糧油中真菌毒素和農(nóng)藥殘留多組分檢測技術(shù)研究.pdf

1、近年來，食品安全事件頻發(fā)，有關(guān)糧油產(chǎn)品質(zhì)量安全的事件也時(shí)常見諸報(bào)道，如臺灣的米糠油事件、湖南的毒大米事件以及花生中黃曲霉毒素超標(biāo)問題等層出不窮，引起了消費(fèi)者極大的恐慌，也給分析工作者的工作帶來了巨大的挑戰(zhàn)。其中，以真菌毒素污染和農(nóng)藥殘留為代表的有害物質(zhì)是最主要的兩大安全隱患，直接影響著我國的國計(jì)民生和出口創(chuàng)匯。因此，研究建立簡便、準(zhǔn)確、靈敏的真菌毒素和農(nóng)藥殘留多組分檢測技術(shù)是保障糧油產(chǎn)品安全的關(guān)鍵，也是當(dāng)前科研工作的研究熱點(diǎn)。本研究從基

2、于大型儀器的確證性檢測技術(shù)和基于免疫學(xué)原理的快速檢測技術(shù)兩方面著手展開，為確保我國糧油產(chǎn)品質(zhì)量安全提供了關(guān)鍵的技術(shù)支撐。主要研究內(nèi)容和創(chuàng)新點(diǎn)如下：
　　1.建立了七種真菌毒素的多組分免疫親和柱凈化—HPLC-MS/MS檢測技術(shù)。以純化的抗黃曲霉毒素（AFT）、抗玉米赤霉烯酮毒素（ZEA）、抗T-2毒素、抗伏馬B1毒素（FB1）的四種單克隆抗體為特異性抓捕元件，研制了真菌毒素多組分免疫親和柱。同時(shí)優(yōu)化了提取溶劑、提取方式和上樣緩沖液

3、等條件，借助高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)（HPLC-MS/MS），用于植物油中7種真菌毒素的同步凈化和檢測。該方法對AFB1、AFB2、AFG1、AFG2四種真菌毒素的檢出限（LOD）為0.02～0.08μg/kg，對 ZEA、T-2、FB1三種真菌毒素的檢出限為0.10～0.50μg/kg；空白樣品基質(zhì)加標(biāo)回收率為80.22％～106.10%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.05%～6.56%。該方法具有操作簡便、有機(jī)溶劑用量少、凈化徹底、回收率高和特

4、異性好的特點(diǎn)，為確保我國食用植物油質(zhì)量安全提供了一種新的高效、準(zhǔn)確、靈敏的檢測方法。
　　2.建立了基于石墨烯基鐵氧化物（G-Fe3O4）的多種農(nóng)藥殘留磁固相萃取凈化—GC-MS/MS檢測技術(shù)。采用溶劑熱反應(yīng)法一步合成制備出石墨烯基鐵氧化物磁性材料（G-Fe3O4），將其作為磁固相萃取吸附劑，通過優(yōu)化樣品溶液稀釋比例、萃取材料用量、萃取時(shí)間、洗脫溶劑的種類和體積等萃取條件，并結(jié)合氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS/MS）技術(shù)，建立了花生

5、樣品中9種常用農(nóng)藥的多殘留分析檢測方法。該方法對9種農(nóng)藥的檢出限為0.07～1.85μg/kg，線性范圍為0.23～1000μg/kg，不同加標(biāo)水平下的平均回收率為81.92%～119.30%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為2.14%～6.58%。該方法簡便易行、回收率高、穩(wěn)定性好、成本低廉，為花生等高油脂樣品基質(zhì)中農(nóng)藥多殘留檢測提供了一種快捷、高效、準(zhǔn)確的技術(shù)方法。
　　3.建立了能夠同步檢測真菌毒素和農(nóng)藥殘留的時(shí)間分辨熒光免疫層析技

6、術(shù)。將抗玉米赤霉烯酮毒素（ZEA）、抗黃曲霉毒素 B1（AFB1）、和抗百菌清（CTN）三種高特異性的單克隆抗體與標(biāo)記銪元素的聚苯乙烯熒光微球偶聯(lián)制備免疫熒光探針，同時(shí)制備了針對三種目標(biāo)物的免疫層析試紙條，通過優(yōu)化抗體標(biāo)記濃度、熒光探針用量、免疫試劑用量、免疫層析條件等因素，建立了能夠同步檢測兩種真菌毒素ZEA和AFB1及農(nóng)藥CTN的時(shí)間分辨熒光免疫層析方法。該方法對ZEA、AFB1和CTN的檢出限分別為0.043、0.011和0.08