蛋膜酶解生產抗菌多肽工藝研究及抗菌活性成分鑒定.pdf

1、當前,我國蛋成品的消耗量日益增多,關于禽蛋品的食用及開發(fā)利用方面,大家一貫都是僅僅用了可直接食用的雞蛋清和雞蛋黃,將沒能夠食用的大批量雞蛋殼隨意扔掉。若這些蛋殼得不到妥善處理，久而久之就會給環(huán)境帶來一定影響,造成環(huán)境影響這一社會問題急需得到解決,蛋殼資源的合理化利用已迫在眉睫。事實上,蛋膜中蛋白含量非常豐富，是潛在的多肽和氨基酸資源。因此,本課題試驗在蛋殼膜的綜合利用方面展開了系統(tǒng)的研究工作。
　　以雞蛋殼膜為試驗基本原材料，用中

2、性、堿性、胰和木瓜蛋白酶對蛋殼膜進行酶解，將酶解所得到的酶解液分別對Chicken E.coli、S.aureus、P.aeruginosa、S.typhimurium、S.dysenteriae、A.hydrophila、Enterotoxigenic E.coli和P.multocida進行抑菌試驗，結果得出堿性蛋白酶酶解液的抑菌效果要比其他蛋白酶酶解液抑菌效果好，然后分析了酶解過程中的堿性預處理、酶解溫度、酶解時間、加酶量、酶解p

3、H五因素對雞蛋殼膜酶解液抑菌效果的影響。通過單因素試驗,結合Design Expert8.0.6分析軟件,運用Box-Behnken中心組合設計進行響應面法(RSM)優(yōu)化酶解工藝條件。最佳酶解工藝條件優(yōu)化試驗結果為：酶解溫度45℃、酶解時間2h、酶用量37.51u/mg、酶解pH10.14。該最優(yōu)工藝條件下，雞蛋殼膜酶解液對S.typhimurium的抑菌圈直徑為17.927±0.19mm，與理論最優(yōu)值17.941±0.21mm接近，抑

4、菌效果比優(yōu)化前提高了10.52％，說明擬合方程與實際相符合，所得結果準確可靠。進一步，本課題試驗選取了較適合的兩種酶進行雙酶法酶解蛋殼膜生產抗菌多肽，以S.typhimurium為指示菌檢測復合酶解液抑菌活性，對復合酶酶解的條件進行優(yōu)化試驗，通過正交回旋旋轉組合探討復合酶解的最佳工藝條件。復合酶酶解正交工藝條件優(yōu)化（加酶比例為：1:1結果為：中性蛋白酶+堿性蛋白酶、酶解溫度：40℃、酶添加量2%、酶解時間4h、酶解PH值10。