版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、天然高分子憑借其生物相容性好、可降解、易修飾等多種性質(zhì),已成為制備納米材料的主要基材。通過自組裝制備的天然高分子納米載體更是由于其安全無毒、制備簡單、表面易修飾、載藥量高、控釋性能好等優(yōu)勢,在藥物及營養(yǎng)素遞送方面受到越來越多的關注。目前,提高納米粒子的穩(wěn)定性和功能性,并實現(xiàn)高效靶向遞送,已成為遞送領域研究的研究熱點。
本文以玉米醇溶蛋白(zein)為主要基材,通過自組裝的方式與兩種不同形式的多糖(陰離子多糖—羧甲基纖維素鈉和陽
2、離子多糖—季銨鹽殼聚糖)自組裝形成納米粒子。以疏水性藥物紫杉醇(PTX)和疏水性營養(yǎng)素姜黃素(Cur)為模型負載物,研究納米運載體系對疏水性物質(zhì)的包封、保護以及體外緩釋的性質(zhì),通過細胞實驗驗證載藥納米粒子的生物學特性。為進一步提高抗癌藥物的療效、降低毒副性,賦予運載體系定向性釋放的性質(zhì),在已制備的納米粒子表面形成一層單寧酸-金屬離子包被膜,通過膜的pH-響應性崩解,賦予納米粒子pH-響應性釋藥的性質(zhì)。
本文主要研究結果如下:<
3、br> 1.選擇PTX作為疏水模型藥物,通過自組裝方法制備負載PTX的玉米醇溶蛋白/羧甲基纖維素鈉納米粒子(PTX-zein/CMC納米粒子)。結果顯示當?shù)鞍踪|(zhì)與多糖質(zhì)量比為1∶3,投藥量為80μg/mL時,所得納米粒子粒徑為159.4 nm,載藥率高達93.5%。在此條件下可得到分散均勻的球形納米粒子,且其具有良好的pH穩(wěn)定性和儲藏穩(wěn)定性。體外緩釋實驗表明,相比于游離藥物的快速釋放,載藥納米粒子呈現(xiàn)明顯的緩釋特性。細胞吞噬實驗表明,
4、藥物敏感的HepG2細胞和藥物抗性的MCF-7細胞對香豆素6標記的納米粒子的細胞吞噬均呈時間依賴性。同時,對于藥物抗性的MCF-7細胞,在高給藥濃度下,載藥納米粒子比游離藥物顯示更強的細胞毒性。細胞凋亡實驗顯示,對于抗性細胞,載藥納米粒子組引起的細胞凋亡比例大于游離藥物的。免疫熒光實驗表明載藥納米粒子和游離的PTX均是通過促進微管的增生導致細胞凋亡。
2.研究陽離子多糖(季銨鹽殼聚糖,HTCC)與zein的組裝行為,利用自組裝
5、制備納米粒子,用于疏水性營養(yǎng)素Cur的負載。通過對殼聚糖季銨化改性,大大提高了殼聚糖在中性條件以及堿性條件下的溶解性。改變蛋白質(zhì)/多糖質(zhì)量比可以得到不同粒徑、不同多分散系數(shù)(PDI)、不同負載率的納米粒子。當固定多糖為HTCC1(Mw8.708×103),蛋白質(zhì)/多糖質(zhì)量比為1∶1時,所得納米粒子的負載率最高。與單純的zein納米粒子相比,形成的zein/HTCC納米粒子分布更加均勻,形狀更加規(guī)整。將Cur負載于納米粒子可顯著提高其光、
6、熱穩(wěn)定性,且在相同的處理條件下相比于游離Cur具有更強的抗氧化活性。
3.為了進一步提高構建的遞送體系的高效性,在之前的研究基礎上,引入了具有pH響應性的響應因子。基于單寧酸(TA)分子與蛋白質(zhì)之間具有較強相互作用的鄰苯三酚結構及其優(yōu)異的金屬螯合能力,以金屬離子為交聯(lián)劑在zein納米粒子表面形成一層金屬-有機涂層,成功構建了一種新型的具有pH響應性的納米載體(zein-TA/metal納米粒子)。通過透射電子顯微鏡(TEM)對
7、其微觀形貌進行觀察,發(fā)現(xiàn)這種雜化納米粒子具有更佳的分散性且粒徑更加均一,克服了大部分納米粒子在培養(yǎng)基中不穩(wěn)定的問題。傅里葉紅外光譜(FT-IR)分析表明,TA與金屬離子之間存在較強的配位作用,同時TA與蛋白質(zhì)之間也存在著氫鍵相互作用與靜電相互作用。使用X射線光電子能譜(XPS)對納米粒子表面元素進行分析,金屬離子特征峰的出現(xiàn)以及C/O比值的顯著變化均有效證明TA與金屬離子的引入。隨后以阿霉素(DOX)為模型藥物,對其包封率、緩釋性能進行
8、研究。結果顯示,相比于zein納米粒子,包被納米粒子對藥物的包封率顯著提高且在中性條件下(pH=7.4)具有良好的緩釋性能,阻止了突釋現(xiàn)象的發(fā)生。同時,由于TA-CuⅡ復合膜具有pH響應性,賦予包被納米粒子良好的pH響應性釋藥的性質(zhì)。
細胞吞噬實驗表明,與游離的DOX相比,通過內(nèi)吞作用進入細胞的納米粒子速度較緩慢;對于包被的納米粒子,由于對藥物的pH響應性釋放,孵育較長時間才能觀察到細胞內(nèi)DOX的紅色熒光。位于包被納米粒子表面
