簡介：過氧化物酶體增殖物激活受體是一種由致密分子構(gòu)成的類固醇受體屬于由配體激活的Ⅱ型核受體超家族成員該實驗擬運用體外細胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)對上述問題進行研究以期為臨床上使用PPARS配體防治動脈粥樣硬化提供更完善的實驗依據(jù)方法1采用THP1單核細胞加佛波醇PMA40NGML培養(yǎng)1624H誘導(dǎo)分化為巨噬細胞加入OXLDL50UGML共同培養(yǎng)24H以上誘導(dǎo)分化為泡沫細胞應(yīng)用RTPCR測定PPARΑ、?；虮磉_加入PPARΑ配體CLOFIBRATE、PPARΓ配體PIOGLITAZONE進行干預(yù)24H后收集細胞培養(yǎng)上清液用ELISA法測定細胞培養(yǎng)上清液中炎癥因子IL6、TNFΑ及基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2、MMP9濃度GELATINZYMOGRAPHY測定MMPS活性2誘導(dǎo)THP1分化為巨噬細胞加入胰島素01UM繼續(xù)培養(yǎng)分別于1H、2H、4H、8H、10H、12H、24H抽提細胞總RNA對PPARΓMRNA行RTPCR半定量分析以同一時段未加胰島素培養(yǎng)之巨噬細胞作對照巨噬細胞誘導(dǎo)成功后換用含3‰胎牛血清PRMI1640培養(yǎng)基分別加入胰島素025UM、05UM繼續(xù)培養(yǎng)48H提取總蛋白對PPARΓ行WESTERNBLOT檢測誘導(dǎo)THP1分化為巨噬細胞根據(jù)干預(yù)因子不同分組1單純巨噬細胞組2PIOGLITAZONE20UM組3PIOGLITAZONE20UM胰島素RIO25UM組4PIOGLITAZONE20UM胰島素RIO5UM組同時培養(yǎng)24H收集細胞培養(yǎng)上清液ELISA法測定IL6、TNFΑ、MMP9濃度GELATINZYMOGRAPHY測定MMP9活性3誘導(dǎo)THP1單核細胞分化為巨噬、泡沫細胞加入PPARΑ配體CLOFIBRATE、PPARΓ配體PIOGLITAZONE進行干預(yù)收集24H和48H細胞培養(yǎng)上清液用REALTIMEPCR、WESTERNBLOT分別檢測不同分化階段和不同干預(yù)條件下細胞的EMMPRIN基因和蛋白水平ELISA法測細胞培養(yǎng)上清液中MMP9濃度GELATINZYMOGRAPHY法測MMP9活性結(jié)論提示泡沫細胞中有PPARΑ、?；虮磉_PPARΑ、Γ配體均有利于抑制動脈粥樣硬化斑塊局部炎癥反應(yīng)PPARΓ配體還可降低基質(zhì)金屬蛋白酶的釋放并抑制其活性對增強斑塊的穩(wěn)定性有利胰島素對巨噬細胞PPAR?；?、蛋白的表達均無顯著影響胰島素可消弱PPARΓ配體抑制巨噬細胞分泌IL6、TNFΑ、MMP9的作用推測胰島素對PPARΓ的活性可能存在抑制作用單核細胞向巨噬細胞的分化誘導(dǎo)EMMPRIN表達而進一步向泡沫細胞分化對其表達無影響PPARΑ、Γ配體均可抑制EMMPRIN的表達下調(diào)EMMPRIN可能是PPARS配體抑制粥樣斑塊局部MMPS產(chǎn)生的機制之一

簡介：猴病毒40SIMIANVIRUS40SV40是一種DNA腫瘤病毒在體外可以轉(zhuǎn)化細胞并誘發(fā)動物體內(nèi)產(chǎn)生腫瘤在人類多種腫瘤中已檢測到SV40基因的存在和表達。SV40與人類腫瘤關(guān)系密切它的致瘤性和轉(zhuǎn)化細胞能力主要與其編碼的早期蛋白T抗原TANTIGENTAG有關(guān)。SV40TAG能夠和抑癌蛋白P53和RB等結(jié)合并使之失活導(dǎo)致細胞生長失控和惡性增殖被認為是SV40TAG致瘤發(fā)生的重要機制。SV40TAG可以整合入細胞基因組中破壞其結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性反式激活細胞基因的表達并啟動宿主DNA的復(fù)制轉(zhuǎn)錄等。SV40TAG對細胞轉(zhuǎn)化起決定性作用與細胞增殖及腫瘤發(fā)生密切相關(guān)它可以誘發(fā)轉(zhuǎn)基因動物產(chǎn)生多種類型腫瘤被廣泛用于腫瘤發(fā)生機制的研究。利用SV40TAG基因與組織表達特異性的啟動子相結(jié)合已經(jīng)成功制備多種轉(zhuǎn)基因小鼠腫瘤模型。HKATPASE基因在胃壁細胞中特異性表達利用胃壁細胞特異性HKATPASEΒ亞基啟動子建立SV40TAG基因轉(zhuǎn)基因小鼠胃癌模型可用于胃癌發(fā)病機制的研究同時為胃癌的預(yù)防和治療提供有力的工具。在以往研究的基礎(chǔ)上本實驗將HKATPASEΒ亞基啟動子驅(qū)動表達SV40TAG基因的真核表達載體PCDNA31HKSV轉(zhuǎn)染入SGC7901、EC9706和KB細胞中通過G418篩選和擴大培養(yǎng)獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系。