毛細(xì)管電泳技術(shù)在玉米代謝組學(xué)中的應(yīng)用研究.pdf

1、毛細(xì)管電泳作為一種快速、高效的分離分析技術(shù),已應(yīng)用于許多領(lǐng)域。但是由于毛細(xì)管進(jìn)樣體積小以及在柱檢測(cè)光程短,極大地限制了毛細(xì)管電泳檢測(cè)靈敏度的提高。目前,為了改善毛細(xì)管電泳的檢測(cè)靈敏度,降低樣品的檢測(cè)限,各種樣品濃縮/富集的方法得以研究和發(fā)展,并且應(yīng)用到了各種研究領(lǐng)域。本論文應(yīng)用毛細(xì)管區(qū)帶電泳技術(shù),并結(jié)合樣品在線富集的方法對(duì)玉米的代謝組分進(jìn)行了分析測(cè)定。主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　1.用樣品堆積和動(dòng)態(tài)pH連接兩種富集技術(shù)來(lái)提高水溶性維生

2、素的檢測(cè)靈敏度。當(dāng)應(yīng)用樣品堆積富集方法時(shí),9種水溶性維生素都能得到富集并且達(dá)到基線分離。而當(dāng)應(yīng)用動(dòng)態(tài)pH連接的富集方法時(shí),只有煙酸和葉酸兩種維生素富集并分離。相比之下,樣品堆積比動(dòng)態(tài)pH連接更適合用于多數(shù)水溶性維生素的富集。采用樣品堆積技術(shù),所測(cè)維生素的檢測(cè)限為6-119ng/mL或2.7×10-8-53.4×10-8M(S/N=3),根據(jù)遷移時(shí)間和峰面積計(jì)算得到的RSD都小于3.5％,校準(zhǔn)方程的線性相關(guān)系數(shù)都在0.9969以上。優(yōu)化好

3、的樣品堆積方法用于分析五種玉米樣品,成功檢測(cè)到吡哆醇和煙酸兩種水溶性維生素,其含量分別為2.5±0.11μg/g-6.67±0.17μg/g和0.25±0.01μg/g-0.67±0.08μg/g。兩種維生素的回收率為87%-106%,RSD都小于6.81%。
　　2.用樣品堆積和動(dòng)態(tài)pH連接兩種富集技術(shù)來(lái)提高嘌呤堿和嘧啶堿的檢測(cè)靈敏度。應(yīng)用兩種富集方法,7種嘌呤堿和嘧啶堿都能得到富集并且達(dá)到基線分離。但二者相比較,動(dòng)態(tài)pH連接的