黃花苜蓿MfDREB1和MfDREB1s基因轉(zhuǎn)化煙草的研究.pdf

1、分類號(hào)：QZ墨UDC：577學(xué)校代碼：!Q12魚論文題目編號(hào)：學(xué)號(hào)：31QQ塞Q魚Q研究生：胡旦都塑指導(dǎo)教師：哈勘匭直拉麴援專業(yè)：生塑絲堂皇僉王生物堂研究方向：植物僉壬生翅堂叢基國(guó)王程所在學(xué)院：生金型堂堂醫(yī)2013年5月12日內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文黃花苜蓿岣。尺EBJ和歸尺EBJs基因轉(zhuǎn)化煙草的研究摘要本研究將黃花苜蓿岣DRE8J『和歸尺EBJs基因轉(zhuǎn)入模式植物煙草中，獲得了T，代轉(zhuǎn)基因植株，并對(duì)其抗寒性進(jìn)行了初步鑒定。以植物雙元表達(dá)載

2、體pPzP221為基本骨架，利用組成型啟動(dòng)子C心Ⅳ35S和脅迫誘導(dǎo)型啟動(dòng)子加鮒基因啟動(dòng)子，分別構(gòu)建了蚴呦J『和蚴蚴J『s基因的兩種植物表達(dá)載體，并通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化煙草。對(duì)獲得的T0代慶大霉素抗性植株進(jìn)行PCR檢測(cè)，初步證明外源基因已整合到煙草基因組中。經(jīng)T0代轉(zhuǎn)基因植株自交，獲得了T1代轉(zhuǎn)基因煙草種子。用40mg／L的慶大霉素篩選T1代，對(duì)生長(zhǎng)正常的植株進(jìn)行寒冷脅迫處理，分析了轉(zhuǎn)基因植物中目的基因下游靶基因MERDJ『伽的表達(dá)情況。

3、主要研究結(jié)果如下：1)共獲得78株轉(zhuǎn)蚴呦J和岣∞尺EBJ7s基因的Tl代株系，其中35S：MmREBl23株、35S：M仍REBls22株、rd29A：M仍REBll4株、rd29A：MmREBls19株；2)獲得38株轉(zhuǎn)空質(zhì)粒的對(duì)照株系，其中35S：NoS16株、rd29A：NOS22株；3)對(duì)下游基因m!ERDJ伽的半定量分析結(jié)果表明，在寒冷脅迫下35S：MmREBl和35S：M仍REBls轉(zhuǎn)基因煙草中抗逆相關(guān)基因MERDJ伽的表達(dá)