耳突麒麟菜寡糖的抗食物過敏研究.pdf

1、食物過敏主要指人體對食物中的抗原物質(zhì)產(chǎn)生的由免疫介導(dǎo)的不良反應(yīng)，其臨床表現(xiàn)常表現(xiàn)為消化道、皮膚、呼吸系統(tǒng)等疾病。為了有效緩解食物過敏患者的過敏癥狀，臨床主要用抗組胺類藥物治療，但是藥物治療具有副作用大、不能根治的缺點。所以開發(fā)抗過敏天然活性物質(zhì)代替藥物緩解食物過敏反應(yīng)顯得尤為重要。
　　本研究通過酶解、超濾、DEAE-cellulose52離子柱層析及Detoxi-Gel內(nèi)毒素去除柱層析的方法獲得高純度的耳突麒麟菜寡糖(ESO)，

2、其總糖含量為97.87％;紅外光譜結(jié)果分析顯示ESO含有硫酸根的特征吸收峰，含量為18.17％。高效液相色譜分析發(fā)現(xiàn)ESO的主要單糖組成為半乳糖，含量達(dá)到87.65％;薄層層析結(jié)合離子色譜分析顯示ESO主要由四糖和六糖組成，且分子量大小分別為796Da和2112Da。
　　本研究主要通過體外細(xì)胞模型和體內(nèi)小鼠模型共同評價并探究ESO抗過敏活性及其機制。體外細(xì)胞模型結(jié)果顯示ESO能夠顯著抑制RBL-2H3細(xì)胞脫顆粒、組胺、白介素-4

3、(IL-4)和腫瘤壞死因子-α的釋放;小鼠骨髓來源肥大細(xì)胞(BMMCs)模型結(jié)果表明ESO能夠特異性的誘導(dǎo)過敏原激活BMMCs的凋亡，而對未激活的BMMCs沒有顯著影響。
　　利用來源于擬穴青蟹中的原肌球蛋白(TM)為過敏原，建立TM小鼠食物過敏模型評價ESO的抗過敏活性。小鼠食物過敏模型結(jié)果顯示ESO能夠顯著緩解食物過敏小鼠的腹瀉，低溫等過敏癥狀;ELISA實驗結(jié)果顯示ESO能夠顯著降低過敏小鼠血清IgE、IgG1、組胺、肥大細(xì)

4、胞蛋白酶的分泌水平;小鼠脾臟和腸系膜來源淋巴細(xì)胞因子蛋白水平結(jié)果顯示ESO能夠顯著降低Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-13的分泌，促進(jìn)Th1細(xì)胞因子IFN-γ和調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞因子IL-10的分泌;基因水平測定結(jié)果顯示ESO能夠顯著下調(diào)Th2細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子GATA-3與Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子T-bet表達(dá)的比值，上調(diào)Treg轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)測定結(jié)果顯示ESO能夠顯著促進(jìn)脾臟和腸系膜來源Treg細(xì)胞的分化。