕工醫(yī)藥領(lǐng)域，在酶制劑生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用。隨著社會(huì)的不斷進(jìn)步，人類的物質(zhì)需求也在逐漸增加，糖化酶對(duì)于國(guó)民經(jīng)濟(jì)產(chǎn)生日益重要的作用。因此，研究糖化酶的生產(chǎn)技術(shù)，選育優(yōu)良的

2、高產(chǎn)菌株，不僅能夠促進(jìn)傳統(tǒng)酶制劑產(chǎn)業(yè)的技術(shù)進(jìn)步，而且能夠推動(dòng)酶制劑應(yīng)用相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
　　本文以糖化酶工業(yè)生產(chǎn)菌株（AS-c1）為材料，通過對(duì)其進(jìn)行基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)，測(cè)得糖化酶最高酶活為1261U/mL。通過對(duì)黑曲霉菌絲體進(jìn)行多次紫外線誘變，最終篩選出一株糖化酶高產(chǎn)菌（AS-UV40c），其糖化酶產(chǎn)酶水平較初始菌株提高了15％，酶活1449U/mL。經(jīng)五代遺傳穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明AS-UV40c的產(chǎn)酶活性具有良好的遺傳穩(wěn)定性。
　　

3、為了提高黑曲霉菌株的研究和工業(yè)應(yīng)用價(jià)值，以誘變所得高產(chǎn)菌株AS-UV40c為研究對(duì)象，以其基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件為基礎(chǔ)，利用單因素實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化，獲得的最佳碳源為蔗糖-土豆淀粉，最佳氮源為硝酸鈉-黃豆粉。對(duì)碳源和氮源進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化所得的最佳培養(yǎng)基配方為：蔗糖1.5%，土豆淀粉4.5%，硝酸鈉0.2%，黃豆粉0.5%，磷酸氫二鉀0.15%。優(yōu)化后測(cè)得的全酶活為1739.76U/mL，比初始酶活提高了20%。利用單因素實(shí)驗(yàn)