青島沿海四株大型海藻代謝產(chǎn)物及其生物活性篩選的研究.pdf

1、海洋生物具有產(chǎn)生豐富多樣的次生代謝產(chǎn)物的能力，其結(jié)構(gòu)新穎、生物活性獨(dú)特，引起了國(guó)內(nèi)外科學(xué)家的高度重視。植物病原菌對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的嚴(yán)重威脅，化學(xué)農(nóng)藥的殘留問題嚴(yán)重、開發(fā)費(fèi)用過高，以及海洋細(xì)菌對(duì)海洋設(shè)備的污損問題，都亟待解決。因此找尋環(huán)境友好型的新型農(nóng)藥和天然防污材料的模板化合物是當(dāng)今刻不容緩的研究課題。
　　海黍子(Sagassum kjellmanianum)、鼠尾藻(Sargassum thunbergii)、酸藻(Desmares

2、tia viridis)和扇形擬伊藻(Ahnfehiopsis flabelliformi)是青島沿海四種常見海藻，本論文通過對(duì)這四種海藻的化學(xué)和生物篩選來展開研究，以期獲得環(huán)境友好型農(nóng)藥和防污材料。
　　干燥并粉碎四株大型海藻樣品，分別運(yùn)用有機(jī)溶劑提取、萃取、梯度洗脫、薄板層析等手法，對(duì)所選的四株大型海藻進(jìn)行了初步的提取分離，然后運(yùn)用高效液相色譜儀(HPLC)對(duì)其粗提物的各梯度洗脫組分進(jìn)行分析；并以5株農(nóng)業(yè)病原菌和4株海洋細(xì)菌作

3、為供試菌株對(duì)其不同極性組分的代謝產(chǎn)物進(jìn)行初步的抑菌活性篩選，發(fā)現(xiàn)海黍子為優(yōu)勢(shì)藻種，次級(jí)代謝產(chǎn)物豐富、抑菌活性較好。并以海黍子為研究對(duì)象，進(jìn)行次級(jí)代謝產(chǎn)物的分離純化。主要結(jié)論如下：
　　1.四種海藻的篩選：將在青島沿海采集到的海黍子、鼠尾藻、酸藻和扇形擬伊藻四種大型海藻的干燥藻體粉碎，分別使用乙醇浸提、超聲提取后，濾液蒸干得浸膏，獲得的乙酸乙酯相進(jìn)行柱層析梯度洗脫。對(duì)每種藻體得到的各洗脫組分進(jìn)行HPLC分析和初步的抑菌活性篩選。篩選

4、結(jié)果表明：海黍子化合物豐富度高于其它三種海藻。抑菌活性實(shí)驗(yàn)中，在抑制農(nóng)業(yè)病原菌活性方面，四株海藻的各梯度洗脫組分對(duì)五株植物病原真菌(陽(yáng)性對(duì)照為兩性霉素B)均能產(chǎn)生一定的抑制效果，海黍子表現(xiàn)出了較好的抑制活性，其中Fr2對(duì)小麥赤霉菌(XC)以及番茄早疫菌(FZ)的抑制效果最強(qiáng)，抑菌圈分別為11.4mm和11.3mm(陽(yáng)性對(duì)照分別為14.0mm和15.5mm)；在抑制海洋細(xì)菌(陽(yáng)性對(duì)照為氯霉素)活性方面，四種海藻也均表現(xiàn)出了一定的抑制活性，

5、其中也以海黍子抑菌活性最明顯，F(xiàn)r4對(duì)金黃色葡萄球菌(SA)的抑菌圈直徑達(dá)17.5mm(陽(yáng)性對(duì)照為22.5mm)，F(xiàn)r2和Fr4對(duì)蘇云金芽孢桿菌(BT)的抑菌圈直徑分別達(dá)19.5mm和20.7mm(陽(yáng)性對(duì)照為24.0mm)。另外，四株海藻中以海黍子生物量最大，采集較方便。綜合以上考慮，選擇海黍子作為后續(xù)研究對(duì)象。
　　2.海黍子次級(jí)代謝產(chǎn)物和初步的抑菌活性研究：干燥并粉碎的海黍子，經(jīng)過溶劑浸取、萃取，制成浸膏后，以常規(guī)的硅膠柱層析

6、、凝膠Sephadex LH-20柱層析、制備薄層層析(pTLC)以及重結(jié)晶等分離手段，分離純化得到單體化合物。綜合利用各種現(xiàn)代波譜技術(shù)以及與標(biāo)準(zhǔn)品和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)比對(duì)的方法，進(jìn)行化合物及結(jié)構(gòu)鑒定。在分離純化過程中，共獲得5個(gè)單體化合物，均為首次從該藻種中獲得。運(yùn)用1H-NMR、13C-NMR、DEPT等現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)，鑒定出其中3個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。對(duì)海黍子17個(gè)梯度洗脫組分進(jìn)行了抑菌活性測(cè)定，得到的結(jié)論與初次篩選實(shí)驗(yàn)中基本保持一致。對(duì)5個(gè)單體