免疫球蛋白G的免疫納米金催化共振散射光譜分析.pdf

1、第一部分: 緒論。介紹了共振散射技術(shù)發(fā)展歷史、分析應(yīng)用以及發(fā)展前景；綜述了金納米微粒的制備、表征、以及膠體金標(biāo)記技術(shù)在生化分析中的應(yīng)用；介紹了免疫球蛋白G的分析進(jìn)展。 第二部分: 氯金酸-羥胺-納米金催化體系的共振散射光譜研究在檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液中，金、銀、鉑、鈀、四氧化三鐵納米粒子對(duì)氯金酸－鹽酸羥胺生成金顆粒反應(yīng)均具有催化作用。反應(yīng)生成的大粒徑金顆粒在796nm處產(chǎn)生一個(gè)較強(qiáng)的共振散射峰。本文以共振散射光譜法等作為檢測(cè)手段

2、，詳細(xì)研究了各種因素對(duì)納米金催化反應(yīng)的影響。隨著催化劑納米金濃度的增大,796nm處的共振散射光強(qiáng)度線性增大。粒徑為5nm、10nm、15nm、30nm、50nm納米金催化體系的線性范圍分別為0.25～10.15nMAu、1.27～50.76nM Au、1.27～44.16nMAu、1.83～50.76nMAu、5.08～265.18nMAu，其檢出限分別為0.25nM、0.99nM、1.18nM、1.19nM、4.15nM。據(jù)此建立了

3、一個(gè)測(cè)定超痕量納米金的催化共振散射光譜新方法，該法與納米金標(biāo)免疫反應(yīng)結(jié)合將為超痕量免疫球蛋白、半抗原的分析提供了一種新技術(shù)。 第三部分：免疫納米金催化金增強(qiáng)共振散射光譜法檢測(cè)超痕量免疫球蛋白G用粒徑為10 nm的金納米粒子標(biāo)記羊抗人IgG抗體獲得納米金標(biāo)記羊抗人IgG抗體（AuGIgG）。在pH2.27的檸檬酸鈉-鹽酸緩沖溶液中，AuGIgG對(duì)氯金酸-鹽酸羥胺生成較大粒徑金顆粒這一慢反應(yīng)具有較強(qiáng)的催化作用，該較大粒徑金顆粒在79

4、6nm處有一個(gè)較強(qiáng)的共振散射峰。在一定條件下，AuGIgG與IgG發(fā)生特異性結(jié)合生成納米金免疫復(fù)合物，以16000rpm速度離心分離獲得未反應(yīng)的AuGIgG，以它作催化劑催化氯金酸-鹽酸羥胺反應(yīng)生成較大粒徑金顆粒，用共振散射光譜做檢測(cè)技術(shù)，建立了測(cè)定IgG的免疫共振散射光譜新方法。結(jié)果表明，隨著IgG濃度增大，離心溶液中AuGIgG濃度降低，I796nm線性降低，其降低值△I796nm與IgG濃度在0.08～16.0ng·mL-1范圍內(nèi)

5、呈良好線性關(guān)系，檢出限為0.02ng·mL-1。本法具有靈敏、快速和較高的特異性，用于定量分析人血清IgG，結(jié)果滿意。 第四部分：免疫納米金催化銅增強(qiáng)共振散射光譜新方法及其生化分析應(yīng)用在pH4.2醋酸鈉-醋酸緩沖溶液中，金、銀、鉑、鈀、四氧化三鐵、氧化亞銅納米微粒對(duì)抗壞血酸還原硫酸銅生成銅顆粒反應(yīng)均具有催化作用。反應(yīng)生成的大粒徑金-銅顆粒在610nm處產(chǎn)生一個(gè)較強(qiáng)的共振散射峰，發(fā)現(xiàn)納米金的催化效果最好。本文以共振散射光譜法等作為

6、檢測(cè)手段，詳細(xì)研究了各種因素對(duì)納米金催化反應(yīng)的影響。隨著催化劑納米金濃度的增大,610nm處的共振散射光強(qiáng)度線性增大。粒徑為5nm、10nm、15nm、納米金催化體系的線性范圍分別為0.02～1.63nMAu、0.04～1.22nMAu、0.12～4.71nMAu，其檢出限分別為0.013nM、0.034 nM、0.100nM。據(jù)此建立了一個(gè)測(cè)定超痕量納米金的催化共振散射光譜新方法，該法與納米金標(biāo)免疫反應(yīng)結(jié)合將為超痕量免疫球蛋白、半抗原