應(yīng)用PCR、RTPCR和免疫細胞化學(xué)染色方法檢測SV40TAG基因在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞中的整合與表達情況并且觀察SV40TAG基因的表達對人胃癌細胞SGC7901生物學(xué)特性的影響探討SV40TAG的作用機制及SV40TAG基因表達與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系為進一步轉(zhuǎn)基因動物模型的構(gòu)建奠定理論及實驗基礎(chǔ)。材料與方法1質(zhì)粒的擴增、提取和酶切鑒定提取質(zhì)粒PCDNA31、PCDNA31HKSV與PCDNA31SV利用限制性內(nèi)切酶酶切鑒定質(zhì)粒將質(zhì)粒用BAMHⅠ酶切瓊脂糖凝膠電泳鑒定。2細胞轉(zhuǎn)染利用脂質(zhì)體LIPOFECTAMIM2000將含有SV40TAG基因的真核表達載體PCDNA31SV和PCDNA31HKSV轉(zhuǎn)染入SGC7901、EC9706和KB細胞中用G418進行篩選將獲得的陽性細胞克隆擴大培養(yǎng)得到體外穩(wěn)定傳代的轉(zhuǎn)染細胞系。3檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞中SV40TAG基因的表達SV40TAG基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后從DNA、RNA和蛋白質(zhì)三個水平上檢測SV40TAG基因的整合和表達。提取轉(zhuǎn)染及未轉(zhuǎn)染細胞的基因組DNA利用TAG基因特異性引物PCR擴增檢測SV40TAG基因的表達提取細胞總RNARTPCR檢測SV40TAG基因MRNA的表達免疫細胞化學(xué)染色檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及未轉(zhuǎn)染細胞中SV40TAG的表達。4檢測轉(zhuǎn)染SV40TAG基因的SGC7901細胞生物學(xué)特性變化MTT法檢測SV40TAG基因轉(zhuǎn)染前后SGC7901細胞增殖能力變化應(yīng)用流式細胞術(shù)進行細胞周期分析。5統(tǒng)計學(xué)處理SPSS100統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)值用均數(shù)±標準差±S表示。應(yīng)用單因素方差分析進行組間差異比較以Α005為檢驗水準。結(jié)果1質(zhì)粒的酶切鑒定PCDNA31HKSV用BAMHⅠ單酶切電泳可見到約27KB與64KB兩條DNA條帶PCDNA31SV用BAMHⅠ單酶切電泳可見到約27KB與54KB兩條DNA條帶PCDNA31用BAMHⅠ單酶切電泳僅見到一條54KB的DNA條帶與預(yù)期結(jié)果相符可用于下一步的實驗。2PCR各組細胞均可擴增出443BP的內(nèi)參照GAPDH條帶PCDNA31HKSV與PCDNA31SV穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的SGC7901、EC9706和KB細胞均可擴增出618BP的SV40TAG基因特異性條帶未轉(zhuǎn)染細胞與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞均無此條帶出現(xiàn)。3RTPCR各組細胞均擴增出443BP的內(nèi)參照GAPDH條帶PCDNA31HKSV與PCDNA31SV穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的SGC7901、EC9706和KB細胞均擴增出272BP的SV40TAG基因特異性條帶未轉(zhuǎn)染細胞與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞檢測不到此條帶。4免疫細胞化學(xué)染色PCDNA31HKSV與PCDNA31SV穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的SGC7901、EC9706和KB細胞中均檢測到SV40TAG的陽性表達未轉(zhuǎn)染細胞與空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞無SV40TAG的表達。5MTT結(jié)果PCDNA31HKSV和PCDNA31SV穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的SGC7901細胞的生長增殖速度比未轉(zhuǎn)染細胞及空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞明顯加快差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。6流式細胞術(shù)檢測細胞周期結(jié)果PCDNA31HKSV與PCDNA31SV穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的SGC7901細胞中G1期細胞比例減少及PI指數(shù)增加與未轉(zhuǎn)染SGC7901細胞和空質(zhì)粒PCDNA31轉(zhuǎn)染組細胞相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。結(jié)論1PCDNA31HKSV穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的SGC7901、EC9706和KB細胞中SV40TAG基因穩(wěn)定表達。2SV40TAG基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染促進SGC7901細胞增殖。