9、的TA可以原位還原金納米粒子,該體系為癌癥的光熱療法提供了新思路。
4.為了能更加精細的調(diào)控納米載體的pH響應性,利用TA對基體的粘附性以及金屬螯合能力、氨基與金屬之間的配位作用,在zein納米粒子中引入含有氨基的HTCC,在制備的zein/HTCC納米粒子表面包被一層金屬-有機涂層。同時利用TA-金屬離子以及氨基-金屬離子之間配位鍵的pH響應性,賦予納米粒子pH響應釋藥的特性。與zein/HTCC納米粒子相比,形成的包被納米
10、粒子(zein-HTCC/TA-metal納米粒子)分散性更好,粒徑分布更加均勻,形狀更加規(guī)整。FT-IR研究表明,TA與金屬離子之間存在較強的配位作用;同時TA,HTCC與蛋白質(zhì)之間也存在著靜電相互作用。XPS研究進一步驗證了包被納米粒子表面金屬離子和TA的存在。以DOX為藥物模型研究發(fā)現(xiàn),包被的納米粒子對藥物的包封率相比于zein/HTCC納米粒子也有顯著的提高。體外緩釋實驗表明以不同金屬離子作為交聯(lián)中心及金屬離子添加量的變化均會導
11、致載藥納米粒子釋放行為的變化。與zein-TA/metal納米粒子相比,zein-HTCC/TA-metal納米粒子呈現(xiàn)出更優(yōu)異的刺激響應性。
細胞吞噬實驗顯示未經(jīng)包被的納米粒子存在明顯的突釋現(xiàn)象,在培養(yǎng)基中即可快速釋放DOX。對于包被納米粒子,由于對藥物的pH響應性釋放,孵育較長時間才能觀察到較強的熒光。同時引入稀土元素,使其同時具有pH響應性和生物成像的功能。
5.考察金屬離子種類及化學計量比對TA-金屬離子包被
12、納米粒子(zein-TA/meta)性質(zhì)的影響。金屬離子種類可顯著影響殼層厚度致使納米粒子的粒徑不同;金屬離子濃度的增加會引起包被納米粒子粒徑的增加。在較低金屬離子濃度下,包被的納米粒子在培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性大大提到。但是對于TA-CuⅡ包被的納米粒子,隨著金屬離子濃度的增大,形成的納米粒子在培養(yǎng)基中穩(wěn)定性減小。隨后的FT-IR分析得出金屬離子的含量顯著影響TA與金屬離子的配位作用,從而影響包被納米粒子吸收峰的移動;XPS進一步驗證包被納米
13、粒子中金屬離子以及TA的存在,且金屬離子的濃度影響包被納米粒子表面元素含量。
細胞吞噬實驗表明細胞對zein納米粒子和zein-TA/metal納米粒子的吞噬均呈現(xiàn)時間及濃度依賴性。細胞對包被納米粒子表現(xiàn)出更快的吞噬速率以及更高的吞噬量。金屬離子種類以及添加量影響細胞對納米粒子的吞噬效率。通過激光共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察短時間細胞吞噬,細胞對包被納米粒子粘附性更強,納米粒子進入細胞速率更快。網(wǎng)格蛋白介導的吞噬作用是包被納米
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 貴州農(nóng)業(yè)多功能性研究.pdf
- 多功能性納米載藥系統(tǒng)的研究.pdf
- 保定市鄉(xiāng)村地域多功能性評價研究.pdf
- 湖南省鄉(xiāng)村地域多功能性評價及發(fā)展決策.pdf
- 試論農(nóng)業(yè)的多功能性及其價值
- 福建省農(nóng)業(yè)多功能性研究.pdf
- 基于農(nóng)業(yè)多功能性的生態(tài)補償研究.pdf
- 基于聚苯胺的多功能性織物的研制.pdf
- 試論詞的兼類和詞的多功能性
- 多功能性聚苯胺的制備及其性能研究.pdf
- 多功能性Heusler合金的開發(fā)與物性研究.pdf
- 基于農(nóng)業(yè)多功能性的中國經(jīng)濟的發(fā)展
- 外文翻譯--石墨烯基催化劑在有機轉(zhuǎn)換中的多功能性
- 外文翻譯--石墨烯基催化劑在有機轉(zhuǎn)換中的多功能性
- 玉米醇溶蛋白基復合膜的制備及乙醇-水分離性能評價.pdf
- 外文翻譯--石墨烯基催化劑在有機轉(zhuǎn)換中的多功能性(英文)
- 誘導多功能性干細胞-汕頭大學醫(yī)學院醫(yī)學細胞生物學精品課程
- 外文翻譯--石墨烯基催化劑在有機轉(zhuǎn)換中的多功能性(中文)
- 玉米醇溶蛋白遺傳資源研究信息平臺的構建.pdf
- 水解酶催化多功能性及小分子調(diào)控反應研究.pdf
評論
0/150
提交評論