分子光譜法研究染料及生物大分子與某些藥物的相互作用及其分析應(yīng)用.pdf

1、當(dāng)物質(zhì)分子受到光(電磁波)的照射時，會發(fā)生光的吸收、反射或透射以及光的發(fā)射、散射等現(xiàn)象。分子光譜即是將這些光現(xiàn)象進行分光所得到的光譜，它包含著物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、理化特性、反應(yīng)歷程等豐富的信息。分子光譜法則是以此為基礎(chǔ)對物質(zhì)進行測量和表征的分析方法，分子光譜分析是定性、定量分析研究物質(zhì)的常用分析技術(shù)，是測定和鑒別分子結(jié)構(gòu)的重要實驗手段，是化學(xué)反應(yīng)理論發(fā)展和實驗驗證的基礎(chǔ)。分子光譜根據(jù)吸收電磁波的范圍不同，可分為紫外、可見光譜和近紅外光譜、

2、紅外光譜等；根據(jù)電磁波的發(fā)射方式不同又可分為分子熒光、磷光和散射光譜等。本文采用分子光譜法研究染料及生物大分子與某些藥物的相互作用及其分析應(yīng)用：1、納它霉素對牛血清白蛋白的熒光猝滅作用，計算了不同溫度下結(jié)合位點數(shù)n，結(jié)合常數(shù)KA，以及對應(yīng)的熱力學(xué)參數(shù)△G，△H和△S；2、硫酸軟骨素與牛血清白蛋白的相互作用，研究體系的RRS和SOS光譜特征及其影響因素和分析應(yīng)用：3、研究赤蘚紅與撲爾敏的相互作用及其分析應(yīng)用；4、研究鹵代熒光素與西布曲明的

3、相互作用及其分析應(yīng)用：5、研究阿霉素與金屬離子和赤蘚紅三元離子締合物體系的光譜特征及其分析應(yīng)用。 1、牛血清白蛋白-納它霉素體系 在中性介質(zhì)中，采用熒光光譜和同步熒光光譜，研究了納它霉素與血清白蛋白間的相互作用。依據(jù)F(o)rster非輻射能量轉(zhuǎn)移機理探討了納它霉素與血清白蛋白相互結(jié)合時其給體、受體間的距離(r=1.08nm)和能量轉(zhuǎn)移效率(E=22.99％)，并用同步熒光技術(shù)考察了納它霉素對血清白蛋白構(gòu)象的影響。并根據(jù)

4、熱力學(xué)常數(shù)確定了該藥物與血清白蛋白之間的作用力類型主要為氫鍵和范德華力。此外，還研究了在中性介質(zhì)中，納它霉素與血清蛋白反應(yīng)形成結(jié)合產(chǎn)物，此時將導(dǎo)致蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光(λex/λem=285 nm/347 nm)猝滅，其猝滅值(△F)與納它霉素濃度成正比，據(jù)此可建立以血清蛋白為探針的熒光猝滅法測定酸奶中納它霉素的殘留量的新方法。 2、硫酸軟骨素-牛血清白蛋白體系 在pH 3.5的B-R緩沖溶液中，帶正電荷的牛血清白蛋白(BS

5、A)與帶負(fù)電荷的硫酸軟骨素(CS)在水溶液中能通過靜電相互作用形成BSA-CS聚合物體系。實驗以△λ=0的方式和熒光掃描的方式掃描分別得到體系的RRS光譜和SOS光譜，研究了牛血清白蛋白與硫酸軟骨素聚合物體系的共振瑞利散射(RRS)光譜和非線性二級散射光譜(SOS)光譜特征，實驗還發(fā)現(xiàn)當(dāng)牛血清白蛋白與硫酸軟骨素作用時會增強其RRS光譜和SOS光譜，且體系的RRS光譜增強程度與其中任一組分濃度增加成正比，基于此可建立起靈敏度高的測定CS和

6、BSA的RRS光譜分析的新方法，此外還探討了RRS增強的機理。 3.撲爾敏-赤蘚紅體系 3.1赤蘚紅褪色分光光度法測定撲爾敏 在弱酸性介質(zhì)中，馬來酸氯苯那敏(CPM)與赤蘚紅(ET)或曙紅Y(EY)陰離子借靜電引力和疏水作用力而形成離子締合復(fù)合物。溶液的吸收光譜發(fā)生變化，赤蘚紅體系發(fā)生明顯的褪色作用，最大褪色波長位于525 nm，CPM濃度在0.1～4.0 μg-mL-1范圍內(nèi)遵從比爾定律，ε為3.5×104L·m