簡介：分類號學(xué)號學(xué)號學(xué)校代碼學(xué)校代碼10487密級密級博士學(xué)位論文線粒體融合素基因2粒體融合素基因2真達載構(gòu)對細真達載構(gòu)對細核表體建及其肝癌胞生核表體建及其肝癌胞生學(xué)為響研學(xué)為響研物行影及機制究物行影及機制究學(xué)請學(xué)請位申人位申人王堯?qū)W專業(yè)學(xué)專業(yè)科科學(xué)外科外科普外普外導(dǎo)教師導(dǎo)教師指指鄭啟鄭啟昌教授辯答日期答日期2008年5月獨創(chuàng)性聲明獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明，本學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果的總結(jié)。盡我所知，除文中已經(jīng)標明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本人將承擔本聲明引起的一切法律后果。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)華中科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在_____年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密□。（請在以上方框內(nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名日期年月日日期年月日

簡介：為探討GCSF動員的供體外周血中不同樹突狀細胞DC亞群的生物學(xué)特性，本文從下述兩方面進行了研究。一、GCSF動員的供體單核細胞來源的DO免疫生物學(xué)特性研究實驗方法GCSF動員的供體外周血單個核細胞細胞貼壁后，在含IL4和GMCSF的無血清培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)7D，再用IL10、ATG和TNFA進一步分組誘導(dǎo)2D。收集上清液及細胞，分別用流式細胞術(shù)、ELISA、抗原吞噬實驗和混合淋巴細胞反應(yīng)MLR測定各組DC的HLADR、CD1A、CD11C、CD40、CD80分子表達，IL12P70分泌，抗原吞噬功能以及同種異體反應(yīng)刺激功能。結(jié)論從GCSF動員的供體外周血單個核細胞中可以誘導(dǎo)產(chǎn)生IDC，TNFA能誘導(dǎo)其分化成熟，IL10、ATG誘導(dǎo)可使其獲得致耐受的特性；與健康獻血員相比，GCSF動員的供體外周血單個核細胞來源的DC表型相對幼稚，同種異體反應(yīng)刺激能力較弱；盡管從GCSF動員的供體PBMC中誘導(dǎo)產(chǎn)生CDLADC的效率不及未經(jīng)動員的健康獻血員高，但因從動員的供體外周血中可以采集到大量的PBMCS，因此，GCSF動員的外周血有望成為不同DC的重要來源途徑。二、GCSF動員的供體不同DC亞群免疫生物學(xué)特性的研究實驗方法用免疫磁珠分離髓細胞來源的DCMDC和漿細胞來源的DCPDC，并分別用TNFA、CPG2006OND誘導(dǎo)為成熟MDCMMDC和成熟PDCMPDC。具體的研究方法如下1流式細胞術(shù)測定各DC亞群的表型；2MLR測定不同DC亞群同種異體反應(yīng)刺激能力；3ELISA測定MLR培養(yǎng)上清液中INFΓ、IL10的含量，細胞內(nèi)流式術(shù)測定MLR后CD4T細胞的INFΓ和IL4分泌水平；4流式細胞術(shù)和RTPCR測定MLR后CD4CD25HIGHT細胞比例和FOXP3MRNA的表達。結(jié)論采集的供體外周血中兩類DC亞群雖然HLADR高表達，但仍處于非成熟狀態(tài)，在合適的條件下分化成熟無論MDC成熟與否均表現(xiàn)出很強的刺激T細胞增殖能力，可以促進使T細胞分泌IFNΓ增加，其分泌的增加可能是促進向TH1極化的結(jié)果；PDC可能并不像MDC一樣有效地捕獲、處理和負載抗原到MHC分子上，因此呈遞抗原效率低，表現(xiàn)出對T細胞的弱刺激增殖特性；PDC雖然也可以促進T細胞分泌IFNΓ的分泌，但似乎并非是通過TH1細胞分泌；PDC并不能促進TH2類因子IL4的分泌，對TH2的極化作用可能表現(xiàn)在IL10的分泌上；PDC有誘導(dǎo)CD4CD25HIGHTREG的作用。

