H2O2和ATP的催化共振散射光譜分析.pdf

1、自采用熒光分光光度計同步掃描技術建立共振散射光譜分析法以來,其快速、靈敏等優(yōu)點已引起國內(nèi)外研究者注重,并用于蛋白質(zhì)、核酸、無機物等分析。本文在前人共振散射光譜研究的基礎上,結合適配體和催化技術,繼續(xù)拓展共振散射技術在H2O2和三磷酸腺苷(ATP)中的應用。本論文共分五章:
　　 第一章,簡要介紹了共振散射光譜技術的原理、金銀納米光學、催化特性及其分析進展；綜述了H2O2和ATP的分析進展。
　　 第二章,在pH4.4檸檬

2、酸-Na2HPO4緩沖液中,辣根過氧化物酶(HRP)催化H2O2產(chǎn)生與H2O2量成正比的·OH,·OH能氧化愈創(chuàng)木酚生成四聚體微粒,其平均粒徑在462.7 nm,該微粒在530 nm處有一較強共振散射峰。其共振散射峰增值(ΔI530nm)與過氧化氫在0.55～27.6μmol／L范圍呈良好線性關系。據(jù)此建立了靈敏、快速、選擇性測定微量過氧化氫的共振散射光譜法,用于雨水水樣分析,獲得滿意結果,加標回收率在98.58～110％。
　　

3、 第三章,在pH7.8 Tris-HCl緩沖液中,三磷酸腺苷的核酸適體(DNA1)與其互補鏈(DNA2)結合生成雙鏈DNA(dsDNA),dsDNA具有穩(wěn)定的、剛性的雙螺旋結構,不能穩(wěn)定金納米(AuNP),可被NaCl聚集,在590nm處出現(xiàn)一強共振散射峰。加入ATP后,ATP與dsDNA中的DNA1結合,游離的DNA2配體能穩(wěn)定AuNP,隨著ATP濃度增大,590nm處的共振散射值線性減小。適配體反應液中的AuNP對葡萄糖-銅(Ⅱ)

4、體系有催化作用,其產(chǎn)物在610nm處有一較強共振散射。隨著ATP濃度增大,反應液中AuNP越多,其催化作用增強,ATP濃度在2.2nM～20nM與共振散射值ΔI610nm呈線性關系。據(jù)此建立一種靈敏度高、選擇性好、簡便快速共振散射法檢測ATP的新方法。
　　 第四章,在pH7.8 Tris-HCl緩沖液中,三磷酸腺苷的核酸適體(Apt1)與其互補鏈(Apt2)結合生成雙鏈DNA。此dsDNA不能穩(wěn)定納米銀(AgNP),NaCl可

5、致AgNP聚集,在500nm波長處產(chǎn)生一個強共振散射光譜峰。加入ATP后,ATP與dsDNA中的Apt1結合形成較穩(wěn)定的發(fā)夾結構結合物并釋放出可穩(wěn)定AgNP的Apt2。隨著ATP濃度增加,500nm處的共振散射值線性減小。該適配體反應中未聚集的AgNP-Apt2對葡萄糖-銅(Ⅱ)微粒反應具有較強的催化作用,其產(chǎn)物氧化亞銅微粒在610nm處有一較強共振散射峰。隨著ATP濃度增大,反應液中AgNP-Apt2增多,催化作用增強,610nm處的