7、ol-1·cm-1。方法靈敏度較高，選擇性好，操作簡便快速，用于片劑及尿樣中馬來酸氯苯那敏的測定，結(jié)果滿意。 3.2撲爾敏與赤蘚紅的熒光猝滅和共振散射光譜及其分析應(yīng)用 在pH4.4 B-R緩沖介質(zhì)中，撲爾敏(CPM)與赤蘚紅(ET)相互作用形成離子締合物，導(dǎo)致熒光和同步熒光猝滅及共振瑞利散射(RRS)的顯著增強并產(chǎn)生新的RRS光譜，最大RRS峰位于578 nm附近。其熒光猝滅程度及散射增強程度與撲爾敏濃度成線性關(guān)系，線性

8、范圍分別為：0.24～8.0μg·mL、0.08～3.6μg·mL-1。將方法用于尿樣中撲爾敏含量的快速測定，結(jié)果滿意。此外還討論了共振散射增強機理及熒光猝滅的原因。 4、西布曲明-鹵代熒光素體系 4.1鹵代熒光素與西布曲明的熒光猝滅和褪色光譜及其分析應(yīng)用 在弱酸性緩沖溶液中，乙基曙紅(EE)、赤蘚紅(ET)和熒光桃紅(PX)三種鹵代熒光素與鹽酸西布曲明(SH)形成離子締合物，導(dǎo)致吸收光譜發(fā)生變化和熒光猝滅。文

9、中研究了反應(yīng)產(chǎn)物的吸收和熒光光譜特征，適宜的反應(yīng)條件，據(jù)此發(fā)展了以鹵代熒光素為光譜探針的靈敏、簡便、快速測定SH的新方法。其中ET體系褪色反應(yīng)靈敏度最高，對SH的線性范圍為0.1～4.0μg·mL-1，檢出限為0.06μg·mL-1；PX-SH體系的熒光猝滅法對SH的線性范圍是0.2～4.6μg·mL-1(λex/λem=540 nm/560nm)，檢出限為0.09μg·mL-1。討論了離子締合反應(yīng)對熒光及吸收光譜的影響及鹵代熒光素?zé)晒?/p>

10、猝滅原因。 4.2鹵代熒光素與西布曲明相互作用的共振散射光譜及其分析應(yīng)用 用共振瑞利散射(RRS)法研究了，研究了乙基曙紅(EE)、赤蘚紅(ET)和熒光桃紅(PX)三種鹵代熒光素與鹽酸西布曲明(SH)的相互作用，發(fā)現(xiàn)乙基曙紅、赤蘚紅和熒光桃紅三種鹵代熒光素與鹽酸西布曲明(SH)形成了離子締合物導(dǎo)致兩體系產(chǎn)生強烈的RRS，它們的最大散射峰分別位于316 nm、345nm和370nm?？疾炝诉m宜的反應(yīng)條件及共存物質(zhì)的影響，在

11、一定范圍內(nèi)SH的濃度與RRS強度成正比，其檢出限分別為32 ng·nL-1(EE-SH體系)、28ng·mL-1(ET-SH體系)和21 ng-mL-1(PX-SH體系)。以ET-SH體系為例，由光偏振實驗，測得體系573 nm處的共振散射光譜偏振度P為0.95，表明體系的共振散射光譜主要由散射光構(gòu)成，基本不含共振熒光成分。本實驗還用討論了體系的共振散射增強的原因。 5、阿霉素-Me(Ⅱ)-鹵代熒光素體系 在弱酸性NaA

12、c-HAc介質(zhì)中，研究了阿霉素與金屬離子Cu(Ⅱ)和Pd(Ⅱ)形成的陽離子配合物和陰離子鹵代熒光素染料結(jié)合生成三元離子締合物的反應(yīng)，結(jié)果表明，三元離子締合物的形成使體系的共振瑞利散射強度(RRS)顯著增強，兩個金屬離子所形成的結(jié)合產(chǎn)物的RRS光譜特征相似，最大RRS峰均位于570nm附近。但引起的RRS增強的程度Pd(Ⅱ)>Cu(Ⅱ)，RRS的增量與阿霉素的濃度在一定范圍內(nèi)線性相關(guān)，據(jù)此建立了一種測定阿霉素的高靈敏度的分析方法。該方法的