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文SV40大T抗原體外永生化視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及其生物學(xué)特性的研究姓名朱哲申請學(xué)位級別碩士專業(yè)眼科學(xué)指導(dǎo)教師李永平20080510中山大學(xué)碩士學(xué)位論文SV40大T抗原體外水生化視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞及其生物學(xué)特性的研究一、研究目的病例診斷視神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤一例，組織塊法原代培養(yǎng)的視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞，傳代后以SV40大T抗原將其永生化，擬建立視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系，并進一步研究其生物學(xué)特性。二、研究方法1、病例報告中山大學(xué)眼科醫(yī)院手術(shù)室切除的腫瘤標本一例，用福爾馬林固定，石蠟包埋后切片，HE染色；免疫組織化學(xué)GFAP，VIM染色，光學(xué)顯微鏡鏡下觀察。2、同一例視神經(jīng)膠質(zhì)瘤，從中山大學(xué)眼科醫(yī)院手術(shù)室無菌取出帶到實驗室，組織塊培養(yǎng)法體外培養(yǎng)視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞，并傳代十代，應(yīng)用倒置顯微鏡和MTT比色法觀察瘤細胞的生長增殖情況，用免疫組織化學(xué)染色，掃描和透射電鏡對瘤細胞進行鑒定。3、采用LIPOFECTOMIN2000法，將攜帶SV40大T抗原的質(zhì)粒TGLSLOXPHYTKCMVLT轉(zhuǎn)染入傳代培養(yǎng)至第十代的視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞，HYGROMYCINB進行克隆篩選，并反復(fù)傳代培養(yǎng)；MTT比色法觀察瘤細胞增值情況；細胞克隆實驗觀察瘤細胞的克隆形成能力；透射電鏡、免疫組織化學(xué)、RTPCR進行鑒定。4、將轉(zhuǎn)染后的視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞和人黑色素瘤細胞OCML在三維培養(yǎng)基3DCULTURE中進行培養(yǎng)，HE染色形態(tài)學(xué)觀察。用RTPCR檢測血管內(nèi)皮相關(guān)基因，以人黑瘤細胞株OCM一1做陽性對照，人視網(wǎng)膜色素上皮細胞株D一407為陰性對照。5、將轉(zhuǎn)染后的視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞放入無血清的限制分化培養(yǎng)基中，倒置顯微鏡下觀察，用免疫組化、免疫熒光以及RTPCR做鑒定。三、研究結(jié)果L、對腫瘤標本的的HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察，確診為視神經(jīng)膠質(zhì)瘤I級。2、組織塊法成功體外培養(yǎng)該例視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞，初長出來的腫瘤細胞以梭形、圓形及橢圓形為主。細胞貼壁生長，消化后的瘤細胞呈圓或橢圓形。體外培養(yǎng)傳至第3代時，經(jīng)免疫組化鑒定，視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞己占98％以上。腫瘤細胞傳代至第十代后，出現(xiàn)細胞生長緩慢甚至停滯和凋亡等。透射電鏡可見瘤細胞

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文人脈絡(luò)膜黑色素瘤腫瘤干細胞生物學(xué)特性研究姓名劉斌申請學(xué)位級別碩士專業(yè)眼科學(xué)指導(dǎo)教師李永平20080520中山大學(xué)碩士學(xué)位論文人脈絡(luò)膜黑色素瘤腫瘤干細胞生物學(xué)特性研究分離純化成功后，進一步研究深低溫凍融對腫瘤干細胞的殺傷作用，以及引起腫瘤細胞退變的機制，為脈絡(luò)膜黑色素瘤的臨床治療提供新思路。1研究目的通過對OCM1細胞中腫瘤干細胞的分離培養(yǎng)，驗證脈絡(luò)膜黑色素瘤中存在著腫瘤干細胞，進一步純化腫瘤干細胞后，研究其生物學(xué)特性。利用深低溫反復(fù)凍融對腫瘤干細胞進行殺傷，觀察殺傷作用，并分析殺傷的可能機制。2實驗方法使用無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基鯽1LM舶EMEDIU札SFM，分離純化培養(yǎng)腫瘤干細胞，觀察細胞生長的變化。使用CDL33，M1LSASLLI1免疫細胞染色，誘導(dǎo)分化，動物實驗研究腫瘤干細胞的生物學(xué)特性。深低溫反復(fù)凍融腫瘤細胞和腫瘤干細胞后，MTT法，克隆實驗檢測細胞抑制情況，髓染色，電鏡觀察細胞形態(tài)學(xué)變化。