基于磁球放大技術(shù)的電化學發(fā)光免疫分析方法及電化學發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移.pdf

1、第一章中，我們以Ru(bpy)2(dcbpy)NHS作為ECL標記物，將電化學發(fā)光免疫分析法和磁球放大技術(shù)相結(jié)合，發(fā)展了一種超靈敏的檢測抗原、抗體的電化學發(fā)光檢測方法。該法中亞微米磁球表面因為修飾了大量的發(fā)光體分子而起到信號放大的作用。實驗中我們利用抗體表面的氨基與蓋玻片基底上硅烷化后的環(huán)氧基的反應(yīng)將抗體固定在基底表面，然后經(jīng)免疫反應(yīng)、生物素與鏈霉親和素的特異性反應(yīng)等最終形成鏈霉親和素化的磁球-生物素化的抗體-抗原-抗體雙抗夾心式的復合

2、物，然后進行解離。利用Ru(bpy)2(debpy)NHS上的酯基與磁球上的鏈霉親和素之間的結(jié)合反應(yīng)將ECL標記物標記到磁球表面，實驗時將修飾了ECL標記物的磁球用磁鐵固定到Au電極表面。在三丙胺存在的條件下進行ECL檢測，在1.35 V得到最大的電化學發(fā)光強度(Im,ECL)。利用ImECL，我們可以實現(xiàn)對抗原的檢測。利用鏈霉親和素修飾的磁球(SA-SMBs)可以增加單個目標分子對應(yīng)的Ru(bpy)32+分子的數(shù)量，通過信號放大作用，

3、大大提高了Ru(bpy)32+分子的電化學氧化得到的第二個ECL波，從而提高了檢測方法的靈敏度。利用這種方法，我們實現(xiàn)了對CEA的檢測，線性范圍為1.0×10-14 mol/L～3.0×10-13mol/L。
　　 第二章中，我們引入電化學發(fā)光作為供體光源研究了一種新的共振能量轉(zhuǎn)移體系-電化學發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移體系(ECRET)。電化學發(fā)光試劑異魯米諾在過氧化氫存在的條件下，通過電化學反應(yīng)發(fā)出中心波長為460nm的藍色光充當能量供