微乳毛細(xì)管電動(dòng)色譜同時(shí)分離水溶性和脂溶性維生素.pdf

1、維生素是維持機(jī)體正常生長(zhǎng)的必不可少的化合物，對(duì)人體和動(dòng)物的生理活動(dòng)有非常重要的作用，可以分為水溶性維生素和脂溶性維生素。微乳毛細(xì)管電動(dòng)色譜(MEEKC)可以同時(shí)分離分析水溶性和脂溶性的物質(zhì)。本論文的研究主要基于MEEKC的分析測(cè)定技術(shù)，建立快速分析脂溶性物質(zhì)的新型微乳體系，并建立快速分析水溶性和脂溶性維生素的MEEKC的方法。本文分為以下四部分。 第一部分：對(duì)各種維生素進(jìn)行了簡(jiǎn)介，對(duì)電化學(xué)分析法、分光光度法、熒光光度法、高效液相

2、色譜法、毛細(xì)管電泳法等各種分析方法在維生素測(cè)定中的應(yīng)用進(jìn)行了綜述，并介紹了MEEKC法的基本原理、影響其分離的因素以及應(yīng)用。 第二部分：在MEEKC經(jīng)典微乳體系的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，建立了新型微乳體系，旨在解決MEEKC分析脂溶性物質(zhì)時(shí)間太長(zhǎng)的問(wèn)題，而解決問(wèn)題的關(guān)鍵是減少離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)的用量。為了減少SDS的用量，又能保證微乳體系的穩(wěn)定性，同時(shí)具備足夠的分離效率，本文采用了兩種方式改進(jìn)微乳體系：一、采用非離

3、子表面活性劑與SDS復(fù)配；二、大幅度增加助表面活性劑。研究表明：兩種體系均能使脂溶性物質(zhì)分析速度加快，但前者分離效率不如后者。大量的助表面活性劑使微乳粒子變得松散，有利于脂溶性維生素在油相和水相之間的進(jìn)出，縮短了脂溶性物質(zhì)的分離時(shí)間，提高了分離效率。 第三部分：維生素A、D3、E是三種最常見(jiàn)的脂溶性維生素，利用新型微乳體系，建立了MEEKC快速分析脂溶性維生素A、D3、E的方法。該微乳液的組成為：1.2％(W/W)SDS-21％

4、(V/V)正丁醇-18％(V/V)乙腈—0.85/0(W/W)正已烷-20mmol/LpH8.4.H3BO3-Na2B4O7緩沖液。該微乳體系中，助表面活性劑正丁醇和有機(jī)溶劑乙腈對(duì)脂溶性維生素的分離起到了重要的作用。當(dāng)分離電壓為25kV，柱溫為25℃時(shí)，維生素A、D3、E在13min內(nèi)達(dá)到基線分離。三種脂溶性維生素的遷移時(shí)間和峰面積的RSD(n=5)小于2.5％和4.5％；維生素A、D3、E分別在20～1000μg/mL，5～1000μ

5、g/mL，5～1000μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈線性關(guān)系；檢出限(S/N=3)分別為12、0.72、0.29μg/mL。該體系直接應(yīng)用于市售維生素E膠囊的測(cè)定，測(cè)定結(jié)果與標(biāo)示值相符。 第四部分：利用該微乳體系對(duì)13種脂溶性維生素和水溶性維生素進(jìn)行了快速分析。該微乳體系中，微乳體系中緩沖溶液的pH和濃度以及正丁醇和乙腈的用量分別對(duì)水溶性維生素和脂溶性維生素的分離起到了重要的作用。當(dāng)分離電壓為25kV，柱溫為25℃時(shí)，13種維生素在