使用P16，HOECHST33342免疫細胞化學(xué)染色，流式細胞儀檢測CD40及細胞膜電位的變化，并使用共聚焦顯微鏡觀察細胞內(nèi)鈣離子的變化。3結(jié)果31用SFM培養(yǎng)基培養(yǎng)后，細胞均為懸浮團狀集落生長，呈現(xiàn)典型的干細胞生長方式，CDL33，MUSASLLI1陽性表達，并可以分化為MM45，GFAP，S100，NSE陽性的細胞。L105個CMSC細胞就可以在BALB／C裸小鼠體內(nèi)成瘤，而注射L105個OCM1細胞的BALB／C裸小鼠均未成瘤。32凍融后OCM1細胞出現(xiàn)大量的凋亡細胞，而CMSC則以壞死為主，凋亡細胞少見。電鏡下觀察到冰晶的結(jié)構(gòu)特征。33激光共聚焦顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，凍融次數(shù)的增加，OCM1細胞凋亡率增高。O53組凋亡細胞最多，達到51％。流式細胞儀測定顯示凍融后細胞膜電位下降，凍融前后CD40陽性細胞比率差異明顯，且呈一定的量效關(guān)系。共聚焦顯微鏡觀察到凍融后細胞發(fā)生較高比例的凋亡，細胞內(nèi)鈣離子濃度隨著細胞凋亡比率的增高而升高，WBSTEMBLOT檢測顯示細胞凍融后SUN，IVIIL蛋白表達增加。4結(jié)論41脈絡(luò)膜黑色素細胞中存在腫瘤干細胞，腫瘤干細胞具有分化和增殖的能力，且表現(xiàn)出更強的致瘤性。Ⅲ

簡介：點擊查看更多糖尿病合并難愈創(chuàng)面中表皮細胞生物學(xué)行為的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文裸鼠高致瘤性人白血病細胞系的生物學(xué)特性研究姓名呂書晴申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師許小平200151摘要的K562A克隆株的染色體核型，發(fā)現(xiàn)K562N細胞的致瘤性主要與1、2、16、18、20、21、11及12號等染色體的變化有關(guān)。HL60細胞系的染色體數(shù)目為3871，干系為近二倍體，從高致瘤性的HL60RL細胞系衍生的各克隆株都為近三倍體，比較分析致瘤性不同的細胞株的染色體核型，發(fā)現(xiàn)MAR3、19、21、22和5號等染色體的變化與HL60N細胞的致瘤性相關(guān)。用含有12800個基因的EDNA芯片對K562N和K562細胞系進行基因表達差異分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)K562N和K562細胞差異表達的基因有139條，其中K562N細胞表達上調(diào)的有42條，表達下調(diào)的有97條。在這139條基因中，有85條已在GENEBANK中登錄，54條為新序列。這些在K562N細胞中表達變化的基因可以劃分為不同的功能群。上調(diào)的基因包括原癌基因、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)的基因、與細胞骨架、細胞動力學(xué)相關(guān)的基因及編碼細胞代謝酶和物質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白的基因。下調(diào)的基因包括潛在的腫瘤抑制基因、調(diào)控凋亡、細胞周期和信號傳導(dǎo)的基因、某些代謝相關(guān)的基因及與免疫功能相關(guān)的基因。結(jié)論與K562和HL60細胞相比，裸鼠高致瘤性的K56211、HL60N細胞的細胞生物學(xué)行為表現(xiàn)為軟瓊脂培養(yǎng)集落形成率增高；S期細胞比例增多；常染色質(zhì)增多、異染色質(zhì)減少、微絲增多等超微結(jié)構(gòu)改變；對裸鼠NK細胞殺傷的耐受性增強；所致裸鼠腫瘤組織內(nèi)炎性細胞浸潤減少。細胞染色體核型分析示K562N細胞干系核型由K562細胞干系的亞三倍體轉(zhuǎn)變?yōu)榻扼w，1、2、16、18、20、21、1L、12等染色體的改變與K562N細胞系的裸鼠致瘤性升高有關(guān)。而高致瘤性的IIL60N細胞系各克隆株由HL60細胞的近二體核型轉(zhuǎn)變?yōu)榻扼w，MAR3、19、21、22、5號等染色體變化與HL60N細胞的致瘤性相關(guān)。對K562N和K562細胞的DNA芯片基因表達差異研究表明K562N細胞的致瘤性增高涉及多基因的表達變化，包括一系列腫瘤相關(guān)基因的表達上調(diào)和腫瘤抑制基因的表達下調(diào)，一系列轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子和細胞周期調(diào)節(jié)蛋白的表達變化，使細胞凋亡受阻，促進細胞周期進展，增殖過度，另外還涉及編碼細胞骨架蛋白和代謝酶的基因表達變化。這些差異表達的基因代表了一個與K562N細胞裸鼠致瘤性相關(guān)的特異的基因表達譜。正是這些基因的表達變化，使K562N細胞表現(xiàn)出一系、／列相關(guān)的生物學(xué)特性，并導(dǎo)致其在裸鼠體內(nèi)致瘤性增強。_J，關(guān)鍵詞白血病致瘤性裸鼠生物學(xué)特性2

