動(dòng)物源性食品中獸藥殘留檢測(cè)的綠色高效樣品前處理技術(shù)研究.pdf

1、動(dòng)物源性食品中獸藥殘留的分析檢測(cè)分為樣品前處理和樣品檢測(cè)2個(gè)步驟，目前儀器水平已經(jīng)能夠充分滿足測(cè)定需求，而樣品前處理技術(shù)就成為制約動(dòng)物源性食品中獸藥殘留分析檢測(cè)發(fā)展的關(guān)鍵。本論文對(duì)現(xiàn)有樣品前處理技術(shù)和檢測(cè)方法進(jìn)行了綜述，結(jié)合熒光猝滅法與平衡透析法研究了幾種獸藥與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合作用，為動(dòng)物源性食品中獸藥殘留檢測(cè)的樣品前處理技術(shù)提供理論上的依據(jù)。以有機(jī)溶劑水溶液為提取體系結(jié)合HPLC技術(shù)，建立了檢測(cè)動(dòng)物源性食品中磺胺類、安定類和喹諾酮類藥

2、物殘留的快速分析方法。
　　論文分為五個(gè)部分：
　　第一部分：對(duì)動(dòng)物源性食品的安全現(xiàn)狀及動(dòng)物源性食品中的獸藥殘留檢測(cè)方法和樣品前處理技術(shù)進(jìn)行了綜述，并說(shuō)明了本文的選題意義。
　　第二部分：應(yīng)用分子熒光光譜法研究了六種磺胺類藥物與雞蛋白蛋白的結(jié)合作用，利用平衡透析法研究了磺胺類藥物(Sulfonamides，SAs)與實(shí)際雞蛋樣品的結(jié)合率，并詳細(xì)探討了蛋白質(zhì)對(duì)提取雞蛋中SAs殘留的影響。結(jié)果表明，SAs與雞蛋樣品中的蛋白

3、質(zhì)具有較強(qiáng)的結(jié)合作用，適當(dāng)濃度的乙腈水溶液可引起蛋白質(zhì)緩慢且完全變性，有利于釋放與蛋白質(zhì)結(jié)合的SAs，實(shí)現(xiàn)SAs的高效率提取。本方法應(yīng)用于雞蛋中的SAs測(cè)定，結(jié)果令人滿意，回收率均在78.7％～91.1%之間，RSD值為0.8%～4.2%。該方法步驟簡(jiǎn)便、快速、高效，符合檢測(cè)要求。
　　第三部分：運(yùn)用平衡透析法研究了安定類藥物與實(shí)際樣品之間的結(jié)合效率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，兩種安定類藥物與三種實(shí)際樣品之間均具有很強(qiáng)的結(jié)合作用，這種結(jié)合作用

4、導(dǎo)致從樣品中提取兩種藥物的提取效率降低。以體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇水溶液作為提取試劑時(shí)，樣品中的蛋白質(zhì)會(huì)發(fā)生緩慢且完全的變性，釋放出與蛋白質(zhì)結(jié)合的藥物，進(jìn)而得到較高的提取率。由于80%的乙醇水溶液極性較大，提取液中的脂溶性雜質(zhì)很少，在提取液中加入少量的PSA（N-丙基乙二胺修飾的硅膠）粉末和C18粉末即可達(dá)到滿意的凈化效果，大大簡(jiǎn)化了樣品溶液的凈化步驟。該方法應(yīng)用于牛肉、豬肉、豬血清中安定與奮乃靜的測(cè)定，結(jié)果令人滿意，回收率均在71.2%

5、～96.8%之間，RSD值為0.4%～3.7%。
　　第四部分：探討了蛋白質(zhì)對(duì)從雞蛋樣品中提取五種喹諾酮類藥物（Quinolones， QNs）提取效率的影響，并選擇合適濃度的有機(jī)溶劑作為提取體系，同時(shí)利用高效液相色譜技術(shù)考察了五種藥物在不同濃度的提取體系中的提取效率。結(jié)果表明，70%的甲醇水溶液可以破壞QNs與蛋白質(zhì)之間的結(jié)合作用，使雞蛋中的蛋白質(zhì)發(fā)生緩慢且完全的變性，釋放出與蛋白質(zhì)結(jié)合的QNs，從而得到較高的提取效率。由于甲醇

6、水溶液（70%）的極性較大，導(dǎo)致提取液中的脂溶性雜質(zhì)減少，只需要在提取液中加入少量的凈化劑（PSA和C18）粉末即可達(dá)到滿意的凈化效果，簡(jiǎn)化了樣品提取溶液的凈化過(guò)程。該方法應(yīng)用于雞蛋中QNs殘留的測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果令人滿意，回收率均在81.2%～97.3%之間，RSD值為1.1%～4.1%。
　　第五部分：建立一種一步提取凈化法快速分離檢測(cè)牛奶樣品中五種QNs（依諾沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、加替沙星）的高效液相色譜法。該方法

7、采用反相C18柱，檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，乙腈-0.05 mol/L檸檬酸水溶液（15:85）為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min。實(shí)驗(yàn)表明，適當(dāng)濃度的甲醇水溶液能使樣品中的蛋白質(zhì)發(fā)生緩慢且充分的變性，將與其結(jié)合的QNs釋放到提取液中，得到令人滿意的提取效率。在提取過(guò)程中加入適量PSA、C18凈化劑同步凈化，即可實(shí)現(xiàn)樣品的一步提取凈化。該方法應(yīng)用于牛奶中五種QNs殘留的測(cè)定，回收率均在97.3%～100.5%之間，方法檢出限為24.1～83