EPA和DHA對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的C2C12肌管細(xì)胞肌肉蛋白降解的影響.pdf

1、肌肉作為機(jī)體內(nèi)主要的代謝活動(dòng)中心，是體內(nèi)蛋白質(zhì)最大的儲(chǔ)備庫(kù)，為多種器官（如心臟、肝和大腦）提供能量。在體內(nèi)肌肉蛋白的合成和降解是一種動(dòng)態(tài)平衡，其調(diào)控機(jī)制較為復(fù)雜。免疫應(yīng)激誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可以導(dǎo)致肌肉蛋白質(zhì)的降解，但其具體機(jī)制尚未可知。本研究以分化的C2C12肌管細(xì)胞為研究對(duì)象，旨在探討脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致肌管蛋白降解的作用，并且探討二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸（DHA）兩種 n-3多不飽和脂肪酸（PUFA）是否能夠

2、對(duì)LPS誘導(dǎo)的肌肉蛋白降解有調(diào)控作用。
　　本研究首先選取不同濃度（10 ng/mL、100 ng/mL、1000 ng/mL）LPS刺激C2C12肌管細(xì)胞，采用RT-PCR方法檢測(cè)炎性細(xì)胞因子TNF-α和IL-6的表達(dá)，確定 LPS最佳刺激濃度并建立穩(wěn)定的免疫應(yīng)激模型。采用最佳濃度1000 ng/mL LPS刺激 C2C12肌管細(xì)胞0 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h，檢測(cè)肌肉蛋白質(zhì)降解標(biāo)志基因

3、MAFbx和 MuRF1在此時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量，結(jié)果顯示在刺激12 h和24 h時(shí) MuRF1、IL-1β和 TLR4的表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.05）。利用 Western blot方法檢測(cè)LPS刺激 C2C12肌管細(xì)胞12 h后Akt/Foxo、mTOR和P38信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)僅 Akt和 Foxo1蛋白磷酸化水平明顯降低。研究了添加營(yíng)養(yǎng)素 EPA和 DHA對(duì) LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)引起的肌肉蛋白質(zhì)降解的調(diào)控作用，結(jié)果顯示EP

4、A組和 DHA組與 LPS組相比， TNF-α、IL-1β和 IL-6的基因表達(dá)顯著降低（P＜0.05）， NF-κB的表達(dá)受到顯著抑制。然而， EPA和DHA對(duì) LPS引起的MuRF1表達(dá)顯著上調(diào)無(wú)明顯抑制作用。發(fā)現(xiàn) EPA和DHA組的Akt磷酸化水平與 LPS組相比無(wú)明顯差異，說(shuō)明 EPA和 DHA 可能對(duì) Akt信號(hào)通路未產(chǎn)生影響，因而對(duì) MuRF1上調(diào)表達(dá)無(wú)明顯的抑制作用。肌肉萎縮是指當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)降解超過(guò)蛋白合成時(shí)，會(huì)導(dǎo)致