簡介：遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文大黃素、羅紅霉素對脂多糖誘導(dǎo)的人牙周膜成纖維細胞的生物學(xué)效應(yīng)姓名范永祥申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師劉琪2003620遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文4中文摘要1人牙周膜成纖維細胞的培養(yǎng)和鑒定采用組織塊培養(yǎng)法對40例人的正常年輕恒牙的牙周膜組織進行體辨培養(yǎng)。牙周膜戲纖維細胞培養(yǎng)成功滾為20％。細胞作生長曲線觀察5代后緬藏生長醞盛；分裂歪鬻，綴SABC法睪綏魏豹藏渡形絲礞白和抗角蛋白抗體染色證明其來源予中胚層的成纖維細胞。2大黃素對脂多糖誘導(dǎo)的人牙周膜細胞的生物學(xué)效應(yīng)髑的初步探討大黃綮E肋對牙周炎的抗炎作用機理。方法裂賃內(nèi)毒素撩多耱LPS甍激久牙髑貘纓瑰，通過繅戇培養(yǎng)按術(shù)、四哇鹽眈色滋、ELISA、RTPCR，檢測大黃素對不同狀態(tài)下靜人牙周膜細胞增馥、腫瘤壞死因子一OTTNFA分泌及腫瘸壞死因子～N轉(zhuǎn)換酶TACEMRNA表達的影響。結(jié)糶大黃素黠程穗臻濃度夔LPSO。LG／M1懿程瑤整效纛謄較鞠鼴協(xié)同作用，對高濃艘LPS10UG／ML、LOOUG／M1抑制繃胞生長的作用有減緩或抵消效應(yīng)。大黃素顯著抑制LPS刺激人牙周膜細胞所引起的TNFD分泌增菇，恧對于未經(jīng)LPS列滋驗太牙弱簇繃魏，可程進陋一CT分泌。大黃素莘獯佟藤入牙爝膜細胞時，JC雩TACEMRNA的衰達擻無明顯作用，但對LPS刺激PDLC的TACEMRNA高表達具有明顯的抑制作用。結(jié)論大黃素能顯蔣改善LPS刺激的人牙周膜細胞的增藏活性，調(diào)控TNF噸靜釋放，對揀TACEMRNA高表達，提示使甩適當賚8爨戇大黃綮對LPS剿激靛人牙爨貘細瑰存保護佟穗。3羅紅霉素對脂多糖誘導(dǎo)的人牙周膜成毿維細胞腫瘤壞死閑學(xué)一A、白細胞介素6釋放，核因子KB表達的影晌

簡介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文卵圓細胞在轉(zhuǎn)化和分化過程中的生物學(xué)特征及其分子調(diào)控機制的初步探討姓名劉君申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理學(xué)指導(dǎo)教師薛玲20060512卵圓細胞在轉(zhuǎn)化和分化過程中的生物學(xué)特征及其分子調(diào)控機制的初步探討標志物。。。這提示肝干細胞卵圓細胞、肝細胞和肝癌細胞問存在著復(fù)雜的內(nèi)在聯(lián)系，如何調(diào)控其分化成為問題的關(guān)鍵，也是目內(nèi)外眾多學(xué)者研究的熱點。然而，經(jīng)過數(shù)十年的探討，關(guān)于卵圓細胞分化、轉(zhuǎn)化凋控的機制現(xiàn)今仍不十分清楚。其在何種條件下向正常方向分化何種條件下發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化其分子機制等均未闡明。針對以上研究現(xiàn)狀，我們試圖尋找啕；途徑，能夠連續(xù)、動態(tài)地觀察卵圓細胞不同分化狀態(tài)下的生物學(xué)特征，并借助高通量、簡便快捷的分子遺傳學(xué)分析技術(shù)，全面深入地探求調(diào)控卵圓細胞分化方向的關(guān)鍵因子，明確干細胞分化為成熟肝細胞和肝癌細胞的分水嶺。這一研究不僅具有重要的理論意義一一有助于我們深入了解肝臟以及肝臟腫瘤的發(fā)生機制，也具有巨大的應(yīng)用價值一一今后將卵圓細胞安全地應(yīng)用于臨床干細胞治療。實驗?zāi)康脑噲D通過建立動態(tài)的觀察體系，探求卵圓細胞自發(fā)轉(zhuǎn)化和濤導(dǎo)分化過程中的演變規(guī)律、生物學(xué)特征，分析相關(guān)的分子機制，以期對肝臟的發(fā)生學(xué)和肝癌的癌變機制提供實驗依據(jù)。實驗方法復(fù)蘇肝臟卵圓細胞0C3第18代P18，在分別加入細胞因子EGFA組和HGFEGFB組的培養(yǎng)條件下長期體外培養(yǎng)，運用常規(guī)細胞生物性狀檢測指標以及免疫細胞化學(xué)、半定量RTPCR等技術(shù)，觀察0C3在不同條件下的分化狀態(tài)，并運用蛋白芯片技術(shù)分析該過程中蛋白表達譜的改變。實驗結(jié)果和結(jié)論為了鑒定所復(fù)蘇的細胞的性質(zhì)，實驗前期對其進行了形態(tài)學(xué)、組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)等指標的檢測。其結(jié)果表明，這種細胞為卵圓形核，體積小約為10UM，胞漿少。電子顯微鏡顯示為原始未分化細胞之超微結(jié)構(gòu)特點；OV一6、CKIT等干細胞標志陽性，表明這種細胞是建株之卵圓細胞。1、細胞在表皮生長因子EGF的作用F維持生長培養(yǎng)至66代，在一般形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)及生物學(xué)性狀等方面，均發(fā)生了明顯變化，已經(jīng)符合轉(zhuǎn)化細胞條件。這表明，化學(xué)致癌劑誘發(fā)增生的卵圓細胞，在體外培養(yǎng)能維持生II

