蛋白質(zhì)對(duì)測(cè)定動(dòng)物源性食品中農(nóng)獸藥殘留的影響及其消除.pdf

1、動(dòng)物源性食品中農(nóng)獸藥殘留分析分為前處理與檢測(cè)兩步，目前，儀器水平已經(jīng)能夠滿足測(cè)定要求，然而，樣品前處理方法存在步驟多、有機(jī)溶劑消耗大、回收率低等缺陷。本文對(duì)現(xiàn)有的檢測(cè)方法及樣品前處理技術(shù)進(jìn)行了綜述，利用平衡透析法與HPLC法、GC-MS法分別探討了氨基甲酸酯類(lèi)、鹽酸克倫特羅、丁香酚和吡喹酮等藥物與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合作用，并深入調(diào)查了藥物在實(shí)際樣品中的存在狀態(tài)，為復(fù)雜樣品中樣品前處理技術(shù)發(fā)展提供了理論指導(dǎo)。研究了CH3CN–K2HPO4–H

2、2O雙水相體系提取法和有機(jī)水溶液提取法等樣品前處理方法，建立了快速高效的動(dòng)物源性食品中氨基甲酸酯類(lèi)、鹽酸克倫特羅、丁香酚和吡喹酮等藥物殘留的分析方法，并用于實(shí)際樣品的測(cè)定。
　　論文主要分為五個(gè)部分：
　　第一部分：闡述動(dòng)物性食品安全現(xiàn)狀，總結(jié)了農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)技術(shù)及樣品前處理方法，并說(shuō)明了本文的研究?jī)?nèi)容和研究意義。
　　第二部分：以BSA作為模擬蛋白，利用高效液相色譜法來(lái)研究魚(yú)肉和蝦肉樣品中蛋白質(zhì)對(duì)提取四種氨基甲酸酯類(lèi)

3、藥物的影響，結(jié)果表明蛋白質(zhì)與四種氨基甲酸酯類(lèi)藥物強(qiáng)結(jié)合。利用CH3CN-K2HPO4-H2O雙水相技術(shù)，可破壞這種強(qiáng)結(jié)合作用有效提取出藥物。在上相萃取液中加入PSA、C18去除極性和脂類(lèi)雜質(zhì)，直接進(jìn)行液相色譜檢測(cè)。在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下，應(yīng)用此前處理方法與HPLC法結(jié)合測(cè)定魚(yú)和蝦樣品中的四種氨基甲酸酯類(lèi)藥物，加標(biāo)回收率、RSD與檢出限范圍分別為80.1％～96.7%，1.37%～5.19%和0.26～8.8ng/g。本方法是有效的前處理方法且

4、為測(cè)定復(fù)雜動(dòng)物源性樣品中氨基甲酸酯類(lèi)藥物殘留提供了一個(gè)理論基礎(chǔ)。
　　第三部分：直接以生物親和的甲醇-鹽酸水溶液提取結(jié)合液相色譜法，建立了一種快速提取與測(cè)定肉和血清樣品中鹽酸克倫特羅藥物殘留的方法。實(shí)驗(yàn)研究了鹽酸克倫特羅藥物在豬肉與豬血清樣品中的存在狀態(tài)。研究表明：鹽酸克倫特羅與豬肉、豬血清樣品中的蛋白質(zhì)存在較強(qiáng)結(jié)合作用，用50%的甲醇鹽酸水溶液作為提取溶劑時(shí)，藥物殘留的提取效率最好且提取液不需凈化。試驗(yàn)測(cè)定了豬肉、豬血清、牛肉和

5、牛血清樣品中的鹽酸克倫特羅藥物殘留量，鹽酸克倫特羅的質(zhì)量濃度在0.01～5.00μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為1.8ng/g，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.1%～5.1%之間，回收率在87.4%～99.2%之間。
　　第四部分：以乙腈-磷酸氫二鉀-水雙水相體系高效提取富含蛋白的魚(yú)肉和蝦肉中殘留的丁香酚藥物，結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)魚(yú)肉和蝦肉中丁香酚藥物殘留的快速準(zhǔn)確檢測(cè)。利用平衡透析法結(jié)合氣相

6、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)研究了丁香酚藥物與蛋白質(zhì)的結(jié)合情況及在真實(shí)魚(yú)肉和蝦肉中的存在形式。實(shí)驗(yàn)表明丁香酚藥物在富含蛋白的魚(yú)和蝦樣品中以結(jié)合態(tài)形式存在。實(shí)驗(yàn)利用雙水相基質(zhì)去除法與QuEChERS法兩種方法同時(shí)處理富含蛋白的魚(yú)肉、蝦肉樣品，結(jié)果顯示雙水相基質(zhì)去除法的提取回收率高。將此前處理方法應(yīng)用于測(cè)定真實(shí)魚(yú)肉、蝦肉樣品中的丁香酚殘留量，檢出限為2.2ng/g，回收率范圍為80.6%～95.9%。
　　第五部分：利用熒光光譜法