柑橘和果汁中鏈格孢霉毒素檢測(cè)技術(shù)研究.pdf

1、真菌毒素是由多種絲狀真菌產(chǎn)生的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物，主要發(fā)生在果蔬和糧食產(chǎn)品中，影響農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，并且具有致癌性、誘變性等多種毒性作用，危害人體健康。柑橘是世界第一大水果，在世界水果產(chǎn)業(yè)中占有重要的地位。我國(guó)是世界柑橘的主要起源中心，種植面積和產(chǎn)量均居世界首位。寬皮柑橘、橙類、柚類等柑橘類水果以及橙汁、蘋果汁、葡萄汁等果汁產(chǎn)品是居民日常飲食的重要組成部分，因此測(cè)定柑橘類水果和果汁中的真菌毒素含量具有重要的意義。
　　本文綜述

2、了果蔬中鏈格孢霉毒素種類及危害、樣品前處理技術(shù)和檢測(cè)方法，重點(diǎn)介紹了高效液相色譜(HPLC)、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)和QuEChERS、分散液液微萃取在鏈格孢霉毒素檢測(cè)中的應(yīng)用。結(jié)合QuEChERS和分散液液微萃取兩種前處理方法，本文建立了三種測(cè)定柑橘類水果和果汁產(chǎn)品中鏈格孢霉毒素的分析方法，結(jié)果令人滿意，并用于大量實(shí)際樣品的檢測(cè)。具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　(1)建立了同時(shí)檢測(cè)柑橘中鏈格孢酚甲基乙醚、鏈格孢酚、騰

3、毒素和桔青霉素等4種真菌毒素的QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)分析方法。待測(cè)樣品經(jīng)乙腈提取，無(wú)水MgSO4和NaCl脫水鹽析，C18鍵合相分散萃取凈化，以ACQUITY UPLCBEH C18液相色譜柱為分離柱，以0.1％甲酸水溶液和乙腈作為流動(dòng)相梯度洗脫，在電噴霧離子源電離、多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式下進(jìn)行測(cè)定，外標(biāo)法定量。該方法在5.0～200μg/L濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)(R2）均大于0.

4、9927，檢出限為0.2～0.7μg/kg。3個(gè)不同加標(biāo)水平的平均回收率為78.0％～103.3％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6％～10.6％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法快速、準(zhǔn)確、靈敏，適用于柑橘中4種真菌毒素殘留的快速確證檢測(cè)。
　　(2)建立了同時(shí)檢測(cè)不同果汁（橙汁、蘋果汁、梨汁、葡萄汁、桃汁）中3種鏈格孢霉毒素（鏈格孢酚、鏈格孢酚甲基乙醚、騰毒素）的分散液液微萃取-超高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器(UPLC-PDA)分析方法。對(duì)影響分散

5、液液微萃取萃取效率的分散劑和萃取劑類型及用量、萃取時(shí)間、鹽濃度等多種因素進(jìn)行了優(yōu)化。在最佳條件下，其理論富集倍數(shù)為50倍。在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其相關(guān)系數(shù)(R2）均大于0.9943，檢出限(S/N=3)為1.0～3.0μg/kg。2個(gè)不同加標(biāo)水平的平均回收率為69.8％～110.5％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7％～9.4％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)單、快速、廉價(jià)，適用于果汁樣品中3種鏈格孢霉毒素快速確證檢測(cè)。
　　(3)建立了同時(shí)

6、檢測(cè)不同果汁（橙汁、蘋果汁、梨汁、葡萄汁、桃汁）中3種鏈格孢霉毒素的QuEChERS-分散液液微萃取-超高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器(UPLC-PDA)分析方法。待測(cè)樣品經(jīng)乙腈提取，無(wú)水MgSO4和NaCl脫水鹽析，C18鍵合相分散萃取凈化。將QuEChERS前處理方法得到的萃取液作為DLLME分散劑，氯仿作為萃取劑。在最佳條件下，其理論富集倍數(shù)為10倍。在一定濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其相關(guān)系數(shù)(R2）均大于0.9969，檢出限(S/