簡介：浙江大學(xué)博士學(xué)位論文SNC19/ST14基因的表達對大腸癌細胞生物學(xué)特性及其轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達的影響姓名孫立峰申請學(xué)位級別博士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師鄭樹20040501浙缸掌博士掌位論文SNCL9，STL4基因的表達對大腸癌細胞生物學(xué)特性及其轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達的影響中文摘要近年來腫瘤的發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢，復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤致死的重要原因?。隨著腫瘤分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制成為最熱門的研究領(lǐng)域之一，但迄今對轉(zhuǎn)移機制仍缺乏明確詳盡的解釋。目前已認識到，腫瘤的轉(zhuǎn)移是一系列持續(xù)選擇的過程，包括腫瘤細胞對細胞外基質(zhì)EEL的識別、對ECM的降解、細胞遷移、在脈管內(nèi)轉(zhuǎn)運播散以及轉(zhuǎn)移器官的選擇。其中惡性細胞與ECM的相互作用被認為足惡性腫瘤細胞轉(zhuǎn)移過程中攝關(guān)鍵的分子事件之一?。腫瘤細胞必須識別和降解其周圍的ECM才能發(fā)生侵潤和轉(zhuǎn)移。因此研究ECM降解酶對認識和控制腫瘤轉(zhuǎn)移具有重要的意義。與腫瘤細胞的侵潤有關(guān)的一種ECM降解酶家族被稱為絲氨酸蛋白酶家族包括尿激酶型UPA，彈性蛋白酶ELASTASE，組織蛋白酶GCATHEPSING等“1。晟近又發(fā)現(xiàn)一個絲氨酸蛋白酶家族的新成員一II型跨膜絲氨酸蛋白酶家族TYPEIITRANSMENBRANCESERINEPROTEASES，TRSPS，其家族成員廣泛分布于各種組織細胞的膜上，參與降解ECM、水解活化細胞膜蛋白、與細胞骨架相互作用及信號傳導(dǎo)等作用，而且可能還與腫瘤細胞的侵潤轉(zhuǎn)移有關(guān)”1。SNCL9俗，，4／TGTSPL／MATRIPTASE基因被認為是TTSPS基因家族的一個成員”’。SNCL9基因是1993年浙江大學(xué)腫瘤研究所鄭樹教授等應(yīng)用減式雜交技術(shù)從正常大腸CDNA文庫中篩選到的一個太腸癌新相關(guān)基因“‘?，1995年被GENBANK作為新基因登錄，1998年國際基因命名委員會將SNCL9命名為STL4”1。隨后，從不同物種的組織細胞、乳汁和腫瘤細胞系中，得到多個SNCIG／STL4基因的同源產(chǎn)物，如MATRIPTASE”’，膜型絲氨酸蛋白酶MEMBRANCE～TYPESERINEPROTEINASE一1，},FISPL■EPITHINL。?，XMTSPI?1，MATRIPTASE2?和MMATRIPTASE一2?1。SNCL9／STL4蛋白現(xiàn)被命名為STL4／MTSPL／MATRIPTASE／TADG一15EC3．4．21。蛋白酶活化受2PROTEINASEACTIVATEDRECEPTOR2．PAR2、

簡介：點擊查看更多不同來源CIK細胞的生物學(xué)特性與臨床應(yīng)用研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文聚焦超聲近場對體外內(nèi)皮細胞ECV304生物學(xué)效應(yīng)姓名劉毅申請學(xué)位級別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師李成志20090501重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文方法1聚焦超聲近場對內(nèi)皮細胞ECV304增殖的影響實驗分組輻照功率43、5W；輻照頻率101、L12MHZ；輻照時間5、10、L5、20、25、30S。實驗方法MTT法檢測不同參數(shù)條件下的聚焦超聲近場對體外培養(yǎng)ECV304增殖的影響。2最佳聚焦聚焦超聲近場輻照參數(shù)的篩選用SAS統(tǒng)計軟件分析內(nèi)皮細胞相對成活比OD處理組／0D正常組，篩選出細胞最大成活比時的聚焦超聲近場輻照參數(shù)。3聚焦超聲近場對內(nèi)皮細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的影響實驗分組正常對照組、聚焦超聲近場輻照組輻照參數(shù)設(shè)置112MHZ、43W、LOS。實驗方法采用一維SDSPAGE電泳色譜電噴霧離子阱質(zhì)譜技術(shù)檢測聚焦超聲近場輻照內(nèi)皮細胞前后的差異蛋白質(zhì)；免疫印跡驗證差異蛋白ACTIN的表達。繼里拿口術(shù)1聚焦超聲近場輻照后ECV304的增殖依賴于輻照的功率、頻率、時間；與其他對照組相比，在輻照功率43W、頻率112MHZ、輻照時間10S的條件下，最有利于細胞增殖。同時，經(jīng)聚焦超聲近場輻照后的ECV304生長形態(tài)改變，近圓形。2結(jié)合相關(guān)文獻和實驗中細胞增殖具體情況，我們將采用輻照功率43W、頻率112MHZ、時間L0S的聚焦超聲近場進行后續(xù)實驗。弓

