用2-氨基嘌呤熒光探針識別單堿基多態(tài)性方法的研究.pdf

1、DNA分子是人體最主要的遺傳物質(zhì)，單堿基是DNA分子的結(jié)構(gòu)與功能的基本單位，在很多情況下，DNA的突變和損傷是從單堿基的突變開始的，因此研究單堿基的多態(tài)性有很重要的意義。
　　 現(xiàn)如今，利用帶有標記且已知序列的寡聚核苷酸探針識別單堿基多態(tài)性是環(huán)境毒理學(xué)研究領(lǐng)域的重要課題。在近幾十年中，熒光探針的種類在增多，功能在發(fā)展，其中2-氨基嘌呤是一種類嘌呤物，其本身具有良好的熒光性，是被廣泛認可的熒光探針。本文研究了2-氨基嘌呤在識別單堿

2、基多態(tài)性過程中熒光屬性的變化，主要包括三部分:
　　 (1)改變寡聚核苷酸單鏈中2-氨基嘌呤兩側(cè)相鄰堿基的類型，形成由堿基ATCG組成的十六種微環(huán)境，檢測2-氨基嘌呤在這十六種微環(huán)境中熒光屬性的變化情況。
　　 (2)用2-氨基嘌呤探針單鏈與其對位分別為ACGT四種堿基的互補序列寡聚核苷酸單鏈雜交，檢測2-氨基嘌呤在與對位不同堿基配對時，其熒光性質(zhì)的變化，通過分析尋找2-氨基嘌呤熒光特性變化與堿基類型變化之間的關(guān)系，從而

3、可以通過熒光特性的表征來達到識別單堿基類型的目的。
　　 (3)用2-氨基嘌呤探針單鏈與其對位位置無堿基的寡聚核苷酸單鏈雜交，檢測2-氨基嘌呤在對位堿基缺失狀態(tài)下熒光性質(zhì)的變化，通過分析建立2-氨基嘌呤熒光特性變化與堿基缺失態(tài)之間的關(guān)系，從而可以通過熒光特性的表征來達到識別單堿基是否出現(xiàn)缺失行為。
　　 分析了2-氨基嘌呤識別單堿基多態(tài)性的過程中，由于受到微環(huán)境的變化的影響而出現(xiàn)的適用性差異，并初步建立了2-氨基嘌呤在相