葡萄糖氧化酶和過氧化氫模擬酶協(xié)同催化制備低聚果糖的研究.pdf

1、低聚果糖（fructooligosaccharides，F(xiàn)OS）具有調(diào)節(jié)體內(nèi)菌群平衡、降低血脂、促進礦物質(zhì)吸收、排毒和抗齲齒等生理功能，是一種新型的功能性甜味劑和飼料添加劑。
　　 目前市場上的低聚果糖產(chǎn)品大多是以蔗糖為原料，通過β-果糖基轉(zhuǎn)移酶或β-呋喃果糖苷酶的催化作用而生成的，純度在60％以下，其中葡萄糖占25～38％，蔗糖占約10％～25％，不利于糖尿病人和肥胖患者服用，因而限制了低聚果糖的應用范圍。
　　 雖然

2、已有多酶法（果糖基轉(zhuǎn)移酶+葡萄糖氧化酶+過氧化氫酶）制備高純度低聚果糖的報道，但因過氧化氫酶價格昂貴且不能重復利用，該法未能應用于工業(yè)化生產(chǎn)。本文采用氯化血紅素作為過氧化氫模擬酶，并固定化，使多酶法具有工業(yè)化生產(chǎn)的潛力。
　　 對葡萄糖氧化酶（GOD）生產(chǎn)菌（黑曲霉40348）的產(chǎn)酶條件進行優(yōu)化。優(yōu)化培養(yǎng)基成分為：蔗糖5％，葡萄糖5％，硝酸鈉0.5％，硫酸鎂0.07％，氯化鉀0.05％，硫酸亞鐵0.001％，磷酸氫二鉀0.2％，

3、碳酸鈣0.3％。優(yōu)化培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度為30℃，搖床轉(zhuǎn)速200r/min，發(fā)酵周期為5d。經(jīng)過一系列的工藝優(yōu)化，得到發(fā)酵液酶活為5.05U/mL。
　　 對葡萄糖氧化酶進行固定化并對固定化葡萄糖氧化酶的部分酶學性質(zhì)進行研究。葡萄糖氧化酶的固定化優(yōu)化條件為：D309弱堿性陰離子交換樹脂作為載體，給酶量/載體為300U/1.0g，戊二醛濃度0.05％，交聯(lián)溫度為35℃，交聯(lián)時間為4h。最終得到47U/g的固定化葡萄糖氧化酶。固定化

4、葡萄糖氧化酶的最適pH為6，最適溫度為40℃。
　　 利用氯化血紅素（Hemin）模擬過氧化氫酶并對其進行固定化。固定化氯化血紅素的條件為：D309弱堿性陰離子交換樹脂作為載體，給酶量/載體為15mg/1.0g，戊二醛濃度0.05％，交聯(lián)溫度為35℃，交聯(lián)時間為8h。最終得到模擬酶活力為52U/g的固定化氯化血紅素。
　　 在固定化果糖基轉(zhuǎn)移酶生產(chǎn)低聚果糖的基礎上，通過加入固定化葡萄糖氧化酶和固定化氯化血紅素將生產(chǎn)過程中