簡介：；711醫(yī)科大學(xué)181098學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，實驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔相應(yīng)的法律責任。一繇搬勒締勃岬凰齠年’臼々日；；IT醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)老師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責自負。研究生簽名讒朋免灸導(dǎo)師麟易嗽馳年伽鈾7J錄14網(wǎng)膜色素上皮∞E細胞的影響8養(yǎng)的研究●；I材料與方法9結(jié)果12附圖13討論16小結(jié)18參考文獻19第二部分BEVACIZUMABAVASTIN對豬視網(wǎng)膜色素上皮RPE細胞的毒性作用研究前言21刖舌2L材料與方法21結(jié)果J23附圖24附表28討論29小結(jié)30參考文獻31第三部分探討B(tài)EVAEIZUMABAVASTIN對豬視網(wǎng)膜色素上皮RPE細胞的功能研究前言32剛吾3Z材料與方法32結(jié)果31／多日7KJ附圖38附表42

簡介：遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文涎腺腺樣囊性癌腫瘤干細胞生物學(xué)特性初探姓名陳芳申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師宋琦20070501遵義醫(yī)學(xué)院碩士研究生畢業(yè)論文涎腺腺樣囊性癌腫瘤干細胞生物學(xué)特性初探涎腺腺樣囊性癌腫瘤干細胞生物學(xué)特性初探中文摘要惡性腫瘤是目前危害人類健康的重要疾病之一，其發(fā)病及轉(zhuǎn)移機制是醫(yī)學(xué)家們正努力研究的課題方向，也直接關(guān)系到腫瘤的防治策略。近年來腫瘤千細胞學(xué)說的提出為我們重新認識腫瘤的本質(zhì)與起源，以及臨床腫瘤治療的研究提供了新的思考方向。舊的L對腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移細胞株ADENOIDCYSTICCARCINOMACELLCLONESHIG蜘YMETASTATICTOTHELUNGACCM中不同表型的腫瘤亞群細胞的細胞膜抗原表達的差異性進行研究和分析，為今后進一步分離腫瘤干細胞打下一定的實驗基礎(chǔ)?！痉椒↙①采用單細胞體外培養(yǎng)的方法了解ACCM的分裂和增殖的特點，以探討腫瘤于細胞存在的可能性。②利用MRR比色試驗法繪制ACCM的生長曲線。③利用流式細胞儀FLOWCYTOMETRYFCM檢測ACCM腫瘤細胞的表面抗原CD24、CD44、ABCG2的表達情況。④采用免疫組化的方法檢測單細胞體外培養(yǎng)具有增殖能力的ACCM腫瘤細胞與常規(guī)體外傳代培養(yǎng)的ACCM腫瘤細胞的CD44、CD24和MMP9表達差異度?！窘Y(jié)果L①在單細胞體外培養(yǎng)6D后，ACCM單細胞僅有862％持續(xù)分裂、增殖，麗并非全部的細胞都發(fā)生分裂，②ACCM的生長曲線顯示細胞的倍增時間接近48小時。③免疫組化結(jié)果顯示，單細胞體外培養(yǎng)具有增殖能力的ACCM細胞與常規(guī)傳代培養(yǎng)的ACCM細胞相比，兩者在CD24、CD44和MMP9的表達上無統(tǒng)計學(xué)上的差異，CD44和MMP9在ACCM細胞中陽性表達率很高，CD24在ACCM細胞中陽性表達率較低。④FCM檢測結(jié)果顯示，ACCM細胞表面CD44、ABCG2和CD44CD24。的表達率分別為90，67％、864％和7909％。【結(jié)論LDACCM腫瘤細胞具有異質(zhì)性，并不是所有的ACCM細胞都能克隆增殖，只有一小部分細胞能不斷地分裂增殖，大多數(shù)細胞最終死亡或凋亡。②單細胞體外培養(yǎng)具有增殖能力的ACCM細胞與常規(guī)傳代培養(yǎng)的ACCM細胞相比，CD44、CD24和MMP一9的表達無顯著的增加或降低，因而對于分離ACCM的腫瘤干細胞，CD44、CD24和MMP9缺乏特異性。CD44和MMP9與腫瘤的高轉(zhuǎn)移性密切相關(guān)。轉(zhuǎn)移潛能高的涎腺腺樣囊性癌細胞具有較強的基質(zhì)金屬蛋白酶分泌。ACCM也象某些實體瘤一樣含有側(cè)群細胞SIDEPOPULATIONSP在后續(xù)的研究中，可考慮利用SP細胞的表型標記“ABCG2”，用FCM或磁珠分選技術(shù)將SP細胞從腫瘤中分離出來，通過對SP細胞的研究迸一步探討腫瘤