鼠李糖脂在微乳毛細管電動色譜中的應(yīng)用.pdf

1、微乳毛細管電動色譜(MEEKC)是在膠束毛細管電動色譜(MEKC)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種電泳新技術(shù)。鼠李糖脂是近年來應(yīng)用較為廣泛的生物表面活性劑，表面活性很高。本論文首次將鼠李糖脂應(yīng)用于MEEKC，旨在解決經(jīng)典微乳體系中離子型表面活性劑用量過多造成的焦耳熱過大、柱效下降、分析時間過長等問題。論文分四個部分:
　　 1.通過發(fā)酵法制備鼠李糖脂，經(jīng)過分離純化得到鼠李糖脂提取物，通過高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜法(HPLC-ESI-MS)確

2、定了提取物中鼠李糖脂同系物的組成及相對質(zhì)量分數(shù)。通過臨界膠束濃度(CMC)的測定對鼠李糖脂的表面活性做了初步探討。結(jié)果表明，該鼠李糖脂提取物至少由九種同系物組成。在弱堿性條件下(pH7.5-9，0)，pH的變化對鼠李糖脂的表面活性有顯著影響。pH小于9.0時，CMC隨著pH的升高而降低，在pH9.0處達到最低值；pH大于9.0時，CMC隨著pH值的升高而逐漸升高。這是氫鍵和極性頭基間的靜電排斥力共同作用的結(jié)果。
　　 2.以該鼠

3、李糖脂提取物為表面活性劑制備了微乳液，并探討了該微乳體系穩(wěn)定性的影響因素。通過微乳液滴粒徑和ζ電位的測定考察了pH值及添加物對該微乳體系微結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果顯示，該微乳體系穩(wěn)定性受溫度、pH值、表面活性劑濃度和助表面活性劑影響較大。微乳液滴的粒徑及ζ電位絕對值都隨pH值的升高呈增大趨勢，只在pH9.0處例外。少量十二烷基硫酸鈉(SDS)的添加使微乳液滴粒徑和ζ電位絕對值增大，低濃度正丁醇的加入使微乳液滴粒徑增大，而ζ電位絕對值減小。

4、>　　 3.將鼠李糖脂微乳液應(yīng)用于MEEKC，建立了新型微乳體系，并系統(tǒng)研究了微乳組成對時間窗口的影響。以乙腈為電滲流標記物測定電滲流時間，以強疏水性化合物菲為標記物測定微乳液滴的遷移時間，考察了MEEKC時間窗口的變化。研究表明，pH值、鼠李糖脂濃度、緩沖液濃度、正丁醇的添加均使時間窗口增大。在實際應(yīng)用工作中可根據(jù)需要調(diào)節(jié)分析窗口，達到良好的分離效果。
　　 4.最后，利用該微乳體系，快速分離了潑尼松，潑尼松龍和氫化可的松，

5、并與經(jīng)典微乳體系的分離效果做了比較。優(yōu)化后的微乳體系組成為:001%(W/W)鼠李糖脂-0.8%(W/W)正庚烷-99.1%(W/W)80 mmol/L硼砂緩沖液(pH9.2)。該微乳體系中，pH和緩沖液濃度對分離的選擇性起到了重要作用。當分離電壓為20 kV，柱溫為20℃時，潑尼松、潑尼松龍、氫化可的松在9.6 min內(nèi)達到了基線分離，三種分析物的遷移時間和峰面積相對標準偏差分別在0.9%和3.0%以內(nèi)，具有良好的重現(xiàn)性。與經(jīng)典微乳體